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德都红花-7味散原药方与优化方对肝纤维化大鼠Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA表达的影响
目的:探讨德都红花-7味散原药方及优化方对肝纤维化大鼠Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA表达的影响.方法:40只Wistar大鼠分为正常组、模型组、阳性药组、原药组、优化组.大鼠ip 30％ CCl4橄榄油溶液建立肝纤维化模型.同时1次/日ig给药,阳性药组给予秋水仙碱片0.4 mg·kg-1;原药组给予德都红花-7味散0.6 g·kg-1;优化组给予德都红花-7味散优化方0.6g·kg-.连续40 d后处死大鼠.取肝脏天狼星红染色,观察肝组织纤维化程度和Ⅰ,Ⅲ型胶原分型.酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织匀浆Ⅲ型前胶原和Ⅳ型胶原,层粘连蛋白(LN),透明质酸(HA)含量.实时荧光定量PCR法检测Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原mRNA表达变化.结果:天狼星红染色模型组Ⅰ,Ⅲ型胶原纤维较正常组增多,阳性药组、原药组、优化组Ⅰ,Ⅲ型胶原纤维较模型组减少.与正常组比较,酶联免疫法检测模型组Ⅳ型胶原,HA含量升高(P＜0.05).与模型组比较,阳性药组、原药组、优化组Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、HA含量明显降低(P＜0.05).实时荧光定量PCR法检测模型组Ⅰ型胶原mRNA和Ⅲ型胶原mRNA表达较正常组上调(P＜0.01).阳性药组、原药组、优化组Ⅰ型胶原mRNA和Ⅲ型胶原mRNA表达较模型组下调(P＜0.01).原药组、优化组Ⅰ型胶原mRNA表达较阳性药组下调(P＜0.05).优化组Ⅰ型胶原mRNA表达较原药组下调(P＜0.05).结论:德都红花-7味散原药方与优化方是通过抑制Ⅰ型胶原mRNA和Ⅲ型胶原mRNA的转录,达到阻断或延缓肝纤维化的发生发展,德都红花-7味散优化方优于原药方.
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中药复方对骨质疏松大鼠雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响
目的:探讨自拟中药复方对实验性骨质疏松大鼠雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响及骨细胞数目的影响.方法:切除大鼠卵巢造成骨质疏松模型,随机分组对照处理,3月后应用原位杂交法和HE色观察雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA的表达及成骨细胞数量.结果:中药复方组成骨细胞数目增加(P＜0.01),雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达水平提高(P＜0.01).结论:自拟中药复方具有拟雌激素样作用,可使骨质疏松大鼠骨内雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达增强,调节骨代谢,增加骨质疏松大鼠成骨细胞数目.
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己酮可可碱抗肝纤维化及对I型胶原表达影响的实验研究
目的 研究己酮可可碱对胆管阻塞性肝纤维化大鼠Ⅰ型胶原基因表达的影响和抗纤维化的作用.方法 雄性SD大鼠60只,分为假手术组、肝纤维化模型组、己酮可可碱组.6周后比较各组肝组织学评分,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)mRNA表达水平,分析其对胶原合成的影响.结果 已酮可可碱能够降低纤维化的组织学评分,降低Col-Ⅰ mRNA表达水平.结论 己酮可可碱在大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型中具有一定的抗纤维化作用.
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补虚化瘀针法对骨质疏松大鼠Ⅰ型胶原mRNA表达的影响
目的:探讨"补虚化瘀"针法对骨质疏松大鼠Ⅰ型胶原基因表达的影响.方法:选择8月龄Wistar雌性大鼠50只,随机抽取10只作为空白对照组即假手术组,其它40只做去势手术.3个月后将去势大鼠随机分成模型组、针刺组、针刺加雌激素组、雌激素组.共治疗12周.治疗结束后,取大鼠股骨做Ⅰ型胶原mRNA原位杂交检测.结果:实验表明,治疗组与模型组相比,Ⅰ型胶原mRNA在成骨细胞内表达明显,且细胞数目增多.经图像分析系统测定,阳性反映面积与灰度测值均有明显差异(P<0.01).结论:"补虚化瘀"针法对骨质疏松大鼠有治疗作用,可增强Ⅰ型胶原mRNA表达的活性.
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低功率激光修复末端病大鼠跟腱胶原
背景:低功率激光疗法能对生物体产生特定的刺激作用(光生物调节作用),一般在不引起温度上升的情况下能引起某些生物学效应.目的:观察低功率激光对末端病大鼠跟腱组织中羟脯氨酸含量、Ⅰ型胶原基因表达的影响.方法:将96只Wistar大鼠随机分组:正常对照组不进行任何干预;造模组以电刺激跳跃法刺激大鼠足部,建立末端病大鼠模型;激光照射组建立末端病大鼠模型后于跟腱处给予低功率激光照射治疗.结果与结论:与正常对照组比较,末端病模型大鼠跟腱组织中羟脯氨酸含量与Ⅰ型胶原水平明显下降(P < 0.05).经低功率激光照射治疗后,末端病模型大鼠跟腱羟脯氨酸含量增加,Ⅰ型胶原合成在转录水平上的表达升高,且这种作用在造模7 d后开始出现,14 d时效果非常明显.表明低功率激光可以提高末端病模型大鼠羟脯氨酸合成量,促进胶原的代谢,在跟腱早期愈合中有一定的促进作用.
