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白花蛇舌草的毒理学安全性研究
白花蛇舌草系茜草科耳草属植物,广泛分布于我国长江以南地区,又名蛇舌草、矮脚白花蛇利草等,含有丰富的黄酮、多酚、有机锗、熊果酸、齐墩果酸、多糖等化合物.具有清热解毒,利尿消肿,活血止痛等多种功效,可用于治疗多种癌症及炎症[1],现代药理研究亦表明其具有抗菌消炎[1]、增强免疫功能[2]、抗肿瘤[3-4]]、抗氧化[5-6]等作用.近些年,多种饮料中添加白花蛇舌草作为其主要卖点,但目前对其毒性研究极少.白花蛇舌草中很多成分在人体一定含量范围内可以促进健康,但若蓄积量过大,不排除可能会对人体产生慢性危害.为保护消费者身体健康,现对白花蛇舌草进行了急性毒性、遗传毒性及亚慢性毒性的系统研究,旨在为其安全性评价提供依据.
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白花蛇舌草临床新用
白花蛇舌草,甘、淡、凉,有清热解毒、止痛,通淋之功,近年来常用于治疗肿瘤及各种感染性疾病,但经临床应用,其在以下几方面有独特作用,特举例介绍如下.
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白花蛇舌草胶囊治疗痤疮100例临床分析
痤疮是一种皮肤常见病,好发于青春期男女,为毛囊皮脂腺的慢性炎症.2007年1月～2011年5月开始应用自制的白花蛇舌草胶囊治疗痤疮,疗效较好,现总结如下.资料与方法本组患者300例,均为青春期男女,其中男162例,女138例,年龄12～23岁,平均18.3岁.近期均未接受其他药物治疗,病程2周～1年,平均1.2个月.未完成治疗或合并应用其他药物不作分析.
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香菇辅助治疗慢性乙肝1例
患者,女,33岁.1982年时发现肝功能不正常,经治痊愈.1992年再次发病,化验结果HBsAg、HBeAg、Anti-HBc均为阳性,ALT 55 IU/L,TTT 12IU/L.临床症状表现为全身乏力,食欲不振,胁肋胀痛,尿黄,面黄.服用中药汤剂:虎杖20 g,木香6 g,栀子10 g,郁金10 g,茵陈20 g,连翘20 g,蜂房10 g,紫草10 g,丹参15 g,黄芪15 g,甘草3 g,板蓝根15 g,龙胆草12 g,生薏米10 g,白花蛇舌草20 g.随症加减治疗3个月后,ALT与TTT均正常,HBsA g(+),Ant-iHBe(+),Anti-HBc(+),症状消失,随即停药.1996年又出现与1992年相同的情况,继续服用中药汤剂治疗3个月后,化验结果为小三阳,ALT、TTT均正常,症状消失,随即停止用药.
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HPLC法测定清毒片中齐墩果酸和熊果酸含量
目的：建立清毒片中齐墩果酸和熊果酸含量测定的HPLC方法。方法采用HPLC法测定清毒片中齐墩果酸、熊果酸含量，色谱柱为kromasil-C18(250 mm×4.6 mm，5μm)，流动相为甲醇-0.5%磷酸水溶液(88∶12)，检测波长210 nm，流速1.0 ml/min。结果齐墩果酸和熊果酸的进样量分别在0.06～0.54μg(R＝0.9993)和0.30～2.70μg(R＝0.9997)范围内与峰面积呈良好线性关系；齐墩果酸和熊果酸的加样回收率分别为100.48%和102.21%。结论本方法操作简便、准确、重复性好，可为清毒片的质量控制提供参考。
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曾庆明治疗脾胃病经验
曾庆明教授为广东省名中医、深圳市名中医，深圳市师带徒指导老师，善用经方治疗脾胃系统、妇科、男科等慢性疑难病等。曾师诊疗脾胃系疾病，多以经方为基础方进行配伍加减，更顾护全身气、血、津液，用存阴、升降、温通等方法。1存阴法
大承气汤源自《伤寒论》，为治疗阳明腑实证而立，为“釜底抽薪，急下存阴”的代表方剂。曾师认为，在临床诊疗疾病时，尤其脾胃系统疾病，可将此拓展到不同经方，不同药物。诸如活血散瘀、清热解毒类药物等，亦可理解为保存津液，因瘀毒消散防止热化，进一步留存了阴液，亦是“存阴”。临床脾胃病诊疗中如慢性萎缩性胃炎，辨证属血瘀热郁型，治疗选用经方血府逐瘀汤加减，热象明显者加白花蛇舌草、蒲公英、连翘清热存阴；瘀滞明显者加刺猬皮、三棱、莪术等散瘀存阴；胃脘胀甚者，加徐长卿、枳壳行气存阴等。 -
吸波面积法对组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中多成分体外释放度的研究
