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发热大鼠脑组织15-羟基前列腺素脱氢酶活性的时相变化及桂枝汤的影响
目的:研究发热大鼠下丘脑和其他脑组织15-PGDH活性的时相变化及桂枝汤的影响.方法:利用Radio-TLC法测定发热大鼠及桂枝汤治疗组脑组织不同时间的15-PGDH活性.结果:皮下注射酵母后,伴随体温的升高,大鼠下丘脑PGDH活性先降低后逐渐恢复,桂枝汤可阻止该酶早期的活性降低并升高至正常值以上;其他脑组织PGDH活性也有类似变化,但桂枝汤可抑制后期的PGDH活性向正常恢复.结论:下丘脑PGDH活性降低,参与了酵母性发热的早期机制,升高该部位PGDH活性可能是桂枝汤解热机理之一.
关键词： 桂枝汤 体温调节 15-羟基前列腺素脱氢酶 下丘脑 大鼠 -
COX-2、15-PGDH在结直息肉组织中的表达及其作用
目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)和15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)在结直肠息肉组织中的表达及在息肉恶变中的作用.方法:选取2009-02/2009-10肠镜下摘除的结直腺瘤性息肉48例及增生性息肉25例,活检或外科手术的结直肠腺癌15例及正常结肠黏膜15例作为对照.采用RT-PCR和Western blot分别检测各组织中COX-2、15-PGDH mRNA和蛋白的表达.结果:COX-2 mRNA和蛋白的相对表达量在正常黏膜、增生性息肉、腺瘤性息肉和腺癌组中逐渐增加,在腺癌组中表达量多(429.184±45.721 vs 9.859±1.151,83.387±15.957,155.732±28.395:0.772±1.054 vs 0.138±0.025,0.557±0.131,0.509±0.087,均P<0.05),COX-2蛋白在腺瘤组与增生性息肉组之间比较无差异,余各组之间差异比较均有统计学意义.15-PGDE mRNA和蛋白相对表达量在正常黏膜、增生性息肉、腺瘤性息肉及腺癌组中表达逐渐降低(5.234±0.358 vs918.260±82.116,125.380±28.713,12.036±3.509:0.186±0.058 vs 0.762±0.165,0.443±0.085,0.202±0.042,均P<0.05),在腺瘤组和腺癌组中均可见到表达缺失,腺瘤组与腺癌组之间比较无差异,余各组之间比较差异均有统计学意义.结论:COX-2表达的升高和15-PGDH表达的降低或缺失可共同作用于结肠癌发生和发展中,二者可能具有协同致癌的作用.
关键词： 环氧合酶-2 15-羟基前列腺素脱氢酶 肠息肉 结直肠癌 -
大肠癌相关基因PGDH原核表达质粒的构建及表达
目的 构建15-羟基前列腺素脱氢酶(PGDH)原核表达质粒,并在大肠杆菌中诱导表达PGDH蛋白.方法 以人正常大肠黏膜组织总RNA为模板,利用RT-PCR扩增PGDH基因的编码序列,克隆入原核表达载体pBV220,转化E.coli DH5a,经温控诱导表达,并经Ni2+ -NTA亲和层析纯化,目的 蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 重组质粒pBV220-PGDH-Hia6经PCR及酶切鉴定,证明质粒构建正确.经温控诱导后,可表达出相对分子质量约为29 000的PGDH-His6蛋白,表达产物以包涵体形式存在,3 h诱导表达量高,约占菌体总蛋白的30%.Western blot验证了表达蛋白的特异性.纯化后目的 蛋白纯度大于95%.结论 已成功构建PGDH原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了PGDH蛋白.
关键词： 大肠癌 15-羟基前列腺素脱氢酶 克隆 原核表达 -
15-羟基前列腺素脱氢酶与大肠癌
15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是降解前列腺素的关键酶,与环氧合酶-2共同调节体内前列腺素的浓度.近年来研究发现,15-PGDH受到表皮生长因子的调控,并且15-PGDH表达减少或缺失与大肠肿瘤的发生发展密切相关.
