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  • 血清miR-486-5p水平与急性冠脉综合征的关系

    作者:杨彩娥;田亚平

    目的 观察急性冠脉综合征患者血清miR-486-5p表达水平的变化,探讨miR-486-5p与急性冠脉综合征的关系.方法 本研究选取83例AMI患者、71例UAP患者、20例SAP患者及31例健康对照者,采用荧光实时定量PCR检测血清miR-486-5p的表达水平,比较组间miR-486-5p水平的差异,并分析miR-486-5p与心肌损伤标志物和冠脉病变程度之间的相关性.结果 UAP患者和AMI患者的miR-486-5p水平均高于健康对照者,差异具有统计学意义(P=0.013,P=0.032);UAP患者的miR-486-5p水平高于SAP患者(P=0.038),而AMI患者的miR-486-5p水平与SAP患者比较无统计学差异.miR-486-5p水平与7项心肌损伤标志物AST、TnT、CK、LDH、CK-MB、Mb、proBNP均呈负相关(P<0.05).血清miR-486-5p的水平随着冠脉病变支数的增加而降低(P =0.044),其中2支病变组和3支病变组低于0支病变组(P=0.010,P=0.021).结论 miR-486-5p在急性冠脉综合征患者血清中的表达水平升高,miR-486-5p与心肌损伤和冠脉病变程度呈负相关.

  • MiR-486-5p在肝癌中的表达及其对肝癌细胞生长的影响

    作者:黄馨萍;侯晋;沈筱芸;陆海娟;罗小玲

    本研究旨在探讨肝癌中miR-486-5p的表达及其对肝癌细胞生长的影响.首先,通过qRT-PCR对40例肝癌患者的肝癌组织及其癌旁组织、以及肝癌细胞系(QGY-7701、QGY-7703、BEL-7404、SMMC-7721、Huh7、HepG2和PCL/PRF/5)进行miR-486-5p表达水平的验证;然后,合成miR-486-5p模拟物及其阴性对照物NC,分别转入上述七种肝癌细胞,采用CCK8试剂检测miR-486-5p对肝癌细胞生长的影响;后,采用流式细胞术检测miR-486-5p对肝癌细胞周期和细胞凋亡的影响.结果显示,与miRNA第二代高通量大规模平行测序(miRNomes MPSS)结果一致,miR-486-5p在肝癌组织和肝癌细胞中显著低表达(P<0.05).CCK8检测结果表明,转染miR-486-5p模拟物能有效、稳定的抑制上述七种肝癌细胞的生长(P<0.05).流式细胞仪检测发现,过表达miR-486-5p能促进肝癌细胞凋亡(QGY-7703细胞,P<o.001; QGY-7701细胞,P<0.01),及诱导细胞周期阻滞在G1期(P<0.01).研究结果表明,miR-486-5p在肝癌组织中低表达;重建肝癌细胞内miR-486-5p的表达,可有效诱导肝癌细胞周期阻滞和凋亡,从而抑制肝癌细胞生长,提示miR-486-5p可能在肝癌的发生发展中起着重要作用.

  • miR-486-5p对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用

    作者:张冉冉;连海峰;史宁;胡营滨;李明;刘成霞

    目的:探讨miR-486-5P对裸鼠皮下人胃癌移植瘤生长的影响及其可能的作用机制.方法:建立胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型,经miR-486-5P过表达质粒处理后,观察裸鼠皮下移植瘤生长情况,采用Western blotting及免疫组织化学法检测miR-486-5p靶基因神经纤毛蛋白-2(NRP2)的表达水平.结果:成功构建胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型;实验组移植瘤内miR-486-5p的表达水平明显高于对照组(P<0.05),miR-486-5p可明显抑制裸鼠皮下胃癌移植瘤的生长;与阴性及空白对照组相比,实验组平均瘤体质量明显下降[(0.404±0.080) vs (0.748±0.122)、(0.788±0.176)g,均P<0.05];移植瘤平均体积明显减小[(0.333 ±0.039) vs (0.597 ±0.175)、(0.594±0.216)cm3,均P<0.05],实验组的抑瘤率达46.99%;实验组经miR-486-5p过表达质粒处理后,免疫组化检测结果显示,NRP2蛋白主要定位于胃癌细胞质内,呈棕黄色颗粒;实验组NRP2蛋白的IHS得分显著低于阴性及空白对照组[(2.2±0.84) vs (6.4±0.89),(6.2±1.48),均P<0.01];阴性对照组与空白对照组的得分差异无统计学意义(P>0.05);Western blotting检测结果显示,实验组移植瘤组织中NRP2蛋白的相对表达量显著低于阴性及空白对照组[(0.04±0.006) vs (0.70 ±0.03),(0.68±0.02),P<0.01].阴性和空白对照组间的IHS得分值、抑瘤率及NRP2蛋白表达水平的差异均无统计学意义(P>0.05).结论:miR-486-5p可明显抑制裸鼠皮下胃癌SGC-7901细胞移植瘤的生长,其作用机制可能与抑制NRP2的表达有关.

  • NRP2及miR-486-5p 在胃癌中的表达及临床意义

    作者:连海峰;李明;刘成霞;贾兴芳;李丹;吴小翎

    目的:检测神经纤毛蛋白-2 (neuropilin-2,NRP2)和miR-486-5p在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌淋巴结转移的关系.方法:收集65例胃癌组织及其配对癌旁正常粘膜组织,免疫组织化学法检测组织中NRP2的表达,real-time PCR检测miRNA-486-5p的表达,免疫组织化学法检测D2-40标记的微淋巴管密度(microlymphatic density,MLD),统计分析NRP2、miR-486-5p的表达与MLD相关性.结果:免疫组化提示NRP2在肿瘤中表达增高(78.5% vs.29.2%,x2=16.046,P=0.000),且与淋巴结转移密切相关(x2=7.222,P=0.007).real-time PCR结果显示肿瘤组织miR-486-5p表达明显下调(0.39±0.16 vs.1.00±0.06,P=0.000),NRP2的表达水平与MLD呈正相关(r=0.384,P=0.015),miR-486-5p的表达水平与MLD呈负相关(r=-0.755,P=0.000).结论:NRP2和miR-486-5p与胃癌发生发展密切相关,有望成为胃癌治疗的新靶点.

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