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鹿尾腺总蛋白双向电泳体系的建立
目的:建立一套适用于鹿尾腺总蛋白分析的双向电泳体系,为实现通过蛋白质组学研究手段探究鹿尾腺的组织发育及其发挥药理作用的机制奠定基础.方法:使用三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、饱和酚抽提法和Trizol法3种方法提取鹿尾腺中总蛋白,采用固相pH梯度胶条进行双向电泳,并对蛋白上样量和等电聚焦参数进行选择和优化,凝胶考马斯亮蓝染色后用PDQuest 8.0软件进行图谱分析.结果:Trizol法得到的总蛋白质纯度高,能满足双向电泳分析对样品的要求,蛋白质样品在7 cm pH 3 ～ 10 IPG胶条上,上样量为300 μg,按优化的程序Ⅱ进行双向电泳,可以得到较满意的双向电泳图谱,此时清晰可见蛋白点数多达209个.结论:通过优化双向电泳条件,建立了适合鹿尾腺蛋白质组学研究的双向电泳体系.同时该体系可以为其他类似的动物组织样品制备和双向电泳提供借鉴.
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不同提取方法全蝎镇痛、镇静、抗惊厥作用的考察
目的 比较冷提、热提、醇提等不同提取方法对全蝎镇痛、镇静、抗惊厥作用的影响.方法采用热板法、醋酸扭体法、自主活动分析法、戊四唑所致小鼠惊厥的方法,观察不同提取方法全蝎镇痛、镇静、抗惊厥作用.结果全蝎冷浸提取液的镇痛效果强于热提液和醇提液;全蝎冷提、热提、醇提液在镇静、抗惊厥实验中,差异无统计学意义(P＞0.05).结论从镇痛效应的角度,全蝎以冷提法为好;从镇静和抗惊厥效应的角度,全蝎采用冷提、热提、醇提三种方法皆可.
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鸭跖草不同提取方法提取物的体外抗病毒实验研究
目的:为建立鸭跖草抗病毒谱-效相关评价系统,对鸭跖草不同提取方法提取物体外抗病毒活性进行筛选,后选择鸭跖草75％乙醇冷浸提取物抗呼吸道合包病毒(RSV)活性和鸭跖草蒸馏水回流提取物抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)活性进行下一步研究.方法:采用体外抗病毒实验CPE法结合MTT染色法,以半数治疗浓度(EC50)和半数细胞毒性浓度(TC50)并以治疗指数TI值作为评价指标,观察鸭跖草不同提取物对肠道病毒71型(EV71)、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)和呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用.结果:中药材鸭跖草对于肠道病毒71型(EV71)病毒未见明显效果;75％乙醇冷浸的鸭跖草浸取液对呼吸道合胞病毒(RSV)病毒有较好的抗病毒效果,并且测得鸭跖草75％乙醇冷浸浸取液抗呼吸道合胞病毒(RSV)的治疗指数为21.1,阳性对照药治疗指数为29.8;采用蒸馏水提取的鸭跖草提取液对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)病毒有较好的抗病毒效果,且测得鸭跖草蒸馏水回流提取物抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的治疗指数为19.6,阳性对照药治疗指数为36.7.结论:鸭跖草在抗呼吸道合胞病毒(RSV)和单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)有一定的效果,为进一步进行鸭跖草抗病毒研究和建立鸭跖草谱-效模型提供了科学依据和数据支持.
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薄层扫描法测定不同提取方法枇杷叶中齐墩果酸含量
目的:研究不同提取方法对枇杷叶中齐墩果酸含量测定的影响.方法:以枇杷叶为原料,用回流提取、索式提取、超声提取、微波提取4种方法提取其中的齐墩果酸,薄层扫描法测定齐墩果酸的含量.结果:微波提取法测得齐墩果酸的含量为26.33 mg·g-1,RSD=1.80％,回流提取法测得齐墩果酸含量为24.49 mg·g-1,RSD=3.39％,索式提取法测得齐墩果酸含量为24.28 mg·g-1,RSD=3.46％,超声提取法测得齐墩果酸的含量为23.68 mg·g-1,RSD=1.50％.结论:微波提取法与其他3种提取方法相比较具有提取效率高、操作简单等特点,可作为枇杷叶中齐墩果酸提取的优选方法.
