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缩泉丸对自然衰老大鼠逼尿肌β3-肾上腺素能受体mRNA表达的影响
目的:观察自然衰老大鼠逼尿肌β3-肾上腺素能受体(AR)mRNA表达的改变,探讨缩泉丸“缩尿”的机制.方法:取老年大鼠(20月龄)50只,青年大鼠(3月龄)10只.设置组别为:空白对照组、模型对照组、金匮肾气丸组(1.08 g·kg-1·d-1)、缩泉丸高、中、低剂量组(0.293,0.585,1.170 g·kg-1·d-1),每组10只.空白对照组和模型对照组给予同体积蒸馏水,缩泉丸低、中、高剂量组给予相应浓度的缩泉丸药液,金匮肾气丸组予金匮肾气丸药液,连续4周.选用代谢笼法测量大鼠24h尿量及水负荷5h尿量,采用PCR方法检测自然衰老大鼠逼尿肌β3-AR mRNA表达.结果:缩泉丸中、高剂量组动24 h尿量明显减少,分别为(4.18 ±2.07),(4.16±1.54)mL· (100g)-1；缩泉丸低、中、高剂量组水负荷后5h内尿量明显减少,分别为(1.08±0.43),(0.99±0.54),(0.96±0.49)mL· (100g)-1；自然衰老大鼠逼尿肌β3-AR mRNA表达明显下降(P＜0.05),相对比值为1.61±0.045；给予缩泉丸后,中、高剂量可以显著提高自然衰老大鼠膀胱逼尿肌中β3-AR mRNA的表达(P＜0.05),相对比值为1.63±0.036,1.70±0.061.结论:缩泉丸可以上调自然衰老大鼠遥尿肌β3-ARmRNA的表达,可能是其发挥“缩尿”作用的机制.
关键词： 缩泉丸 自然衰老大鼠 β3-肾上腺素能受体mRNA -
竹节参总皂苷通过调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路抑制衰老大鼠心肌细胞凋亡的作用研究
研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicus,SPJ)对自然衰老大鼠心肌细胞凋亡的调节作用及其作用机制.将SD雄性大鼠随机分为青年对照组、自然衰老组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只.自然衰老组、SPJ低、高剂量组从18月龄开始分别灌胃给予生理盐水、SPJ 10,60 mg·kg-1·d-1,每周灌胃6d,持续6个月至24月龄处理动物.HE染色观察各组大鼠心肌形态;Tunel法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测各组大鼠心肌组织中Bcl-2,Bax,IL-1β,TNF-α,AMPK,p-AMPK,Sirt1,Ac-NF-κB p65蛋白表达.SPJ能有效改善自然衰老大鼠心肌纤维的排列紊乱,减少炎性细胞浸润,抑制心肌细胞凋亡.同时,SPJ能明显抑制自然衰老过程中心脏组织Bax,IL-1β,TNF-α,Ac-NF-κB p65的表达,促进Bcl-2,Bcl-2/Bax,p-AMPK/AMPK,Sirt1蛋白表达.SPJ可有效抑制自然衰老大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路介导的炎症反应有关.
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竹节参总皂苷通过调节TGF-β1/Smad3通路改善衰老大鼠心肌纤维化的作用研究
研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicas,SPJ)对衰老大鼠心肌纤维化的改善作用及作用机制.将18月龄SD雄性大鼠随机分为衰老模型组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只;衰老模型组,SPJ低、高剂量组分别灌胃给予等量的生理盐水,SPJ 10,60 mg·kg-1 ·d-1,每周6次,持续灌胃6个月至24月龄;另取10只6月龄大鼠作为青年对照组.处死动物后,采用HE染色观察各组大鼠心肌形态;Masoon染色观察各组大鼠胶原沉积的变化;RT-PCR法检测各组大鼠心脏组织中胶原相关蛋白COL1α2,COL3α1,肌成纤维细胞标记物α-SMA和基质金属蛋白酶MMP9,MMP2的mRNA表达水平;Western blot法检测各组大鼠心脏组织中TGF-β1,p-Smad3,IL-1β,TNF-α的蛋白表达.SPJ能有效改善衰老大鼠心肌纤维紊乱程度,减少炎性细胞浸润,降低衰老大鼠胶原蛋白沉积;能明显下调衰老心脏组织中COL1α2,COL3α1,α-SMA和MMP9,MMP2的mRNA表达水平;同时,能有效抑制衰老心脏中TGF-β1,p-Smad3,TNF-α,IL-1β蛋白的表达量.SPJ能有效改善衰老大鼠心肌纤维化程度,其作用机制与抑制衰老心脏中TGF-β1,p-Smad3蛋白表达,降低心肌炎症反应有关.
