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LTQ-FT-MS技术结合生物信息学筛选与HBV Polymerase存在潜在相互作用的宿主蛋白
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是慢性肝病的一个主要致病因素,易导致肝炎、肝硬化,并终导致肝癌.乙型肝炎病毒聚合酶(HBV Polymerase,Pol)在HBV复制过程中起着关键作用,并有可能参与肝癌的发生.Pol的这些生理功能很有可能是通过与蛋白质之间的相互作用来行使的.本文通过免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation)结合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术,筛选、鉴定与Pol存在潜在相互作用的蛋白.用构建好的pcDNA3.1-POL-flag重组质粒转染HeLa细胞,LC-MS/MS技术筛选能与融合flag标签的Pol发生免疫共沉淀的蛋白,共得到45个蛋白,其中11个蛋白被报道能与Pol发生相互作用.Ingenuity Pathway Analysis(IPA(R))软件进一步分析45个蛋白与Pol的功能及相应的细胞网络,发现这些蛋白涉及三个大分子网络,其中4个蛋白可能参与协助Pol在细胞网络中行使其生理功能,对这4个蛋白的进一步研究将有助于为攻克乙型肝炎病提供线索.
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HBV对RIG-Ⅰ信号通路的影响机制
感染乙型肝炎病毒(HBV)后对天然免疫应答的影响在HBV感染慢性化中可能起着起着重要的作用,而维甲酸诱导基因Ⅰ (RIG-Ⅰ)介导的信号通路是天然免疫重要的通路之一.X蛋白(HBx)以及HBV聚合酶在HBV对RIG- Ⅰ信号通路的影响机制中发挥着重要的作用.本文对近年来有关HBV对RIG- Ⅰ信号通路的作用及可能机制的研究进展做一综述.