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  • 清毒饮、养正片影响白血病K562细胞增殖周期、细胞凋亡的实验研究

    作者:梁毅;陈志雄;丘和明

    目的:观察清毒饮、养正片诱导人白血病细胞株K562细胞凋亡及对细胞增殖周期的作用;探索其时效关系,为临床提供选择佳用药时机的实验基础.方法:制备含清毒饮、养正片药物血清,建立相应的培养体系,加入含药小鼠血清,培养K562细胞株;分别于培养12、24、36、48、72h收集细胞,固定、染色、上流式细胞仪进行细胞周期、细胞凋亡的检测.结果:人白血病K562细胞株存在有自然凋亡,正常小鼠血清无诱导该细胞凋亡的作用;清毒饮、阿糖胞苷具有诱导细胞凋亡的作用,且随着培养时间的延长凋亡率愈加明显.清毒饮对K562细胞周期的影响,还表现出明显的时间依赖性;随着培养时间的延长,当细胞出现明显凋亡时,细胞株S期显著下降,G0/G1期升高,提示清毒饮和清毒加养正合剂都可引起K562细胞株的G0/G1期阻滞,对凋亡的敏感性增强.结论:清毒饮能抑制K562细胞增殖、促进细胞分化、诱导细胞凋亡,提示该中药复方具有从分子水平抗肿瘤细胞增殖的效应,这也是中药复方协同化疗药物治疗白血病在增效减毒方面的关键机制;清毒饮对K562细胞发生细胞毒作用,是通过抑制其细胞周期S期、将其阻滞于G1期,并通过促进K562细胞凋亡实现的,其作用强度与时间呈密切正相关.

  • 清毒饮养正片对急性髓细胞白血病患者生存质量的影响研究

    作者:后盾;丘和明

    目的:临床运用清毒饮、养正片配合化疗治疗急性髓细胞白血病(AML),通过生存质量量表调查,探讨清毒饮、养正片对AML患者生存质量的影响.方法:运用分层随机对照试验方法,把32例AML患者分为清毒饮、养正片配合化疗组(治疗组)和单纯化疗组(对照组);采用世界卫生组织生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)对AML患者治疗前、化疗后10天、化疗4疗程后分别进行生存质量调查.结果:提示治疗组生存质量优于对照组(P<0.05).结论:中医药参与白血病的治疗能有效提高患者的生存质量.

  • 清毒饮和养正片改善L7212白血病小鼠化疗后骨髓抑制的实验研究

    作者:杨道纳;王忠勇;陈尧;蔡宇

    目的:探讨清成毒饮和养正片改善L7212小鼠骨髓抑制的作用机理.方法:取40只615小鼠随机平均分为四组,除10只空白对照外,均接种成L7212白血病模型,化疗药物为250毫克/千克CTX小鼠腹腔注射,灌服中药清毒饮和养正片各0.5毫升,治疗7d后,测定小鼠外周血像中WBC、HB、PLT;取骨髓测定红系祖细胞(BFU-E)和粒单细胞集落形成细胞(CFU-GM)和粒单细胞集落形成细胞(CFU-GM)数,以及小鼠骨髓中有核细胞计数.结果:治疗后小鼠外周血像(WBC、PLT、HB)均有不同程度上升;治疗组BFU-E、CFU-GM和骨髓有核细胞计数均高于化疗组,与模型组比较差异显著(P<0.05).结论:清毒饮和养正片有改善L7212白血病小鼠化疗后骨髓抑制的作用.

  • 中药联合树突状细胞激发T细胞杀伤力的实验观察

    作者:胡莉文;刘安平;蓝海;何靖

    目的 观察研究体外培养诱导树突状细胞(DC)激发正常人及患者自体T细胞后T细胞对K562细胞的杀伤作用.方法 用清毒饮、养正片灌胃动物(新西兰兔)制备中药含药血清备用.在签署知情同意书后,取急性髓系白血病缓解期患者骨髓,经抗凝后,应用羊红细胞玫瑰花结程序从骨髓中分离出T细胞的骨髓单个核细胞(TD-BMNC),以中药含药血清与细胞因子联合培养,诱导含药血清对TD-BMNC来源的DC分化成熟,用此法诱导分化的DC与纯化的正常人或缓解期患者外周血T细胞共同培养,观察对T细胞增殖能力的影响.用激发的T细胞与K562细胞共同培育,以MTT法测定该T细胞对K562细胞的杀伤活性.结果 各中药组与对照组相比,自体及异体T细胞清毒饮合养正片低剂量组均高于单纯细胞因子组,有统计学意义.结论 清毒饮合养正片联合细胞因子诱导的DC可以激发T细胞产生更强的杀伤力.

  • 清毒饮对K562细胞bcr/abl mRNA基因表达的影响

    作者:梁毅;葛志红;丘和明

    目的 观察不同药物浓度清毒饮对人白血病细胞株K562细胞bcr/abl基因表达水平的影响,为临床应用清毒饮提供依据.方法 制备不同药物浓度清毒饮(5、10、20 mg/mL)含药血清并处理K562细胞48 h,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR技术分析各组培养细胞bcr/abl mRNA表达的水平.结果 清毒饮中、高2种浓度清毒饮含药血清与对照组比较,对人白血病K562细胞株bcr/abl融和基因表达水平具有显著影响,差异有统计学意义(P<0.05,0.01),且呈浓度依赖性.结论 清毒饮具有抑制人白血病K562细胞株bcr/abl mRNA表达的作用,提示清毒饮具有从分子水平抗肿瘤细胞增殖的效应.

  • 清毒饮和养正片诱导L7212小鼠白血病细胞凋亡及其对Bcl-2、P53基因表达的影响

    作者:杨洪涌;潘习龙;丘和明;陈志雄;胡莉文;李振波

    目的:探讨清毒饮和养正片抗白血病的作用机理.方法:采用L7212白血病小鼠模型,用原位末端标记法(TUNEL)观察清毒饮、养正片和化疗对其白血病细胞凋亡的影响.结果:清毒饮、养正片、化疗各组都可见较多白血病细胞凋亡、其中清毒饮组优于养正片组,合用化疗则更明显,凋亡指数均大于模型对照组(P<0.01),证明清毒饮、养正片能诱导L7212白血病细胞凋亡,且以清毒饮较明显,并可提高化疗的促凋亡作用.用免疫组化法检测模型小鼠骨髓有核细胞中Bcl-2、p53基因的表达,其Bcl-2表达明显增高,予清毒饮、养正片处理后,Bcl-2有所下降,以清毒饮组较养正片组明显,合用化疗后下降更明显(P<0 05);p53表达在L7212白血病细胞稍减低,经清毒饮、养正片、化疗处理后,表达阳性率及其强度均有所升高,但统计学处理差异无显著性意义(P>0.05)结论:清毒饮、养正片确能下调Bcl-2表达,而对P53作用不够明显.

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