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桂枝汤含药血清对不同比例Poly(I∶C)-LPS组合刺激肺巨噬细胞的干预效应
目的:基于方证相应原理,旨在探索建立一种模拟病毒-细菌共感染的桂枝汤汤证体外细胞模型,为进一步桂枝汤汤证动物模型的建立积累数据.方法:研究桂枝汤含药血清对不同浓度比例的聚肌胞苷酸[polyinosinic polycytidylic acid,Poly(I∶C)]与脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)混合物刺激的大鼠肺的巨噬细胞(NR8383) Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)及其下游信号转导通路的影响.采用大鼠肺巨噬细胞株NR8383,分别用25,50,100 mg· L-1的Poly(I∶C)与1,5,10 mg·L-1 LPS刺激NR8383细胞,前者于3,6,12,24 h后取细胞上清,后者于6,12,24,48 h后取细胞培养上清液,酶联免疫吸附测定方法(ELISA)测定炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,通过上述2个指标选择Poly(I∶C)与LPS合适的浓度区间与反应的适时间.利用其Poly与LPS配比为10∶1,20∶1,30∶1,40∶1,50∶1来探讨其对NR8383细胞的TNF-α,IL-1β的含量和TLR-2,3,4,6 mRNA表达的影响,以及桂枝汤含药血清的干预作用,通过上述TNF-α,IL-1β,TLR-2,TLR-3,TLR4,TLR-6 6个指标对实验结果进行综合评价,筛选刺激效应和桂枝汤干预效应为明显的Poly(I∶C)-LPS比例.结果:选择刺激时间为6h,Poly(I∶C)在50 mg·L-1以下,LPS在1 mg·L-1时作为合适的刺激浓度.在所用Poly(I∶C)-LPS(10∶1,20∶1,30∶1,40∶1,50∶1)中,与正常组比较,Poly(I∶C)-LPS 50∶1组合刺激效应显著(P＜0.01),与相对应的模型组比较,桂枝汤含药血清对Poly(I∶C)-LPS 10∶1组合干预效果为显著(P＜0.01).结论:Poly(I∶C)-LPS 10∶1刺激NR8383巨噬细胞株NR8383可以作为一种桂枝汤汤证细胞模型,用于桂枝汤及其类方的基础研究.
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肿瘤相关M2型巨噬细胞通过Toll样受体增强卵巢癌细胞MMP-9的表达
目的 探讨M2型巨噬细胞在卵巢癌侵袭转移中的作用及其可能涉及的Toll样受体(TLRs)信号通路机制.方法 用320 nmol/L佛波醇酯(PMA)诱导THP-1细胞,直接免疫荧光技术鉴定M2型巨噬细胞;Transwell小室建立M2细胞与卵巢癌细胞SKOV3体外非接触式共培养模型;24和48 h共培养后,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测SKOV3内TLR1、2、6和基质金属蛋白酶MMP-9水平,蛋白免疫印记(Western blot)检测MyD88、TRAF6 、P-NF-κB和MMP-9表达;TLR1、2和6激动剂分别作用SKOV3 6、12和24h后评价MMP-9的变化.结果 PMA可诱导THP-1成为M2型巨噬细胞;M2型巨噬细胞与SKOV3共培养24和48 h后,MMP-9的表达水平显著高于对照组(P ＜0.05);TLR1、2、和6于共培养24和48 h后在SKOV3有较高表达(P＜0.05);共培养24和48 h后,TLRs信号通路蛋白MyD88、TRAF6和P-NF-κB在SKOV3也同步表达增高(P ＜0.05);TLR1、2和6激动剂Pam3CSK4、HKLM和FSL-1分别刺激SKOV3 6、12和24 h后MMP-9 mRNA水平有显著高表达(P＜0.05).结论 分化诱导后的M2型巨噬细胞,可能通过刺激和活化TLR1、2、6信号途径,引起卵巢癌细胞SKOV3内基质金属蛋白酶MMP-9水平增加,增强肿瘤的侵袭转移能力.
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CpG ODNs抗感染免疫作用研究进展
哺乳动物的免疫系统依赖于天然免疫和获得性免疫防御病原微生物的入侵.天然免疫是机体的第一道防线,它在病原微生物入侵时首先被激活,表达于细菌、病毒、真菌的病原相关分子模式 (pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)被模式识别受体 (pattern recognition receptor,PRR)识别.不同微生物感染所表达的PAMPs可激活天然免疫系统,这些被激活的天然免疫应答在体内可控制感染有机物的增殖和传播,随后宿主对病原体特异性表达产生相对应的获得性免疫应答,为机体提供长期的保护作用.