目的:通过吸波面积法对组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中多成分体外释放度进行测定,探讨中药复杂体系多成分体外释放度测定的可行性.方法:配制槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇混合对照品溶液,经紫外-可见分光光度法在200-600 nm下进行全波长扫描,通过Origin软件拟合并计算吸光度-波长曲线下面积(简称吸波面积,Area under the Absorbance-wavelength Curve,AUAWC),采用吸波面积法对组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中混合总药物的释放量进行测定.同时,采用高效液相色谱法分别测定槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇各单一成分的体外释放特性,并对两种方法的结果进行比较和分析.结果:吸波面积法和高效液相色谱法测得组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中混合总药物、槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇在酸性介质0.1 mol·L-盐酸中2h胶囊壳无破损,稳定性良好,不释放;在0.2 mol· L-1磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中120 min释药完全,累积释放百分率分别为99.47％、90.87％、95.65％、98.49％,混合总药物不同时间的累积释放量与槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇三者药物累积释放量之和接近.结论:吸波面积法用于组分中药白花蛇舌草肠溶的体外释放度方法科学、可行、方便,可用于中药复杂体系多成分体外释放度的测试,其与高效液相色谱法的联合使用为西药复方、组分中药以及复杂体系的中药复方制剂的体内外相关性研究提供了科学思路和可行途径.
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白花蛇舌草研究进展
本文综述了近年来白花蛇舌草的资源与生产、化学成分、药理作用、临床应用等方面的研究进展,为白花蛇舌草深入研究提供参考.
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白花蛇舌草中环烯醚萜苷类化合物的稳定性研究
利用HPLC法详细考察了不同介质、不同保存容器、温度及光对白花蛇舌草中环烯醚萜苷类化合物的影响,并且用LC/MS对该类化合物变化前后进行了分析.结果发现:白花蛇舌草中环烯醚萜类化合物在酸性介质中部分物质不稳定;在纯水介质中置于塑料容器中易发生变化,且溶液颜色变成蓝色;60℃放置时间不宜超过6 h;但其对光并不敏感.根据质谱信息并结合文献报道,推测了几个变化较大的化合物的结构,峰6和8分别为鸡矢藤苷甲酯和去乙酰基车叶草苷酸甲酯,峰1,2,10和12为去乙酰基车叶草苷酸、鸡矢藤苷、车叶草苷酸和车叶草苷,峰5,7为鸡矢藤苷甲酯的同分异构体,并推测环烯醚萜苷类物质在酸性介质中C-4位取代基为COOH的化合物较C-4位取代基为COOCH3的化合物稳定,在变化过程中COOCH3会水解为COOH.
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白花蛇舌草乙醇提取物对人结肠癌细胞HT-29Pim-1和Pim-2mRNA表达的影响
目的 探讨白花蛇舌草乙醇提取物对人结肠癌细胞HT-29 Pim-1和Pim-2 mRNA表达的影响.方法 采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定空白组和不同浓度(1、3、5、10 mg·mL-1)白花蛇舌草乙醇提取物组,干预24 h.倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定不同浓度药物对HT-29细胞增殖的影响,并用5 mg·mL-1浓度干预1、3、6、12、24、48 h观察对HT-29细胞增殖的影响;RT-PCR检测药物作用后HT-29细胞Pim-1和Pim-2 mRNA的表达.结果 白花蛇舌草乙醇提取物干预后,HT-29的细胞密度明显减少,细胞变小,终悬浮脱落而死亡;HT-29细胞增殖受到抑制,并呈现出量效和时效关系;白花蛇舌草乙醇提取物能明显下调HT-29细胞Pim-1和Pim-2 mRNA表达,并随药物浓度的增加而减少,呈一定的量效作用.结论 白花蛇舌草乙醇提取物能显著抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖以及下调Pim-1和Pim-2的mRNA表达.
