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黄芪六一汤对2型糖尿病模型大鼠肾小管上皮葡萄糖重吸收的作用
目的:观察黄芪六一汤对糖尿病大鼠血糖、糖化血红蛋白、血脂及肾小管上皮钠-葡萄糖共转运蛋白2(SGLT2)的作用,探讨该方治疗糖尿病的疗效及其可能的作用机制.方法:将77只SPF级SD大鼠按体重随机分为6组,分别为正常组,模型组,二甲双胍组(0.15 g·kg-1),黄芪六一汤低、中、高剂量组(3.15,6.30,12.60 g·kg-1);糖尿病模型复制方法采用高脂高糖喂养28 d后,40 mg·kg-1体重剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射造模.STZ注射后第7天开始分别给予相应治疗药物灌胃,正常组、模型组同法灌胃相应体积的水.连续灌胃给药治疗6周,每周1次,禁食6h后尾静脉取血测血糖,末次给药后禁食12 h后,给大鼠进行尾静脉取血测血糖,然后麻醉大鼠,腹腔静脉取血,处死动物后留取取肾、胰腺做病理切片苏木素-伊红(HE)染色检查.观察血糖、糖化血红蛋白、血脂四项、体重、进食量、肾组织SGLT2蛋白表达等指标.结果:各造模组的血糖均高于正常组(P＜0.01),血糖＞ 13.0 mmol· L-1.经过6周自行恢复后,模型组血糖仍显著高于正常组(P＜0.01);二甲双胍组、黄芪六一汤中、高剂量组血糖均明显低于模型组(P＜0.05).模型组的糖化血红蛋白升高,高于正常组(P＜0.01),与模型组比较,二甲双胍、黄芪六一汤高剂量组糖化血红蛋白明显低于模型组(P＜0.05).造模组大鼠胰腺病理切片HE染色可见胰岛结构完整,说明本实验中并未造成胰岛的完全破坏.肾脏病理切片可见,各组大鼠肾脏肾小球、集合小管、近端及远端小管的结构完整,未见明显病理损害.各给药组大鼠肾组织SGLT2蛋白表达均有所降低(P ＜0.05,P＜0.01).结论:高糖高脂饮食合并腹腔注射STZ致糖尿病大鼠模型肾组织SGLT2蛋白表达增高,黄芪六一汤能降低实验性糖尿病模型大鼠血糖、糖化血红蛋白,有降低模型大鼠肾组织中SGLT2蛋白表达的作用.部分抑制肾小管上皮葡萄糖重吸收可能是黄芪六一汤治疗糖尿病的作用之一.
关键词： 糖尿病 黄芪六一汤 血糖 糖化血红蛋白 钠-葡萄糖共转运蛋白2 -
黄芪六一汤对2型糖尿病治疗效果的转录组学研究
该实验采用Illumina测序平台对大鼠胰腺进行转录组测序,对靶点进行表达量统计,分析空白组、模型组、黄芪六一汤组三者之间的表达差异关系,探究黄芪六一汤对2型糖尿病的治疗效果,并探讨其作用机制.结果表明,通过eggNOG对基因进行分类分析,其中有24.25%的基因属未知功能类,为大分类单元,其余依次为能量转换类、氨基酸转运和代谢类、核苷酸转运和代谢类、碳水化合物转运和代谢类、辅酶转运和代谢类、脂质转运和代谢类等;根据KEGG富集分析,黄芪六一汤可能在环境信息处理、细胞过程、生物系统、人类疾病这4类代谢通路上对2型糖尿病起到治疗作用.研究表明,黄芪六一汤能显著改善2型糖尿病大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白.
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基于网络药理学对黄芪六一汤治疗2型糖尿病机制预测研究
目的 通过网络药理学方法,探究黄芪六一汤对2型糖尿病的作用机制.方法 本实验以黄芪六一汤治疗糖尿病为指导,运用网络药理学方法对黄芪六一汤治疗糖尿病的主要有效分子进行预测.预测过程中收集化学结构数据、基因组学数据、蛋白组学数据、药理学数据.结果 根据网络药理学预测发现,即黄芪六一汤对2型糖尿病治疗的主要有效分子共20个;黄芪六一汤可能直接或间接作用于线粒体以及细胞器膜,并通过与各种离子和物质相结合的方式影响跨膜和转运作用.可能参与了2型糖尿病的氧化磷酸化、脂类代谢、甾体激素合成代谢途径,也参与2型糖尿病引发的心肌收缩和由于神经系统变形或退化引起的帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿舞蹈症等并发症.结论 黄芪六一汤通过细胞间的物质转运,参与能量代谢而达到治疗2型糖尿病的目的.