关键词： CpG ODNs Toll样受体(TLRs) 免疫 感染 -
Toll样受体和血液系统恶性肿瘤的研究进展
Toll样受体(toll like receptors,TLRs)识别各自的配体,是机体抵抗感染性疾病和肿瘤的第一道防线.TLRs主要在固有性免疫系统细胞表面表达,一些非免疫细胞也表达TLRs;不同TLRs定位于不同的细胞.TLRs信号转导通路分为MyD88依赖性和MyD88非依赖性两种.已证实几种TLRs的激动剂具有抗肿瘤作用,肿瘤细胞表面TLRs的活化也可能对肿瘤生长产生影响.近年来TLRs在血液系统恶性肿瘤如多发性骨髓瘤、白血病和淋巴瘤方面的研究已取得一定进展,多发性骨髓瘤、白血病细胞表达多种TLRs,TLRs激动剂能诱导多发性骨髓瘤细胞发生免疫逃逸,近白血病的免疫治疗方案中已包含TRLs激动剂,TRLs激动剂用于淋巴瘤的治疗目前正在进行临床试验.
关键词： Toll样受体(TLRs) 多发性骨髓瘤 淋巴瘤 白血病 -
TOLL样受体与宫颈病变相关研究进展
Toll样受体( TLRs)是模式识别受体家族的一员,在宿主的免疫防卫中起着重要作用。通过调节炎症和组织修复损伤反应,在维持组织内稳态中扮演重要角色。 TLRs与炎症反应、先天性免疫及肿瘤进展密切相关。许多证据表明,TLRs在多种恶性肿瘤细胞及组织中均有表达。本文就Toll样受体的一般特性和研究现况及其在宫颈病变中的研究进展做一综述。
关键词： Toll样受体(TLRs) 信号传导 炎症 宫颈癌 -
结肠癌中TLRs、Wnt/β-catenin的表达与肿瘤的相关性研究
结肠癌是一种严重危害人类健康的恶性肿瘤,在我国青年人的发病率呈现日益增长的趋势.TOLL样受体(TLRs)与Wnt/β-catenin (β-连环蛋白)蛋白在结肠癌患者中会高表达,具有促进结肠癌发生发展的作用.本文就TLRs与Wnt/β-catenin两者信号通路在结肠癌发生发展中的相互调节关系这一新的认识进行阐述.
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疫苗诱导机体免疫应答机制研究
人类接种疫苗已有200多年的历史，疫苗的应用使得历史上流行的多种传染病得以消灭或控制，挽救了无数人的生命。疫苗免疫机制是全世界疫苗研究者亟待解决的问题。对疫苗免疫机制的一些新认识，极大地促进了疫苗研发。对疫苗天然免疫机制的揭示，在疫苗株的筛选、疫苗免疫效果预测等方面展现了巨大的应用价值。某些疫苗在接种后存在的低应答与无应答现象，在对其免疫机制的探索中得到了解释。此外，对疫苗佐剂免疫机制的揭示，加速了新型疫苗佐剂的研发与应用。对疫苗免疫机制研究中的一些新进展进行了综述。
关键词： 疫苗 免疫机制 天然免疫 Toll样受体(TLRs) -
HIV/AIDS患者外周血白细胞TLR-1、-2、-4和-6表达的初步研究
目的 了解HIV/AIDS患者外周血白细胞Toll样受体(TLRs)的表达及其在HIV/AIDS疾病过程中的意义.方法 应用流式细胞仪检测20例HIV/AIDS患者和15例健康人外周血多型核粒细胞、淋巴细胞和单核细胞表面TLR-1、TLR-2、TLR-4和TLR-6的表达水平.结果 TLR-1、TLR-2、TLR-4和TLR-6在外周血白细胞表面均有表达,与健康对照组比较,HIV/AIDS患者多型核粒细胞 TLR-1[(967.44±215.01)% vs (1 159.51±210.17)%,P=0.014]、TLR-2[(1 614.91±346.66) % vs(2 101.87±236.28)%,P<0.001]、TLR-4[(1 735.31±443.28)%vs(2 539.08±842.96)%,P<0.001]和TLR-6[(1 102.96±259.32)% vs (1 357.36±155.49) %,P<0.001]的表达水平显著降低;淋巴细胞TLR-1[(922.09±271.04)% vs(728.19±184.31)%,P＝0.024 ]、TLR-2[(961.81±419.21)% vs( 617.72±202.02)%,P＝0.008]、TLR-6[(646.93±264.37)% vs(458.50±168.64) %,P=0.037]的表达水平显著升高;而淋巴细胞TLR-4的表达水平两组间差异无统计学意义[(2 067.2±526.32)% vs(2072.93±259.32)%,P>0.05].与健康对照组比较,HIV/AIDS患者单核细胞TLR-1[(1 230.67±380.82)% vs(998.86±229.30)%,P=0.014]、TLR-2[(1 091.61±378.23)%vs(549.69±192.99)%,P<0.001]、TLR-4[(2 343.45±724.35)%vs(1 776.67±519.72) %,P<0.001]和TLR-6[(746.58±344.51) % vs(303.19±166.08)%,P=0.004]表达水平均显著升高.结论 HIV/AIDS患者外周血白细胞TLR-1、-2、-4和-6表达水平异常,提示TLRs信号可能在HIV/AIDS发病中起一定作用.