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白花蛇舌草对大肠癌耐药细胞microRNAs表达的影响
目的:探讨白花蛇舌草(Hedyotic Diffusa Wilid,HDW)对大肠癌5-FU耐药细胞miRNAs表达的调控作用,进一步揭示其逆转大肠癌多药耐药(Multidrug Resistance,MDR)作用机制.方法:通过体外培养HCT-8/5-FU细胞,经HDW处理,采用MTT检测细胞活力、倒置显微镜观察细胞形态、microRNA (miRNA)表达谱芯片分析、QPCR验证差异miRNA表达、GO及Pathway分析预测差异miRNA调控的信号通路.结果:HDW可显著抑制大肠癌HCT-8/5-FU耐药细胞的活力,降低细胞密度;HDW调控57个miRNA差异表达,其中上调23个,下调34个;QPCR验证HDW上调miR-92b-Sp、miR-1247-3p、miR-4800-5p的表达,下调miR-4454、miR-4443、miR-483-5p的表达;信号通路预测显示HDW可调控PI3K/Akt、TGF-β/Smad、MAPK、P53、Wnt、JAK-STAT等多条与细胞耐药、迁移、侵袭、增殖、凋亡有关的信号通路.结论:HDW对大肠癌5-FU耐药细胞HCT-8/5-FU具有显著的抑制作用,通过调控miRNAs表达是其逆转大肠癌耐药的作用机制之一.
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水蒸气蒸馏及不同萃取纤维对白花蛇舌草挥发性成分分析
目的:分析比较不同固相萃取纤维头(PA,PDMS,PDMS-DVB)对白花蛇舌草挥发性成分的吸附性,并与传统的水蒸气蒸馏联用GS-MS(SD-GS-MS)方法进行比较.方法:采用PA,PDMS-DVB,PDMS 3种不同类型的固相微萃取纤维头以及水蒸气蒸馏法提取,联用GS-MS进行挥发性成分测定.结果:其中PA检测出50个成分,PDMS-DVB检测出51个,PDMS检测出18个.水蒸气蒸馏法检测出41个成分,与SPME法对比结果显示,相似度高的为PA,共有成分为21个,其次为PDMS-DVB 15个,PDMS 6个;有16个成分未在SPME法中检出.结论:HS-SPME-GS-MS方法可简便、高效地检测白花蛇舌草挥发性成分,但不能完全替代传统的水蒸气蒸馏联用GS-MS方法.
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肝复康片质量标准研究
目的:建立肝复康片质量标准.方法:用TLC鉴别白花蛇舌草、太子参;用HPLC测定五味子中五味子醇甲含量,色谱柱为Agilent HC-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(55:45),流速1.0 mL·min-1,测定波长250 nm.结果:定性鉴别分离度好、重复性好、专属性强;五味子醇甲线性范围为0.112～5.644μg ( r = 0.999 9 ),平均回收率97.03%,RSD 1.38%,精密度RSD 1.65%(n=6),重复性RSD 1.43%(n=6).结论:方法可靠、准确、专属性强,可用于该制剂的质量控制.
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清肾颗粒中白花蛇舌草的质量控制标准
目的:建立清肾颗粒中白花蛇舌草的质量控制标准.方法:采用薄层色谱法对制剂中的白花蛇舌草进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定制剂中白花蛇舌草的去乙酰车叶草酸甲酯的含量.色谱条件:Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5 μm),流动相乙腈-水(3.5∶96.5),流速1.0 mL·min-1,检测波长236 nm.结果:薄层色谱清晰,阴性无干扰,重复性良好,去乙酰车叶草酸甲酯在0.042～1.35 4μg呈良好的线性关系(r=1.000 0)平均回收率99.96％ (RSD 1.66％).结论:该方法可操作性强,重复性好,可用于清肾颗粒中白花蛇舌草的质量控制.
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液质联用技术快速鉴定白花蛇舌草中黄酮类化学成分
目的:采用快速液相色谱仪与四极杆飞行时间串联质谱仪(UFLC-Q-TOF/MS)对白花蛇舌草中黄酮类化学成分进行快速分析和鉴别.方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18Column(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.1％甲酸-乙腈和0.1％甲酸-水的流动相进行快速的梯度洗脱,流速0.3 mL· min-1,柱温40℃,进样量1μL.质谱定性采用电喷雾离子源(ESI)的飞行时间质谱,负离子模式下采集数据,质量扫描范围m/z 100 ～1 500.结果:共鉴别出白花蛇舌草中的13个黄酮类成分、1个三萜类成分和1个蒽醌类成分.结论:UFLC-Q-TOF/MS方法能快速鉴别白花蛇舌草中的黄酮类化学成分,为白花蛇舌草的药效物质研究奠定基础.
