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基于均匀设计的祛湿化瘀方防治脂肪肝不同作用环节的主效应中药剖析
目的:以对实验性脂肪肝有显著防治作用的祛湿化瘀方为切入点,探索中药复方多途径、多环节药理作用的相应物质基础的研究方法.方法:采用CCl4复合高脂低蛋白饮食诱导的大鼠脂肪肝模型,运用"均匀设计法",根据复方中的5味中药(茵陈、栀子、虎杖、田基黄、姜黄),选用U11(1110)表进行组方设计所得10种组合进行干预,分别以肝甘油三酯(triglyceride,TG)、血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、丙二醛(malonyl-dialdehyde,MDA)为不同病理环节的考察指标,根据回归方程获得针对上述不同指标所提示的佳效应中药或某种配伍组合,并根据其提示的效应中药或组合,重新分组实验进行验证.结果回归方程显示,降低肝脏TG的佳效应组合是茵陈0.07g、田基黄0.05g、栀子0.17g、姜黄0.03g,降低ALT的佳效应组合是茵陈0.33g、虎杖0.25g、田基黄0.25g、姜黄0.17g.而针对MDA未获得回归方程.验证实验证实了上述"筛选"结果的可靠性.结论:①均匀设计是可靠的剖析某一病理环节主效应中药或配伍组合的分析方法;②在整体实验水平,针对某一指标环节的佳效应中药仍以中药配伍组合方式出现,也说明了中药配伍复方针对复杂病理变化的科学性.
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基于均匀设计的益气化痰方抗抑郁不同作用途径效应中药配伍研究
目的:基于均匀设计法剖析益气化痰方防治抑郁症模型大鼠不同作用途径的效应中药配伍,探索中药复方多途径综合药理作用机制的研究方法和意义.方法:以益气化痰方中4味中药(半夏、陈皮、人参、茯苓)为研究对象,采用孤养加慢性轻度应激相结合诱导大鼠抑郁症模型,按均匀设计法“4因子6水平表”分组灌胃给药.观测大鼠下丘脑去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)水平,血清铜、锌以及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(COR)含量,按均匀设计进行回归分析.结果:与对照组比较,模型组大鼠下丘脑NE、DA、5-HT水平明显降低(P＜0.01,P＜0.05),血浆ACTH、COR浓度明显升高(P＜0.05,P＜0.01),血清锌含量降低、铜含量升高(P＜0.01).应用均匀设计法结合药效学实验分析得出效应中药均是陈皮、人参、茯苓,而三者剂量配比有所不同,且与半夏相关性较小.结论:①益气化痰方中陈皮、人参、茯苓是作用于各途径的主要效应中药配伍,具有调节脑神经递质、微量元素水平、抑制内分泌亢进等多途径药理作用,半夏在这3条途径中均未发挥明显效应;②均匀设计法对于明确中药复方综合药理作用的物质基础(效应中药配伍)具有重要方法学意义.
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祛斑中药组方干预黑素合成的主效应中药剖析
目的 解析祛斑中药组方干预黑素合成的主效应中药.方法 采用3×2析因设计,以山楂、当归、山萸肉为考察因素,各设2水平,分别测定酪氨酸酶活性抑制率、多巴色素自动氧化生成黑素量、多巴自动氧化抑制率,并运用SPSS16.0软件辅助解析祛斑组方对干预黑素合成不同途径的主效应中药.结果 组方中山萸肉对酪氨酸酶活性具有显著抑制作用(P<0.05),山萸肉、当归对多巴色素自动氧化生成的黑素量具有极显著抑制作用(P<0.01),山萸肉、当归对多巴自动氧化具有显著抑制作用(P<0.05),山萸肉在组方中贡献大.结论 山萸肉为组方中抑制酪氨酸酶活性、多巴色素自动氧化生成黑素量、多巴自动氧化的主效应中药.
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均匀设计法优选肝豆汤的效应中药配伍——以TX小鼠神经细胞内Bcl-2、Bax蛋白表达水平及血清和脑组织中铜含量为指标
目的 基于均匀设计法筛选中药复方肝豆汤保护TX小鼠神经细胞的效应中药.方法 基于"6因子11水平表"均匀设计法,以神经细胞内Bcl-2、Bax蛋白表达水平及血清和脑组织中铜含量为指标,以TX小鼠为Wilson病动物模型,采用多元逐步回归分析法优选肝豆汤中6种药物(大黄、姜黄、黄连、泽泻、金钱草、三七)的效应中药配伍.采用Western blot法以及等离子质谱法分别测定细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和血清、脑组织铜含量.结果 与对照组比较,TX小鼠脑组织中Bcl-2表达水平显著降低(P＜0.05),Bax蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),脑组织铜含量显著升高(P＜0.05),血清铜含量显著降低(P＜0.05).多元逐步回归分析结果显示,姜黄和大黄分别进入血清铜含量及脑组织铜含量的回归方程,黄连和泽泻均进入脑组织Bcl-2和Bax表达水平的回归方程,姜黄和金钱草分别进入神经细胞Bcl-2/Bax的回归方程,三七均未进入上述指标的回归方程.结论 肝豆汤中大黄、姜黄、黄连、泽泻、金钱草配伍组合,可通过多靶点保护TX小鼠神经细胞;三七在保护TX小鼠神经细胞过程中未发挥明显效应.
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析因设计解析祛斑中药复方体外干预黑色素生成的主效应中药
目的 解析祛斑中药复方干预黑色素合成的主效应中药.方法 采用3×2析因设计表,以山楂、当归、山茱萸为考察因素,各设2水平,分别测定自由基清除活性抑制率、SOD样活性抑制率、抗紫外线催化作用抑制率、促黑色素分解作用抑制率,并运用SPSS16.0软件辅助解析该复方对干预黑色素合成不同途径的主效应中药.结果 各药对自由基清除活性抑制率依次为FC因素＞FA因素＞FB因素*C因素＞FB因素,山茱萸对其具有显著抑制作用(P＜0.05);各药对抗紫外线催化作用的抑制率依次为FA因素＞＞FB因素＞FC因素,山楂对其具有显著抑制作用(P＜0.05).组方对SOD样活性、促黑色素分解作用均呈现出一定的抑制作用.结论 山茱萸、山楂分别为组方中抑制自由基清除活性、抗紫外线催化作用的主效应中药.
