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糜酶与心血管疾病间关系的研究进展
心脏肥大细胞分泌的糜酶是近年发现的一种糜蛋白样的丝氨酸蛋白酶,广泛分布于心肌间质.自从发现血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)生成的旁路途径以来,糜酶与心血管疾病的关系日益受到关注[1],本文就国内外研究进展综述如下.
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糜酶对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad3信号通路的影响
目的 研究糜酶对肝星状细胞转化生长因子β1 (TGF-β1) /Smad3信号通路的影响.方法 对大鼠肝星状细胞株HSC-T6进行体外培养,设定2组,空白对照组(加入等量磷酸盐缓冲液)及糜酶处理组(加入终浓度为10 mg/L的糜酶),作用24 h后收集细胞培养上清液,提取全细胞蛋白,收集细胞爬片.TGF-β1在培养上清液中的表达采用免疫印迹法及ELISA法检测,Smad3、p-Smad2/3、纤维连接蛋白(Fn)的表达采用免疫印迹法检测.结果 免疫印迹法及ELISA检侧结果均表明在糜酶处理组培养上清液中TGF-β1蛋白表达量均较空白对照组高[免疫印迹法:(0.33±0.05)vs(0.18±0.03),t=3.826,P＜0.05;ELISA法:(178.05±34.63) ng/Lvs (138.42±20.17) ng/L,t=3.401,P＜0.05],差异均有统计学意义;而糜酶处理组与空白对照组在培养上清液中Smad3相对表达量比较差异无统计学意义[(0.65±0.06)vs(0.62±0.05),t=0.086,P=0.891 ＞0.05];p-Smad2/3蛋白相对表达量、p-Smad2/3与Smad3蛋白相对表达量的比值则明显高于空白对照组,差异均有统计学意义[(0.72±0.04)vs(0.45±0.03),t=8.101,P=0.001;(1.11±0.13) vs (0.70±0.04),t=5.210,P=0.006＜0.05];糜酶处理组Fn的表达量较空白对照组明显升高,差异有统计学意义[(0.56±0.04)vs(0.34±0.02),t=6.141,P＜0.05].结论 对体外培养的HSC-T6,糜酶可促进其产生TGF-β1,并使其中的Smad3的磷酸化增加.在糜酶作用下HSC-T6的细胞外基质成分Fn分泌明显增加.
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曲尼司特对犬自体静脉移植术后再狭窄的影响
目的 观察曲尼司特对犬自体静脉移植术后再狭窄的影响.方法 将犬颈静脉外侧支间置移植于颈总动脉.术前一周开始用药至取材,实验组每日给予曲尼司特50 mg/kg.术后2周取材测定局部血管糜酶mRNA水平,应用病理形态学、计算机图像定量分析及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学等方法观察其对自体移植静脉术后再狭窄的影响.结果 静脉移植术后局部血管糜酶mRNA活性表达明显增加,而曲尼司特可以显著抑制糜酶mRNA的表达(P<0.05);静脉移植术后静脉内膜的平均厚度、PCNA表达实验组均减少,与对照组相比差异有显著性(P<0.05).结论 曲尼司特通过糜酶途径对犬自体静脉移植术后再狭窄具有抑制作用.