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Ⅰ型胶原对Ⅲ型胶原基因在切口疝病人培养的成纤维细胞中的表达
目的 探索细胞外基质在疝组织改变或由于成纤维细胞转彔缺陷导致切口疝发生过程中培养的成纤维细胞中Ⅰ型胶原Mrna和Ⅲ型胶原Mrna表达.方法 成纤维细胞来自切口疝病人和复发性切口疝病人,对照组来自正常健康组织而没有经过手术皮肤病人和虽有切口癍痕但无临床表现切口疝病人.用RT-PCR和Northern Blotting确定Ⅰ型胶原Mrna对Ⅲ型胶原Mrna比率.结果 RT-PCR结果表明了Ⅰ型胶原Mrna在切口疝病人(0.90±0.04)和复发性切口疝病人(1.19±0.04)组中,标相应地在癍痕组织(0.54±0.02)和健康组织(0.43±0.01).然而Ⅲ型胶原Mrna在切口疝病人显著增加至4.13±0.04和复发性切口疝病人增加至6.02±0.03,而在癍痕组织2.29±0.04,在健康组织中为1.72±0.03.疝病人的成纤维细胞Ⅰ型胶原Mrna对Ⅲ型胶原Mrna比率显著减少(P＜0.01).结论 在培养的皮肤成纤维细胞中Ⅰ型胶原Mrna对Ⅲ型胶原Mrna的比率减少,表明在切口疝病人存在胶原蛋白代谢紊乱.因此一个损伤的伤口愈合过程可能解释临床缝合修补疝组织不尽满意结果的原因.
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老年骨质疏松对Ⅰ型胶原免疫组化及Ⅰ型胶原mRNA的影响
目的 研究动物骨质疏松对Ⅰ型胶原及Ⅰ型胶原mRNA的影响,为预防骨质疏松提供基础理论.方法 对正常与骨质疏松模型大鼠椎骨以图像分析系统观察Ⅰ型胶原免疫组化及Ⅰ型胶原mRNA原位杂交检测.结果 得出了各组试样的阳性染色分别面积、平均灰度值、阳性反应面积等指标.结论 模型组各项指标显著低于正常对照组(P＜0.05).骨质疏松后胆原免疫组化指标及Ⅰ型胶原mRNA发生改变,易发生骨折.
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低分子牛骨多肽制备及对大鼠成骨细胞的影响
目的 从牛骨制备低分子多肽,并观察其对体外培养新生大鼠的成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响.方法 采用冷冻离心、等电点沉淀方法去除骨胶原,超滤法得到相对分子质量(Mr)10 000以下的牛骨多肽,经Sephadex G-10脱盐,浓缩后用Tricine-SDS-PAGE电泳对Mr进行检测.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定牛骨多肽对成骨细胞增殖的影响,ALP检测试剂盒测定细胞的ALP活性,RT-PCR法检测细胞中Ⅰ型胶原mRNA表达.结果 建立了牛骨多肽的制备方法.低浓度牛骨多肽组与实验对照组相比对成骨细胞的增殖不显著(P＞0.05),高浓度具有显著的增殖作用(P＜0.05),并呈现出剂量依赖性;中、高浓度(50～400μg/mL)牛骨多肽组可提高成骨细胞ALP的活性(P＜0.05),低浓度组(10μg/mL)提高ALP的活性不显著(P＞0.05);牛骨多肽能提高Ⅰ型胶原mRNA表达.结论 牛骨多肽的制备工艺简单,适合规模化生产;牛骨多肽能促进成骨细胞增殖、ALP活性和Ⅰ型胶原mRNA的表达.
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温和灸对去卵巢大鼠股骨Ⅰ型胶原表达的影响及意义
目的：观察去卵巢大鼠骨Ⅰ型胶原表达变化及温和灸、苯甲酸雌二醇注射液（ BE2）的干预效果，探讨“补虚化瘀”灸法治疗绝经后骨质疏松症（ PMO）的机制。方法将50只8月龄雌性Wistar大鼠随机分为假手术组10只和去势组40只，后者行双侧卵巢切除术，并于90 d后随机分为模型组、雌激素组、艾灸组和艾灸＋雌激素组各10只，其后假手术组和模型组正常饲养，雌激素组予BE2后肢肌肉注射、艾灸组按“补虚化瘀法”取穴行温和灸治疗，艾灸＋雌激素组同时给予BE2注射和艾灸治疗。疗程结合后处死大鼠，分别以免疫组化法和原位杂交法检测右股骨Ⅰ型胶原mRNA表达。结果模型组大鼠右股骨Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达均明显低于假手术组及各治疗组，各治疗组中仅艾灸＋雌激素组mRNA表达阳性反应面积明显大于艾灸组（P＜0．05或0．01），余各指标比较无显著差异。结论温和灸可明显增强去卵巢大鼠股骨Ⅰ型胶原表达（效果与BE2相似），此可能为“补虚化瘀”灸法治疗PMO的机制之一。
