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催化转化文献资料
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3种嗜热β-葡萄糖苷酶催化黄芩苷生产黄芩素的研究
该文分析了来自嗜热菌Thermotoga thermarum DSM 5069的Ttebgl3和Thermotoga petrophila RKU-1的Tpebgl1,Tpeb-gl3等3种β-葡萄糖苷酶基因及其序列,比较了3种β-葡萄糖苷酶催化转化黄芩苷的适温度、pH以及DMSO、金属离子对催化转化黄芩苷的影响,并比较了3种β-葡萄糖苷酶转化黄芩苷的动力学常数.结果表明,Tpebgl1,Tpebgl3,Ttebgl3转化黄芩苷的适pH分别为4. 5,5. 0,5. 5,适温度为85,80,80 ℃.Tpebgl3酶和Ttebgl3酶催化转化黄芩苷时对DMSO的耐受性较好.金属离子对3种β-葡萄糖苷酶催化转化黄芩苷的激活作用不明显,GH3家族β-葡萄糖苷酶受到的抑制作用明显强于GH1家族.3种β-葡萄糖苷酶催化黄芩苷的动力学常数存在较大差异,Tpebgl1,Tpebgl3,Ttebgl3酶的Km分别为0. 029 2,0. 268 6, 0. 391 8 mmol·L-1,Vmax分别为4. 85,121. 04,308. 90 U·mg-1.Tpebg1,Tpebgl3,Ttebgl3酶分别在其适pH,温度下转化0. 02 g黄芩苷,3 h后转化率分别达到68％,97. 3％,97. 31％,且GH3家族的酶用量少、催化效率高.研究结果为高效酶的获得及规模化生物制备黄芩素提供了技术支撑.