关键词： 15-羟基前列腺素脱氢酶 前列腺素E2 表皮生长因子 大肠癌 -
15-羟基前列腺素脱氢酶与胃肠道恶性肿瘤的研究进展
NAD+依赖的15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是前列腺素降解的关键酶,对环氧合酶-2(COX-2)有天然的拮抗作用.近年来发现,15-PGDH表达减少、活性减低与胃肠道及其他系统肿瘤的发生发展有密切关系,15-PGDH可以作为肿瘤预防和治疗的新靶点.
关键词： 15-羟基前列腺素脱氢酶 环氧合酶-2 肿瘤 胃肠道 -
15-PGDH抑制剂对人胃癌细胞生长和COX-2表达的影响
背景:15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是前列腺素生物降解的关键酶,对环氧合酶-2(COX-2)具有生理性拮抗作用,其表达减少和活性降低与多种恶性肿瘤的发生、发展有关.目的:观察15-PGDH选择性抑制剂Cay10397对人胃癌细胞生长、凋亡和COX-2表达的影响,探讨15-PGDH与COX-2在胃癌中的可能关系以及15-PGDH的抗肿瘤机制.方法:以不同浓度Cay10397干预人胃癌细胞株MKN-28,MTT实验和流式细胞分析检测细胞生长和凋亡情况；RT-PCR和蛋白质印迹法检测凋亡相关基因survivin、bax、bcl-xL mRNA表达以及15-PGDH、COX-2mRNA和蛋白表达.结果:Cay10397在浓度大于2.5 μmol/L、作用时间超过48 h的条件下能促进MKN-28细胞增殖(P＜0.05),但其对MKN-28细胞凋亡无明显影响.经5—20 μmol/L Cay10397作用72 h的MKN-28细胞,survivin、bcl-xL mRNA表达显著升高(P＜0.05),bax mRNA以及15-PGDH mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.05),COX-2mRNA和蛋白表达无明显变化.结论:抑制15-PGDH表达可促进入胃癌细胞增殖,但对COX4表达无明显影响.15-PGDH可能通过下调抗凋亡基因survivin、bcl-xL表达、上调促凋亡基因bax表达而诱导人胃癌细胞凋亡.
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COX-2抑制剂对胃癌细胞生长及其15-PGDH表达的影响
背景:15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是前列腺素生物降解的关键酶,环氧合酶-2(COX-2)是前列腺素合成的重要限速酶,目前两者间的关系尚不明确.目的:观察非选择性和选择性COX-2抑制剂对胃癌细胞生长、凋亡以及15-PGDH、COX-2表达的影响,探讨胃癌中15-PGDH与COX-2的关系.方法:以不同浓度吲哚美辛和塞来昔布干预人胃癌细胞株SGC-7901,MTT法检测细胞生长抑制情况,RT-PCR检测凋亡相关基因survivin、bax、bcl-xL表达,RT-PCR和蛋白质印迹法检测15-PGDH、COX-2表达.结果:吲哚美辛和塞来昔布均能抑制SGC-7901细胞生长,抑制作用呈时间/浓度依赖性.药物干预后,SGC-7901细胞的15-PGDH mRNA和蛋白表达显著升高,COX-2 mRNA和蛋白表达显著降低;同时抗凋亡基因survivin、bcl-xL mRNA表达降低,促凋亡基因bax mRNA表达升高.结论:非选择性和选择性COX-2抑制剂均可诱导胃癌细胞15-PGDH表达,抑制COX-2表达.提示胃癌中15-PGDH低表达与COX-2过表达相关.COX-2抑制剂可能通过促进15-PGDH表达、下调抗凋亡基因表达,上调促凋亡基因表达而抑制胃癌细胞生长.
