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EBV LMP1通过诱导c-myc表达活化端粒酶hTERT
利用原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet-on-LMP1 HNE2等良好的细胞体系,采用报道基因法和Western blot法等,分别检测Epstein-Barr病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)诱导的c-myc反式激活活性和蛋白表达水平,从LMP1诱导细胞内c-myc表达的角度,探讨LMP1诱导端粒酶表达的分子机制.结果表明,LMP1促使细胞内c-myc反式激活活性增强,c-Myc蛋白表达量升高;导入反义LMP1表达质粒阻断LMP1表达后,c-myc反式激活活性下降.将端粒酶hTERT启动子上c-myc结合位点突变后,LMP1不能诱导端粒酶hTERT表达.因而认为,EB病毒LMP1通过诱导c-myc表达而活化端粒酶hTERT.
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肺鳞癌及腺癌端粒酶逆转录酶表达的原位定量分析及其病理学意义
目的通过定量检测肺癌组织端粒酶hTERT的表达水平,分析肺癌与hTERT表达的定量关系,为从hTERT的表达方面探讨肺癌的诊断问题提供实验依据.方法采用免疫组化阳性单位定量法检测12例肺癌组织癌细胞和9例非肿瘤性肺组织实质细胞端粒酶hTERT的表达水平.结果端粒酶hTERT在肺癌细胞中的表达水平高于肺非肿瘤性肺组织实质细胞(P=0.0001);肺鳞癌癌细胞端粒酶表达水平高于肺非肿瘤组织实质细胞的表达(P=0.0003);肺腺癌癌细胞端粒酶表达水平高于肺非肿瘤组织实质细胞的表达(P=0.0001);肺鳞癌与肺腺癌癌细胞端粒酶表达的阳性单位差异无显著性(P=0.2282).结论端粒酶hTERT高表达与肺癌有关.肺组织中端粒酶hTERT表达的阳性单位可作为肺癌诊断的参考指标进行研究.
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宫颈鳞状细胞癌及宫颈上皮内肿瘤组织中HPV16感染与端粒酶hTERT表达的关系
目的探讨HPV16感染与端粒酶hTERT表达在人宫颈鳞状细胞癌及其癌前病变中的关系.方法应用组织芯片技术结合原位杂交技术和免疫组织化学方法研究正常宫颈组织、宫颈上皮内肿瘤组织和宫颈鳞癌组织中HPV16感染以及hTERT表达的情况.结果 CINⅡ级、CINⅢ级、浸润性鳞癌组织中HPV16杂交信号阳性率显著高于正常宫颈组织(P<0.05),浸润癌HPV16阳性率也显著高于CIN(P<0.05);hTERT在CINⅡ级、CINⅢ级、浸润性鳞癌组织中的表达都显著高于正常宫颈组织(P<0.05),浸润癌也显著高于CIN(P<0.05);HPV16感染与hTERT表达之间呈正相关(P<0.05,r=0.339).结论宫颈鳞癌的形成与HPV16的感染、hTERT过度表达有重要关系.宫颈鳞癌及其癌前病变组织中HPV16感染与hTERT表达之间呈正相关,两者联合检测配合细胞学检查可能利于提高宫颈癌及其癌前病变的诊断率.组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台.
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利用组织芯片研究星形细胞瘤中端粒酶hTERT,p16及Topo-Ⅱa的表达及意义
目的探讨端粒酶hTERT,p16及Topo-Ⅱa在星形细胞瘤组织中的表达及其相关性.方法应用组织芯片技术,S-P免疫组织化学方法检测64例不同级别的星形细胞瘤及10例正常脑组织中3种蛋白的表达情况.结果端粒酶hTERT,Topo-Ⅱa的蛋白表达率分别为50.0%与59.4%,随肿瘤级别的增高而增高,差异有显著性(P＜0.05).而p16在Ⅲ,Ⅳ级中蛋白表达明显低于Ⅰ,Ⅱ级星形细胞瘤及正常脑组织,且差异有显著性(P＜0.05).端粒酶hTERT蛋白表达与星形细胞瘤组织学分级、Topo-Ⅱa蛋白表达呈正相关.结论hTERT,p16及Topo-Ⅱa蛋白表达失调参与了星形细胞瘤的发生、发展,并影响星形细胞瘤的生物学行为.