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不同提取方法测定野马追药材中绿原酸含量比较研究
目的:研究野马追药材中绿原酸含量测定的前提取方法及绿原酸含量的质控标准.方法:采用高效液相色谱法,比较了不同的提取方法、提取溶媒、提取时间和溶媒用量测定野马追药材中绿原酸含量.结果:采用超声提取方法提取野马追药材中绿原酸,且绿原酸高效液相法测定进样量在0.0908～1.362μg(r=0.9999)间呈良好的线性关系,平均回收率为100.12%,RSD为1.31%.结论:绿原酸超声提取方法和高效液相测定含量方法简便,可用于该药材的质量控制.
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HPLC法测定不同提取方法的刺五加中异秦皮定含量
目的 HPLC法测定刺五加中异秦皮定的含量,并对不同提取方法进行比较研究.方法以刺五加为分析对象,选择3种提取工艺和4种提取溶剂,异秦皮定为测定指标,采用Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈- 0.1%(φ)磷酸(V∶V=20∶80)为流动相,检测波长343 nm,柱温为40℃.结果异秦皮定在0.02～0.8 μg之间呈线性关系,方法的平均回收率为99.7%(n=6),RSD为0.97%;不同提取方法的刺五加药材中异秦皮定的含量有较大的差异.结论此方法可准确测定不同提取方法时刺五加中异秦皮定含量.
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栀子有效成分不同提取方法比较研究
目的 优选栀子有效成分的佳提取方法.方法 以栀子苷、总环烯醚萜、干浸膏收率为指标,对水提法、水提-纤维素酶酶解法、水提-果胶酶酶解法、水提-纤维素-果胶酶酶解法、半仿生提取法、半仿生-纤维素酶酶解法、半仿生-果胶酶酶解法、半仿生-纤维素-果胶酶酶解法进行比较.结果 半仿生-纤维素酶酶解法所得综合评价指标优.结论 半仿生-纤维素酶酶解法为提取栀子有效成分的佳提取方法.
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太子参挥发油化学成分研究
目的 比较不同挥发油提取方法对太子参挥发油化学成分的影响.方法提取挥发油采用方法I是乙醚提取,提取物经水蒸气蒸馏提取法;方法II是直接采用水蒸气蒸馏提取法.运用GC-MS-DS联用分析技术和气相色谱保留指数法,比较分析方法I和方法II太子参挥发油化学成分,用GC面积归一法分别计算了各成分的相对含量.结果方法I和方法II太子参的挥发油得率分别为0.28%和0.13%.从方法I提取的挥发油中鉴定出9种化合物,有7种化合物出峰的保留时间在30 min后,其中以邻苯二甲酸二丁酯相对含量高(87.19%);方法II鉴定8种化合物,均在30 min前出峰,其中以2-糠醇相对含量高(79.76%).显然,方法I和方法II提取的挥发油化学成分含量和组成有较大的差别;方法I提取的挥发油中未能检出2-糠醇,2-糠醇是太子参在水蒸气蒸馏过程中生成的,重复实验进一步验证该结果.结论不同提取方法对太子参挥发油化学成分含量和组成有明显的影响;2-糠醇不是太子参的天然成分.
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不同提取方法对苦参生物总碱的影响
目的:考察不同方法对苦参中苦参生物总碱提取效率的影响.方法:采用酸性染料比色法,对苦参酸水回流、乙醇回流、酸水超声提取三种方法的提取液中的生物总碱进行含量测定.结果:水回流、乙醇回流、酸水超声提取液中苦参总碱含量分别为0.573%、0.652%、0.634%.结论:以苦参总碱作为评价指标,乙醇回流结果较好,酸水超声提取次之,酸水回流低.
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不同提取方法对五种药材中元素含量影响的探讨
建立火焰原子吸收分光光度法测定紫花地丁、老鹳草、金钱草、半边莲、蒲公英药材及其水提取液和醇提取液中6种元素的含量.通过测定这5种药材及其两种提取液中6种元素的含量,对不同提取方法对药材中元素含量的影响加以探讨,对药材的制剂工艺及临床应用有一定的指导意义.