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龟龄集对衰老引起的学习记忆功能障碍的改善作用
目的 探讨龟龄集对衰老引起的学习记忆功能障碍的改善作用.方法 分别应用D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型和自然衰老大鼠模型,考察龟龄集对小鼠跳台实验和大鼠Morris水迷宫等学习记忆功能指标的改善作用,同时考察其对大鼠胸腺、脾脏、睾丸、附睾脏器指数和血液生化指标的影响.结果 龟龄集能显著延长模型小鼠的跳台潜伏期(P＜0.05),明显减少5 min内的错误次数(P＜0.05、0.01).龟龄集能够缩短自然衰老大鼠定位航行逃逸潜伏期(P＜0.01),延长空间探索象限滞留时间(P＜0.05、0.01),增加进入平台次数(P＜0.05);能够增加睾丸、胸腺、脾脏指数(P＜0.05),降低血清中丙氨酸转氨酶(ALT)水平(P＜0.05).结论 龟龄集具有明显改善衰老引起的学习记忆功能减退的作用,同时在提高免疫、改善生殖、保护肝脏方面也具有一定的作用.
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维生素E对老年雌性大鼠雌激素及海马芳香化酶表达的影响
目的 探讨维生素E用于防治绝经后女性中枢神经系统退行性疾病的作用及机制.方法 采用自然衰老雌性大鼠为动物模型,实验组每日注射维生素E 5 mg/kg(小剂量组)、15 mg/kg (中剂量组)、60 mg/kg(大剂量组)(n=8).采用放免法检测血清雌激素含量,用免疫组化法观察维生素E对海马芳香化酶表达的影响,并与成年大鼠(对照组)对比观察.结果 老年对照组较成年对照组雌激素水平下降,中、大剂量组血清雌激素水平回升(P＜0.05),海马芳香化酶表达阳性细胞数目多、表达强,大剂量组呈强阳性.结论 一定剂量维生素E不仅可以提高血中雌激素水平,而且可以通过增强海马芳香化酶的表达使局部雌激素浓度增加而发挥其神经保护作用.
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还脑益聪方对老年认知障碍大鼠学习记忆及脑组织β淀粉样蛋白和Tau蛋白表达的影响
目的：探讨补肾益气、活血解毒中药-还脑益聪方颗粒剂对认知功能障碍的自然衰老大鼠学习记忆功能及脑组织β淀粉样蛋白及Tau蛋白等表达的影响。方法以Morris水迷宫试验检测SD老年大鼠的空间学习记忆能力，将学习记忆减退的50只老年大鼠结合体质量，分层随机方法分成为模型（老年认知障碍）对照组、阳性对照药（盐酸多奈哌齐片，0.49 mg／kg）组、还脑益聪颗粒剂小剂量（3.78 g 生药／kg）组、中剂量（7.56 g生药／kg）组、大剂量（18.90 g生药／kg）组，每组10只，学习记忆能力正常老年大鼠10只为老年正常对照组给予等量水，连续灌胃14 w。给药结束后，行Morris水迷宫试验，测试老年大鼠空间学习记忆能力，免疫组织化学方法观察海马组织CA1区早老蛋白-1（ PS-1）、β淀粉样肽和 Tau蛋白激酶（TTBK1）的表达，积分光密度值（IOD）。结果与正常组比较，模型组老年大鼠穿台次数显著减少（P＜0.05），第四象限游泳路程显著缩短（P＜0.01）。给药14 w后，还脑益聪方各剂量组第四象限游泳路程显著延长（P＜0.01），还脑益聪方大剂量组第四象限游泳时间显著延长（P＜0.05）。模型组老年大鼠海马CA1区TTBK1阳性表达明显增多，PS-1表达水平增强，β淀粉样沉积增多。经治疗后，TTBK1、PS-1和β淀粉样肽的阳性表达明显减少，和模型组比较差异均具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。结论还脑益聪方可抑制脑组织β淀粉样蛋白和Tau蛋白的沉积，保护脑组织海马形态的完整性，从而改善老年认知障碍大鼠空间学习记忆能力。
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何首乌饮对衰老大鼠精子质量的影响
目的:探讨何首乌饮对衰老大鼠精子质量的影响.方法:荧光显微镜观察附睾尾精子质膜和DNA完整性、线粒体功能并计数200个精子中正常精子的百分数.生物化学发光法检测各组大鼠血清睾酮的浓度,计算睾丸指数.结果:自然衰老组大鼠质膜和DNA完整性精子数量明显减少,线粒体功能异常的精子明显增多,血清睾酮含量明显下降,与青年对照组比较差异有统计学意义;而何首乌饮和何首乌丸组正常精子数量比自然衰老组大鼠显著增多,血清睾酮含量明显增加,且用药60 d何首乌饮组显著多于其余各组.结论:何首乌饮能够明显提高衰老大鼠血清睾酮含量,改善精子质量,对精子起到保护作用.