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白细胞介素1β刺激脑微血管内皮细胞内15-羟基前列腺素脱氢酶的经时变化
目的:探讨白细胞介素1β(IL-1β)刺激体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)活性的经时变化.方法:建立rCMEC培养方法,进行Ⅷ因子相关抗原鉴定.待细胞长至融合状态后,以30 ng/ml浓度的IL-1β分别刺激0.5、1、2、4、8、12、24 h,以放射免疫法测定各刺激时间点15-PGDH活性.结果:90%以上的培养细胞呈阳性,确定为rCMEC.加入IL-1β刺激后2 h,细胞内15-PGDH活性与未刺激组比较有显著性差异(P＜0.05);12h时达到大值;24h时有所降低,但与未刺激组比较仍具显著性差异(P＜0.01).结论:rCMEC经IL-1β刺激后,细胞内15-PGDH活性经历一个逐渐升高,到达峰值后缓慢下降的过程,IL-1β刺激12 h内皮细胞15-PGDH活性达峰值.
关键词： 白细胞介素1β 脑微血管内皮细胞 15-羟基前列腺素脱氢酶 -
15-羟基前列腺素脱氢酶抗肿瘤作用的分子机制研究
15-羟基前列腺素脱氧酶是前列腺素生物降解的重要限速酶,多项研究显示其与体内多种肿瘤发生发展关系非常密切,其表达量减低促进肿瘤的发生发展、浸润、转移及肿瘤血管形成.文章就15-羟基前列腺素脱氧酶抗肿瘤的分子机制作一综述.
关键词： 15-羟基前列腺素脱氢酶 肿瘤 分子机制 环氧合酶-2 -
EGCG抑制结肠癌HT-29细胞生长及血管生成的作用机制
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人结肠癌细胞HT-29生长的影响及抑制血管生成的相关机制.方法 EGCG(0、25、50、100 μg/mL)作用于结肠癌细胞株HT-29 24 h后,采用MTT法检测EGCG对HT-29细胞生长的作用,应用RT-PCR及Western blot分别检测EGCG干预前后HT-29结肠癌细胞中TGF-β31、15-PGDH、COX-2、VEGFmRNA及蛋白的表达情况.结果 MTT显示EGCG抑制HT-29细胞的生长,并随着浓度的增加及时间的延长抑制作用逐渐增强(P＜0.05)；TGF-β1、15-PGDH mRNA及蛋白表达量随着EGCG浓度的增加而增加,COX-2、VEGF mRNA及蛋白表达量随着EGCG浓度的增加而下降(P＜0.05).结论 EGCG呈浓度及时间依赖性抑制HT-29细胞的增殖,可能通过诱导HT-29细胞中TGF-β1、15-PGDH,抑制COX-2、VEGF mRNA及蛋白表达预防结肠癌的血管生成.
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15-PGDH在食管癌中的表达
目的 研究NAD+依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)在食管癌组织及癌旁6 cm处非肿瘤对照组织中的表达,探讨15-PGDH在食管癌中的表达情况及其与食管癌的关系.方法 本实验采用免疫组化SP法检测食管癌组织和癌旁6 cm处非肿瘤对照组织中15-PGDH的表达情况.结果 免疫组化结果提示:40例食管癌组织中有5例(12.5％) 15-PGDH呈强阳性染色,8例(20.0％) 15-PGDH呈弱阳性染色,27例(67.5％) 15-PGDH表达缺失;40例癌旁6 cm处对照组织中,13例(32.5％) 15-PGDH呈强阳性染色,25例(62.5％) 15-PGDH呈弱阳性染色,2例(5.0％) 15-PGDH染色阴性(P＜0.05).15-PGDH在食管癌组织(32.5％)的阳性表达率显著低于癌旁6 cm处非肿瘤对照组织(95.0％)的阳性表达率,15-PGDH的表达差异有统计学意义(P＜0.05).15-PGDH蛋白表达与食管癌患者的性别、年龄、分化程度无关(P＞0.05).15-PGDH蛋白表达与食管癌患者有无淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 15-PGDH在食管癌组织中表达缺失或减少,15-PGDH可能是食管癌发生发展中的重要抑制因子.
