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钩藤散对NIH-3T3细胞衰老模型增殖与凋亡的影响
目的:观察钩藤散对NIH-3T3细胞衰老模型增殖与凋亡的影响.方法:NIH-3T3细胞接种在含10％胎牛血清的DMEM培养至20代,然后分为年轻、空白、模型3个组,传至30代时,用H2O2处理,β-半乳糖苷酶染色试剂盒染色,观察衰老细胞形态、衰老指征,确认衰老模型是否成功建立；用钩藤散(17,8.5,4.25,2.15 g·kg-1)ig SD大鼠,每天2次,连续给药3d,于末次ig1 h后麻醉、腹主动脉采血,制备含药血清；用钩藤散含药血清处理衰老模型,观察衰老细胞形态、衰老指征、增殖与凋亡等指标.结果:模型组细胞较对照组形态有显著改变,细胞衰老比例明显增加(P＜0.05),因此H2O2氧化应激方法可成功建立细胞衰老模型；钩藤散含药血清能明显减少细胞形态的改变、改善衰老指征、促进细胞增殖(P＜0.01)、降低细胞凋亡(P＜0.01),尤其10倍剂量组为明显.结论:钩藤散能有效促进细胞增殖,降低细胞凋亡,从而防止衰老.
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sIL-13Rα2 抑制IL-13介导的NIH-3T3胶原I的合成及血吸虫病肝组织中sIL-13Rα2/IL-13的表达
目的 研究在成纤维细胞NIH-3T3中IL-13可溶性受体sIL-13Rα2对IL-13的抑制作用,为进一步研究sIL-13Rα2对日本血吸虫感染小鼠体内肝纤维化的治疗作用奠定基础.方法 用ELISA和RT-PCR检测感染日本血吸虫的BALB/c小鼠0、6、8、10和12w不同感染时期肝脏组织IL-13和sIL-13Rα2表达和转录水平.构建sIL-13Rα2表达质粒转染成纤维细胞NIH-3T3,用IL-13(50ng/mL)刺激转染后成纤维细胞NIH-3T3,用RT-PCR和Western blotting分别检测该细胞分泌的Ⅰ型胶原.结果 感染后小鼠肝脏肉芽肿组织中IL-13和sIL-13Rα2 的蛋白表达水平随感染时间的延长而逐渐增高,第8wIL-13水平达到高峰(16.1586 pg/mL),随后逐渐降低但仍高于正常水平(3.4146 pg/mL P =0.017);第10w sIL-13Rα2的分泌达到高峰(4827.426 pg/mL),以后逐渐减低,但仍高于正常水平(4057.112 pg/mL P =0.021).IL-13 和sIL-13Rα2的mRNA转录趋势和ELISA 检测结果 相符合,均随感染时间的延长而增高,分别在第8w和第10w达到高峰,随后逐渐降低但仍高于正常组小鼠(P =0.033; P =0.025).实验组(sIL-13Rα2=2mg/mL)Ⅰ型胶原mRNA转录水平较正常对照组减低8.83%(P =0.012);蛋白水平较对照组减低7.41%(P =0.031).结论 sIL-13Rα2在NIH-3T3细胞中对IL-13有抑制作用,提示sIL-13Rα2在治疗血吸虫病肝纤维化中具有潜在价值.
