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补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中p-Tau和Beta-tubulin表达的影响
目的:观察补肾益髓(Bu Shen Yi Sui,BSYS)方及其拆方补肾(Bu Shen,BS)和化痰活血(Hua Tan Huo Xue,HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)小鼠脑和脊髓中p-Tau和Beta-tubulin的作用.方法:C57 BL/6小鼠雌性随机分为正常对照(NC)、模型(MO)、醋酸泼尼松(PA)、梓醇(CA)、BSYS、BS和HTHX组.造模当天与造模后第7天于小鼠背部两侧皮下注射抗原,即50 μg髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)3565、完全弗氏佐剂(CFA)与结核分支杆菌(TB)混合,并在免疫当天和2d后腹腔注射500 ng的百日咳毒素(PTX).每天对小鼠进行灌胃,观察其体重及神经功能评分,并于造模第20 d和第40d分别取脑和脊髓进行病理检测.采用免疫组化法检测p-Tau和beta-tubulin的表达.结果:与MO组比较,BSYS、BS和HTHX组体重与神经功能评分均出现明显上升,HE染色可观察到炎细胞显著减少,核固缩减轻,同时,BSYS、BS和HTHX方均可明显下调p-Tau表达(P＜0.05,P＜0.01),上调beta-tu-bulin蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:BSYS方及其拆方BS和HTHX均对EAE小鼠有神经保护作用,表现在减少体重丢失,降低神经功能评分,减轻炎炎性细胞浸润,减轻轴突损伤及促进其修复,尤以BSYS全方更为显著.
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补肾益髓方及其拆方对星形胶质细胞胶质瘢痕中GFAP与CSPGs表达的影响
目的 观察补肾益髓方及其拆方补肾方与化痰活血方对星形胶质细胞损伤后细胞活性的影响及胶质瘢痕中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、硫酸软骨素糖蛋白(CSPGs)表达的影响.方法 体外原代培养星形胶质细胞,划痕法建立胶质瘢痕模型,分别加入补肾益髓方、补肾方和化痰活血方含药血清,继续培养24 h后,用CCK-8法测定细胞存活率,高内涵法测定GFAP与CSPGs蛋白的表达.结果 与正常对照组比较,模型组细胞存活率明显下降(P＜0.01),GFAP与CSPGs蛋白显著上调(P＜0.01).与模型组相比,补肾益髓方、补肾方及化痰活血方含药血清均能够促进星形胶质细胞细胞存活率(P＜0.01);均能够下调CSPGs蛋白的表达(P＜0.01或P＜ 0.05).补肾益髓方及补肾方升高细胞存活率优于化痰活血方(P＜0.05或P＜0.01);降低CSPGs蛋白的表达方面补肾益髓方优于化痰活血方(P＜0.05).结论 补肾益髓方及其拆方均能够抑制损伤后星形胶质细胞胶质瘢痕中CSPGs蛋白的表达,以促进轴突的修复与再生,以补肾益髓方效果佳.
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补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中β-APP和MAP-2表达的影响
目的 观察补肾益髓(BSYS)方及其拆方补肾(BS)和化痰活血(HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脑和脊髓中β-淀粉样前体蛋白(β-APP)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的作用.方法 56只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC)、模型组(MO)、醋酸泼尼松组(PA)、梓醇组(CA)、补肾益髓组(BSYS)、补肾组(BS)和化痰活血组(HTHX),每组8只.对照药给予PA(6 mg/kg),CA(40 mg/kg);BSYS、BS和HTHX组分别以3.02 g,1.44 g和1.57 g生药/kg给药.NC及MO组以等量蒸馏水代替.每日1次,连续灌胃40 d.小鼠发病第25日(急性期)和第40日(缓解期)取脑和脊髓,采用免疫荧光(IF)法检测β-APP表达,免疫组化(IHC)法检测MAP-2的表达.结果 发病第25日和第40日,MO组小鼠脑β-APP表达较NC组显著上调(P＜0.001),而MAP-2表达则较NC组明显下调(P＜ 0.01或P＜0.001),与MO组比较,各治疗组(PA、CA、BSYS、BS和HTHX组)均可明显下调β-APP蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01),上调MAP-2表达(P＜ 0.05或P＜0.01).其中发病第25日小鼠脑β-APP表达PA组效果优于CA、BS及HTHX组(P＜0.05).各组小鼠脊髓内β-APP、MAP-2表达变化趋势与脑相似.结论 BSYS方及其拆方均能减轻轴突损伤及促进其修复,尤以BSYS全方更为显著.
关键词： 补肾益髓方及其拆方 多发性硬化 实验性自身免疫性脑脊髓炎 β-APP MAP-2