关键词： 15-羟基前列腺素脱氢酶 食管癌 淋巴结转移 -
胃癌组织中15-PGDH与COX-2的表达特征及其临床意义
目的 探讨15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)和环氧合酶-2(COX-2)在胃癌中的表达及两者的相关性,并探讨与临床病理特征的关系,评价15-PGDH及COX-2在胃癌发生、发展中的作用及其意义.方法 随机收集80例胃癌手术患者的癌组织及相应癌旁正常组织,应用免疫组织化学方法检测15-PGDH及COX-2的表达特征并进行评分,进一步分析两者的相关性及与胃癌临床病理参数的关系.结果 胃癌组织中15-PGDH的表达水平显著降低甚至缺失而COX-2的表达水平显著升高,结合胃癌的临床病理学特征统计分析表明,15-PGDH的低表达与COX-2的高表达均与胃癌的分化程度、TNM分期以及有无淋巴结转移密切相关,且15-PGDH与COX-2的表达呈显著负相关.结论 胃癌中15-PGDH和COX-2的共同作用可能是胃癌发生、发展及浸润转移的重要机制之一,同时检测15-PGDH和COX-2的表达水平将有助于判断胃癌的恶性程度及其预后.
关键词： 胃癌 15-羟基前列腺素脱氢酶 环氧合酶-2 免疫组织化学 临床病理参数 -
丙谷胺、阿司匹林对人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用
目的 探讨丙谷胺和阿司匹林对人结肠癌细胞株HT-29增殖的协同抑制作用及可能的机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法检测胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和非甾体类抗炎药阿司匹林分别及联合应用对HT-29细胞增殖的影响;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测丙谷胺和阿司匹林分别干预以及联合用药48h后COX-2和15-PGDH mRNA和蛋白质的表达情况.结果 丙谷胺和阿司匹林分别呈时间和剂量依赖性地抑制HT-29细胞的增殖,且二者具有协同作用;丙谷胺单一用药时,COX-2mRNA和蛋白质表达下调,15-PGDH mRNA和蛋白质表达上调(P＜0.05);阿司匹林单一用药时,COX-2、15-PGDH mRNA和蛋白质的表达均无明显变化;两药联合应用时,COX-2 mRNA和蛋白质的表达显著下调,15-PGDH mRNA和蛋白质的表达显著上调,与对照组以及各单一用药组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 丙谷胺、阿司匹林联合应用协同抑制HT-29细胞增殖,此作用可能通过下调COX-2表达,上调15-PG-DH表达这一机制来实现.
关键词： 丙谷胺 阿司匹林 环氧合酶-2 15-羟基前列腺素脱氢酶 结肠癌细胞株 -
15-PGDH在食管癌中的表达特征及临床意义
目的：探讨15-羟基前列腺素脱氢酶（15-PGDH）在食管癌中的表达及其与临床病理特征的关系，并初步评价其意义。方法：随机收集66例食管癌手术病人的癌组织及相应癌旁正常组织，应用免疫组织化学检测15-PGDH表达，进一步分析其表达与食管癌临床病理的相关性。结果：与癌旁正常组织相比，食管癌中15-PGDH的表达水平显著降低甚至缺失。进一步统计分析显示，15-PGDH 表达下调与食管癌的TNM分期、分化程度和是否有淋巴结转移密切相关。结论：食管癌中15-PGDH的表达减少或缺失参与了食管癌的发生发展过程，其可以作为反映食管癌恶性生物学行为的一个重要指标。
关键词： 食管癌 15-羟基前列腺素脱氢酶 临床病理特征
