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体外温热刺激对脐静脉血管内皮细胞能量物质的影响
目的:研究适宜温度刺激对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)、ATP/ADP及能荷(EC)含量变化的影响,探讨灸法中温热作用的能量转换机制.方法:原代HUVECs分为正常组(37℃)和适宜温热刺激组(40℃),适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,每天2次,正常组不做任何处理,各组于第1、2、3天刺激结束4-6h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天用高效液相色谱法(HLPC)检测ATP、ADP、AMP含量、ATP/ADP比值及EC值.结果:两组HUVECS生长活力逐渐增强,与本组第1天和第2天比较差异均有统计学意义(P＜0.01);每天适宜温度刺激组细胞生长活力较正常组同期强,差异均有统计学意义(P＜0.01).第3天,适宜温热刺激与正常组比较HUVECs内ATP、ADP、AMP含量显著升高(P＜0.05,P＜0.01),ATP/ADP比值、EC值均显著升高(P＜0.05).结论:体外适宜温热刺激后能够提高HUVECs的生长活力,提高HUVECs代谢的能量物质,从而为灸法的温热作用提供了理论依据.
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环氧合酶-2在胰腺癌中的表达及其抑制剂对细胞生长活力和凋亡的影响
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灸法热刺激对脐静脉血管内皮细胞Caspase-3表达影响的研究
目的 研究灸法热刺激对人脐静脉血管内皮细胞中(HUVECs) Caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨灸法中温热刺激的抗凋亡及促凋亡的效应机制.方法 原代HUVECs分为正常组(37℃)、适宜温热刺激组(40℃)和凋亡组(43℃),正常组不做任何处理,适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,凋亡组置于43℃培养箱中刺激30min,每天2次,各组于第1天、2天、3天刺激结束4h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天用QPCR和Western blot技术检测Caspase-3基因和蛋白表达.结果 三组HUVECS生长活力逐渐增强,与第1天和第2天比差异均有统计学意义(P＜0.001);每天适宜温热刺激组细胞生长活力较正常组增强,差异均有统计学意义(P＜0.001或P＜0.05);每天凋亡组细胞生长活力较正常组减弱,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.001).第3天,与正常组比,适宜温热刺激组HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均降低(P＜0.001),凋亡组HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P＜0.05),凋亡组与适宜温热刺激组比,HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P ＜0.001).结论 灸法热刺激可调控HUVECs内的Caspase-3表达来调控细胞凋亡的过程,为全面认识灸法“活血化瘀”的生物学机制提供新的实验依据.