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寻常性银屑病皮损端粒酶RNA、反转录酶mRNA表达
目的探讨端粒酶RNA(hTR)和反转录酶(hTERT)在银屑病皮损中的表达情况以及它们与角质形成细胞增殖关系.方法应用原位杂交方法检测银屑病皮损hTR、hTERT mRNA的表达,应用免疫组织化学方法检测Ki-67抗原表达,并对hTR、hTERT mRNA的表达与Ki-67抗原表达进行相关性分析.结果 hTR表达在基底细胞、棘细胞、颗粒层细胞和所有有核细胞的胞浆,与细胞的增殖情况无关;其表达强度和阳性细胞百分率各组之间无明显差异(P＞0.05).而hTERT的表达与细胞增殖状态有关,主要表达在基底细胞层和棘细胞层下方,表达强度和阳性细胞百分率要明显高于正常皮肤(P＜0.05).Ki-67抗原主要表达在细胞生发层和分裂旺盛的组织;它的表达与hTERT的表达呈正相关(r=0.674,P＜0.01);而与hTR(r=-0.295,P＞0.05)无关.结论 hTERT mRNA在银屑病皮损中的表达明显升高,与细胞增殖活性有关.hTR的表达和细胞增殖活性无关.
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应用组织芯片技术研究人宫颈鳞状细胞癌及宫颈上皮内瘤样变组织中HPV16感染与端粒酶hTERT表达的关系
目的:探讨HPV16感染与端粒酶hTERT表达在人宫颈鳞癌及其癌前病变中的关系.方法:利用组织芯片技术结合原位杂技术和免疫组织化学方法研究130例正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤样变组织和宫颈鳞癌组织中HPV16感染以及端粒酶hTERT表达的情况.结果:①在8/22CIN I,7/11CINⅡ,11/13CINⅢ,4/6原位癌,41/52宫颈鳞癌中为HPV16杂交信号阳性,CINⅢ、浸润癌与正常宫颈组织相比,HPV16杂交信号阳性率差异有显著统计学意义(P＜0.05);②从CINⅡ到CINⅢ到浸润性鳞癌,hTERT表达与正常宫颈组织相比差异皆有统计学意义(P＜0.05),且阳性程度逐渐增加;③端粒酶hTERT表达在各级CIN、原位癌及浸润癌组织中,与HPV16型的感染率之间呈现正相关性(P＜0.05,r=0.339).结论:宫颈鳞癌的形成与HPV16的感染、端粒酶hTERT表达之间有重要关系.宫颈鳞癌及其癌前病变组织中HPV16感染与端粒酶hTERT表达之间具有正相关性,检测两者配合细胞学检查,有利于提高宫颈癌及其癌前病变的诊断率.组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台.
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人乳头状瘤病毒感染及端粒酶hTERT表达与宫颈癌关系的研究进展
人乳头状瘤病毒(HPV)感染和人子宫颈癌的发生密切相关,HPV致癌作用的主要基因为E6、E7.E6蛋白能诱导端粒酶的表达,其机制是激活了端粒酶催化亚基hTERT的转录活性.端粒酶激活是HPV感染后导致宫颈上皮瘤变和宫颈癌发生的关键性步骤.现就HPV感染及端粒酶hTERT在宫颈癌形成中的协同作用进行综述.
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端粒酶hTERT在子宫内膜癌中的表达及意义探讨
目的探讨端粒酶hTERT基因蛋白表达与子宫内膜癌发生发展的关系及对内膜癌诊断、预后的临床意义.方法采用免疫组化方法对33例子宫内膜癌、36例绝经期子宫内膜及36例子宫内膜增生过长标本进行端粒酶hTERT、雌激素受体ER及孕激素受体PR检测,同时与正常增殖期,分泌期子宫内膜进行对照.结果hTERT在子宫内膜癌中的表达强度明显高于其他内膜病变,有显著性差异(P< 0.05);hTERT在子宫内膜癌中的表达与肌层浸润及临床分期呈正相关;与病理分级及雌、孕激素受体ER,PR呈负相关.结论上述结果提示端粒酶hTERT在子宫内膜癌的发生发展中可能起重要作用,端粒酶hTERT与ER,PR的联合检测可能成为子宫内膜癌判断预后的一个指标.