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黄芪水提液对老年大鼠膀胱功能及组织学的影响
[目的]探讨黄芪水提液对于老年大鼠膀胱功能的改善作用以及对膀胱组织学的影响.[方法]取60只雄性SD大鼠,其中3月龄10只及15月龄50只.将3月龄大鼠设为青年组,15月龄大鼠随机分为老年组、维生素E-C混悬液组、黄芪水提液低剂量组、黄芪水提液中剂量组和黄芪水提液高剂量组,每组10只.青年组和老年组以0.9%氯化钠溶液20mL/(kg·d)灌胃;维生素E-C混悬液组以维生素E-C混悬液5mg/(kg·d)灌胃;黄芪水提液低、中、高剂量组分别以黄芪水提液2g/(kg·d)、4g/(kg·d)、8g/(kg·d)灌胃.各组大鼠均每天灌胃1次,连续6周.6周后测定大鼠尿流动力学变化,同时Masson染色观察膀胱逼尿肌纤维化情况.[结果]与青年组相比,老年组大鼠膀胱总容量(total urine volume,TUV)、残余尿量(residual urine volume,RUV)增加,而膀胱漏尿点压力(bladder leak point pressure,BLPP)、腹压漏尿点压力(abdominal leak point pressure,ALPP)均降低(P<0.05).与老年组相比,维生素E-C混悬液组和黄芪水提液各剂量组RUV明显降低,TUV明显增加(P<0.05),而BLPP、ALPP显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05).Masson染色提示,与青年组相比,老年组大鼠膀胱逼尿肌纤维化增加(P<0.05);与老年组相比,黄芪水提液中剂量组和高剂量组的膀胱组织胶原纤维占比减少,差异具有统计学意义(P<0.05).[结论]黄芪水提液能够降低老年大鼠残余尿量,提高膀胱容量,增加漏尿点压力,降低膀胱逼尿肌纤维化程度.
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番茄红素对自然衰老大鼠抗氧化功能的研究
目的:探讨番茄红素对自然衰老大鼠的抗氧化作用.方法:选用15月龄SD雄性大鼠48只按其血清丙二醛(MDA)含量分层随机分成4个组,根据样品的人体推荐量设166.6 mg/kg BW、83.3 mg/kg BW、41.7 mg/kg BW三个剂量实验组和一个阴性对照组.阴性对照组给予等体积的玉米胚芽油,每天灌胃一次,连续灌胃60 d.60 d后处死,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH - Px)活性和过氧化脂质(LPO)含量(以MDA计)以及脂褐质(LIP)含量.结果:实验组的血清过氧化脂质(LPO)含量和组织匀浆液中的脂褐质(LIP)含量低于阴性对照组(P＜0.05),组织匀浆液中SOD及GSH - Px活力高于于阴性对照组(P＞0.05).结论:番茄红素对自然衰老大鼠具有抗氧化的功能.
