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肾移植受者巨细胞病毒感染与抗心磷脂抗体的关系
目的探讨肾移植受者巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)感染与抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody, ACA)产生的关系. 方法肾移植受者146例术后采用定性聚合酶链反应法(PCR)检测CMV-DNA,同时用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清抗心磷脂抗体免疫球蛋白G(ACA-IgG),并与正常对照组(n=32)进行比较. 结果肾移植受者146例ACA阳性率为17.1%,与正常对照(6.3%)无明显差异;而CMV感染的肾移植受者ACA阳性率为31.2%,显著高于未感染CMV的受者(7.1%)及正常对照组(6.3%, P<0.01). 结论肾移植受者ACA的产生与CMV感染密切相关,可能是CMV导致移植肾慢性血管病变的原因之一.
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幼儿园儿童巨细胞病毒分离毒株的限制性酶切图谱分析
①目的调查幼儿园学龄前儿童间人巨细胞病毒(HCMV)传播的分子流行病学状况. ②方法应用限制性核酸内切酶,对112名幼儿园儿童尿标本分离到的部分HCMV毒株进行酶切图谱分析.③结果自2所幼儿园同组儿童分离到的大多数HCMV毒株具有相同的限制性酶切图谱.④结论水平传播是幼儿园婴幼儿间HCMV传播的主要方式,婴幼儿彼此间的密切接触是HCMV传播的重要条件.
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HCMV即刻早期基因在大肠杆菌中的表达
①目的在大肠杆菌中表达人类巨细胞病毒(HCMV)AD169株即刻早期基因UL37×1,并检测原核表达蛋白的免疫原性.②方法将原核表达质粒pIE1转入大肠杆菌DH5α菌中,并通过温控的方式诱导目的基因的表达,用SDS-PAGE电泳及Western-Blot实验分析原核表达蛋白的表达情况及其免疫原性.③结果获得了HCMV即刻早期基因的原核表达产物.④结论 HCMV即刻早期基因UL37×1的原核表达产物具有一定的免疫原性,可与HCMV感染者阳性血清起反应.
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人巨细胞病毒pp150基因的原核表达及抗原性分析
①目的构建人巨细胞病毒(HCMV)pp150的原核高效表达系统,制备用于急性、活动性HCMV感染血清学诊断的基因工程抗原.②方法PCR扩增HCMV pp150抗原决定簇(840～1 048 aa)编码基因片段,分别插入原核表达载体pMAL-p2、pET-28a,转化宿主菌E.coli.诱导表达,经麦芽糖亲和层析树脂纯化,以Western-Blot及间接ELISA法鉴定其抗原性.③结果重组表达质粒pMAL-p2-pp150可在E.co1i.DH5a中有效表达,表达产物经SDS-PAGE电泳后,凝胶成像系统分析显示相对分子质量约为6.4万,约占菌体蛋白的10%.而重组质粒pET-28a-pp150未见明显表达带.Western-Blot检测,阳性识别率为80%(12/15).用此蛋白包被ELISA板,检测正常孕妇血清,阳性率为6.5%(17/263).与本室制备的全病毒抗原ELISA的诊断符合率为96%.④结论此重组蛋白具有良好的抗原性,进一步完善后可用于HCMV急性和活动性感染的诊断.
