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4'-去甲基表鬼臼毒素的酶法糖基化
4'-去甲基表鬼臼毒素(4'-demethylepipodophyllotoxin,DMEP)的糖苷衍生物具有多种药理活性,但其化学合成面临位置及立体选择性和基团的保护与脱保护等诸多挑战.该研究从库拉索芦荟Aloe barbadensis中克隆得到1个新颖糖基转移酶(glycosyltransferase, GT)基因AbGT5,并成功进行了外源表达及蛋白纯化.重组AbGT5能够催化4'-去甲基表鬼臼毒素进行糖基化,获得的产物经MS,1H-NMR,13C-NMR,HSQC以及HMBC等波谱技术鉴定为4'-去甲基表鬼臼毒素-4'-O-β-D-葡萄糖苷.酶学性质研究发现AbGT5的适反应温度为20 ℃,适pH 9.0,且不依赖金属离子.在适反应条件下,4'-去甲基表鬼臼毒素的转化率可达80%.该研究表明利用新颖糖基转移酶AbGT5可实现4'-去甲基表鬼臼毒素的高效酶法糖基化,为其糖基化提供新方法.
关键词： 糖基转移酶 酶法糖基化 工具酶 4'-去甲基表鬼臼毒素 库拉索芦荟 -
4'-去甲基表鬼臼毒素芳香酰胺类衍生物的设计、合成及其抗肿瘤活性
目的 为寻找高效低毒且作用谱广的鬼臼脂素类抗肿瘤药物,合成了20个4'-去甲基表鬼臼毒素芳香酰胺类化合物.方法 以4'-去甲基表鬼臼毒素为原料,首先与氯乙腈进行取代反应,再与硫脲反应,后与不同的取代芳香羧酸成酰胺制得目标化合物.采用MTT法测定目标化合物体外对人肺腺癌细胞A549、人肝肿瘤细胞株HepG2、人口腔癌KB细胞、L1210白血病细胞的抑制活性.结果与结论 合成了20个未见文献报道的新化合物,目标化合物的结构均经1 H-NMR和MS谱确证,活性测试结果表明,大部分目标化合物均具有一定的肿瘤细胞增殖抑制活性.
关键词： 4'-去甲基表鬼臼毒素 酰胺 肿瘤 抑制活性 合成 -
4'-去甲基表鬼臼毒素酯类衍生物的合成及初步抗肿瘤活性
为寻找高效低毒且作用谱广的鬼臼毒素类抗肿瘤药物,以4'-去甲基表鬼臼毒素为起始原料,用不同结构的芳香羧酸对其进行修饰,设计合成了17个4'-去甲基表鬼臼毒素酯类新化合物,通过1H NMR和ESI-MS确证其结构,并采用MTT法评价了目标化合物对人肝癌(HepG2)、人肺癌(A549)、人口腔癌(KB)及小鼠白血病细胞(L1210)的抑制活性.结果表明,大多数化合物对肿瘤细胞均表现出较好的抑制作用.
关键词： 4'-去甲基表鬼臼毒素 肿瘤 抑制活性 合成 -
纳米二氧化硅搭载4’-去甲基表鬼臼毒素对人宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用研究
目的 研究鬼臼毒素、4'-去甲基表鬼臼毒素及其与不同比例纳米二氧化硅(SiO2)的联合用药对人宫颈癌HeLa细胞的体外增殖抑制作用,并探讨其机制.方法 采用正硅酸乙酯水解法制备25 nm SiO2样品,将其进行表面改性后搭载4’-去甲基表鬼臼毒素;MTT法检测SiO2、鬼臼毒素、4'-去甲基表鬼臼毒素和联合用药(12.500、1.250、0.125μg/mL纳米SiO2分别搭载6.25 μg/mL 4’-去甲基表鬼臼毒素)对HeLa细胞体外增殖的抑制作用;Hoechst 33342染色法检测25nmSiO2的细胞相容性、鬼臼毒素和4'-去甲基表鬼臼毒素对细胞凋亡影响;倒置显微镜观察联合用药对细胞形态的影响;Western blotting技术检测4'-去甲基表鬼臼毒素和联合用药对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达的影响.结果 4'-去甲基表鬼臼毒素对HeLa细胞的增殖抑制作用优于鬼臼毒素,联合用药对HeLa细胞的抑制作用优于单一4’-去甲基表鬼臼毒素,且0.125 μg/mL纳米SiO2搭载6.25 μg/mL 4'-去甲基表鬼臼毒素时,抑制作用明显;鬼臼毒素、4’-去甲基表鬼臼毒素和联合用药均可诱导细胞凋亡;4'-去甲基表鬼臼毒素和联合用药可以上调Bax/Bcl-2比值及Caspase-3、p53、p38的表达水平.结论 SiO2联合用药对HeLa 细胞的增殖抑制作用优于单一4’-去甲基表鬼臼毒素,其作用机制可能为,通过影响Bcl-2、Bax、Caspase-3、p53、p38等凋亡相关蛋白表达诱导细胞凋亡.
关键词： 鬼臼毒素 4'-去甲基表鬼臼毒素 纳米二氧化硅 Hela细胞 细胞凋亡