关键词： 白花蛇舌草 黄酮 快速液相色谱仪与四极杆飞行时间串联质谱仪 成分 -
GC-MS结合保留指数分析白花蛇舌草挥发性成分
目的:分析白花蛇舌草中的挥发性成分.方法:采用水蒸气蒸馏法提取白花蛇舌草全草的挥发性成分,GC-MS结合保留指数进行分析鉴定.结果:采用GC-MS分析,检出55个组分；MS结合保留指数定性,鉴定出其中29个成分.结论:该方法分析白花蛇舌草中挥发性成分,更准确、简单、快速并节省药材.
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白花蛇舌草核苷类化学成分分离
目的:研究白花蛇舌草的化学成分.方法:药材采用水提取,提取液用大孔吸附树脂,硅胶,小孔树脂凝胶(MCI),羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex)柱色谱及半制备HPLC进行分离,并通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.结果:从白花蛇舌草中分离得6个化合物,分别鉴定为胸腺嘧啶-2 '-脱氧核苷(2’-deoxythymidine,1),2’-O-甲基肌苷(2’-O-methyl-inosine,2),肌苷(inosine,3),尿苷(uridine,4),鸟苷(guanosine,5),β-腺苷(β-adenosine,6).结论:6个化合物均为首次从该属植物中分离得到.
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HPLC同时测定白花蛇舌草中2种蒽醌化合物的含量
目的:建立白花蛇舌草药材中2种蒽醌化合物2-羟基-3-甲氧基-7-甲基蒽醌(蒽醌Ⅰ)和2-羟基-1-甲氧基蒽醌(蒽醌Ⅱ)含量测定的方法.方法:采用Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),以甲醇-水(60∶ 40)等度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长272 nm,柱温25℃.结果:蒽醌Ⅰ和蒽醌Ⅱ分别在4.0 ～160mg· L-1(r=0.9996)和4.0～160 mg·L-1(r =0.999 5)线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为99.27％,99.08％,供试品溶液在24 h内稳定.结论:该方法精密度良好,准确度高,适合于白花蛇舌草药材中2-羟基-3-甲氧基-7-甲基蒽醌和2-羟基-1-甲氧基蒽醌含量的测定.
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白花蛇舌草中熊果酸的透皮吸收试验
目的:考察白花蛇舌草中熊果酸的透皮吸收特性.方法:采用HPLC测定熊果酸含量.选择SD大鼠背部皮肤,通过Franz垂直扩散池考察熊果酸的透皮性能,并考察氮酮(azone)、桉叶油、冰片、白花蛇舌草水提取物和醇提取物对熊果酸透皮吸收的影响.结果:熊果酸很难透过皮肤,需加入透皮吸收促进剂才能有效地透过皮肤.不同质量分数促进剂对熊果酸促透作用顺序为5％醇提物＞5％醇提物+2％冰片＞5％水提物＞ 2％ azone+ 10％丙二醇(PG)＞2％桉叶油＞4％ azone ＞3％桉叶油＞ 2％ azone＞ 1％ azone.结论:Azone和桉叶油是白花蛇舌草中熊果酸的良好促透剂,复方水提取物和醇提物具有协同促透的作用.
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白花蛇舌草的化学成分研究进展
目的:对白花蛇舌草的化学成分及其主要成分检测方法等方面的研究进行文献整理.方法:主要对1990～2011年重庆维普数据库以题名或关键词为“白花蛇舌草”和/或“化学成分”,Pubmed数据库系统以题名或关键词为“Hedyotic diffusa”或“chemical components”进行检索,整理了近年来对白花蛇舌草主要化学成分的研究进展.结果:白花蛇舌草主要含有蒽醌类、萜类、黄酮类、甾醇类、烷烃类、多糖类、有机酸类、生物碱、强心甙等成分,还含有一些微量元素、氨基酸及挥发性成分；汇总了近年来对其主要成分如二羟基苯甲酸甲酯、槲皮素、山奈素、香豆酸、多糖、熊果酸和齐墩果酸等的检测方法.结论:目前对白花蛇舌草复杂的化学成分研究相对较为完善,对其主要成分的检测方法仍有待于进一步规范.