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缩泉丸对自然衰老大鼠逼尿肌β3-ARmRNA定位表达的影响
目的 观察自然衰老大鼠逼尿肌β3-AR mRNA定位表达的改变,探讨缩泉丸“缩尿”的机制.方法 取老年大鼠(20月龄)50只,青年大鼠(3月龄)10只.设置组别为:空白对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、缩泉丸高、中、低剂量组,每组10只.选用代谢笼法测量大鼠24h尿量,采用原位杂交法检测自然衰老大鼠逼尿肌β3-ARmRNA的表达.结果 缩泉丸中、高剂量组动物24h尿量明显减少(P＜0.05或P＜ 0.01),缩泉丸低、中、高剂量均可提高自然衰老大鼠膀胱逼尿肌中β3-ARmRNA的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论 缩泉丸可以上调自然衰老大鼠逼尿肌β3-ARmRNA的表达,可能是其发挥“缩尿”作用的机制.
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缩泉丸对自然衰老大鼠皮质醇、T3、T4及肾上腺系数的影响
目的 观察缩泉丸对自然衰老大鼠一般状态、肾上腺系数及血清中皮质醇(Cort)、T3、T4含量的影响.方法 采用ELISA方法测量空白对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、缩泉丸高、中、低剂量组血中Cort、T3、T4的含量,并称量肾上腺重量计算其系数.每天观察并记录动物的状态,包括活动、外观形态、毛色光泽、精神状态等变化.结果 缩泉丸可以明显改善自然衰老大鼠的一般情况;缩泉丸中、高剂量组动物血清中Cort含量明显升高(P＜0.05);缩泉丸高剂量组血清中T3含量明显升高(P＜0.05);缩泉丸高剂量组动物血清中T4含量明显升高(P＜0.05);缩泉丸低、中、高剂量可以显著增加自然衰老大鼠肾上腺系数(P＜0.05).结论 缩泉丸可以提高自然衰老大鼠血中Cort、T3、T4含量,也可以增加自然衰老大鼠肾上腺系数,可能是其发挥温肾缩尿的作用机理.
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缩泉丸对自然衰老大鼠尿量及血中醛固酮和抗利尿激素的影响
目的:观察自然衰老大鼠血中醛固酮(ALD)和抗利尿激素(ADH)的改变情况,探讨缩泉丸缩尿的作用机制.方法:取老年大鼠(20月龄)50只,青年大鼠(3月龄)10只.青年大鼠为空白对照组、老年大鼠分为模型对照组、金匮肾气丸组、缩泉丸高、中、低剂量组,每组10只.用代谢笼法测量大鼠24 h尿量及水负荷5h尿量,采用ELISA方法测量血中ALD和ADH的含量.结果:缩泉丸中、高剂量组动24 h尿量明显减少,缩泉丸低、中、高剂量组水负荷后5h内尿量明显减少；缩泉丸中、高剂量可以明显提高血中ALD的含量；低、中、高剂量可以明显提高血中ADH的含量.结论:缩泉丸增加血中的ALD和ADH含量可能是其治疗多尿的作用机制之一.
关键词： 缩泉丸 自然衰老大鼠 醛固酮(ALD) 抗利尿激素(ADH) -
金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞M3R、β3－ARmRNA及其蛋白表达的影响
目的：观察金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R、β3－AR mRNA 和蛋白表达的影响。方法：以多尿自然衰老大鼠为“肾虚多尿”模型，给予金匮肾气丸4周，采用酶消化和组织块相结合的方法原代培养逼尿肌细胞，用实时荧光定量 PCR 法和 Western-blotting 法观察金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R、β3－AR mRNA 及其蛋白表达的影响。结果：与正常对照组比较，自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R mRNA 和蛋白的表达明显增加；与模型对照组比较，金匮肾气丸可以抑制自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R mRNA 和蛋白的表达；与正常对照组比较，自然衰老大鼠逼尿肌细胞β3－AR mRNA 和蛋白表达明显降低；与模型对照组比较，金匮肾气丸可以增加自然衰老大鼠逼尿肌细胞β3－ARmRNA 和蛋白的表达。结论：金匮肾气丸可以减少自然衰老大鼠膀胱逼尿肌细胞 M3 RmRNA 及其蛋白的表达和增加自然衰老大鼠膀胱逼尿肌细胞β3－ARmRNA 及其蛋白的表达，使 M3 R 和β3－AR 之间的平衡状态维持正常的水平。