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黄芪六一汤对糖尿病大鼠血糖、胰岛素、糖化血红蛋白、细胞形态影响随机平行对照研究
[目的]观察黄芪六一汤对糖尿病大鼠血糖及胰腺影响.[方法]采取使用随机平行对照方法,将90只SPF级SD大鼠,按随机数字表方法随机分为9组(10只/组);80只大鼠按李大伟方法复制STZ诱导糖尿病大鼠模型,选取血糖居中合格大鼠60只,按随机数字表法随机分6组,模型组、二甲双胍组、消渴丸组、黄芪六一汤(高、中、低剂量)组;造模后第7d分别灌胃干预,黄芪六一汤(生药12.60g/kg,6.30g/kg,3.15g/kg),二甲双胍0.17g/kg,消渴丸0.63g/kg;正常组、模型组同法灌胃等体积生理盐水.连续灌胃干预给药4周后,末次给药前各组大鼠禁食16h,末次给药1h后,常规眼眶静脉丛取血;采血后大鼠脱颈椎处死,取胰腺作病理检查.观测血糖、胰岛素、糖化血红蛋白、细胞形态.[结果]血糖各造模组均高于空白组(P＜0.01),血糖值≥13mmol·L-1;黄芪六一汤(高、中、低剂量)组血糖均明显低于模型组(P＜0.01).糖化血红蛋白模型组高于空白组(P＜0.01),胰岛素含量模型组低于模型组(P＜0.01);糖化血红蛋白黄芪六一汤(高、中、低剂量)组明显低于模型组(P＜0.01),胰岛素高于模型组(P＜0.05).病理检查空白组胰岛多为圆形或椭圆形细胞团,分散于胰腺腺泡之间,胰岛边界清晰,无包膜,细胞团大小不一,胰岛细胞为多边形,排列整齐,分布均匀,胞浆淡染呈浅粉红色,核多为圆形深染;模型组胰岛细胞可见不同程度肿胀和空泡样变性,边界不清,细胞核大小不等,细胞数量明显减少,排列紊乱,部分细胞发生核固缩和坏死;二甲双胍、消渴丸组胰岛细胞形态结构明显改善,细胞数目增多,排列较整齐,胞浆分布均匀,部分细胞发生肿胀和空泡变性;黄芪六一汤(高、中、低量)组胰岛细胞形态结构明显改善,胰岛细胞肿胀和空泡样变性的程度明显减轻,细胞数目增多,排列较整齐.[结论]黄芪六一汤能显著降低糖尿病大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白,升高胰岛素(P＜0.05或P＜0.01),改善胰岛损害.
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黄芪六一汤对2型糖尿病大鼠降糖作用的机制研究
目的:探讨黄芪六一汤对糖尿病大鼠的降糖作用及其机制.方法:采用高脂高糖饲养合并腹腔注射链脲佐菌素(30 mg/kg)建立糖尿病大鼠模型.造模成功的大鼠随机分为模型组、达格列净阳性对照组及黄芪六一汤低、中、高剂量组.实验期间每周称体质量,尾静脉采血测量空腹血糖、糖化血红蛋白及胰岛素的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定2型葡萄糖转运蛋白(GLUT2)和钠-葡萄糖转运蛋白(SGLT2)的表达;荧光定量PCR分别检测GLUT2、SGLT2 mRNA表达.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低,血糖、糖化血红蛋白水平及SGLT2、GLUT2蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,黄芪六一汤各组糖化血红蛋白、SGLT2蛋白表达均显著降低,GLUT2蛋白表达显著升高(P＜0.05或P＜0.01).黄芪六一汤对模型大鼠体质量及GLUT2、SGLT2 mR-NA表达无明显影响.结论:黄芪六一汤对高脂高糖饲养合并腹腔注射STZ致糖尿病大鼠具有降糖作用,治疗效果与达格列净相似,其作用机制与抑制SGLT2蛋白功能有关.
