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HEV保护性抗体的制备与功能研究
目的 研究基于戊型肝炎病毒中和表位(p179)的小鼠单克隆抗体的HEV中和保护作用.方法 构建含HEV中和表位p179基因的真核表达质粒venus-179,以尾静脉注射方法对BALB/c小鼠实施基因免疫,ELISA法检测免疫后小鼠血清中抗体应答水平,通过单克隆抗体的方法制备HEV抗体,通过C3A细胞株人HEV细胞感染模型,采用RT-PCR法检测中和试验后保护性抗体的中和活性.结果 成功制备了6株针对戊型肝炎病毒中和表位(p179)的抗体,其中抗体株2G8F9能有效中和HEV病毒,证实其产生的特异性抗体能够有效阻断HEV感染易感细胞C3A,具有中和HEV的活性.结论 戊型肝炎病毒中和表位(p179)的基因疫苗venus-179免疫小鼠制备的单克隆抗体具有中和作用的免疫应答.
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富组蛋白中和牙周可疑致病菌内毒素作用的实验研究
目的:研究人腮腺唾液富组蛋白对牙周可疑致病菌内毒素的中和作用。方法:采用改良Westphal热酚水法提取并纯化牙龈卟啉菌（47-A株）和具核梭杆菌（临床分离株）的内毒素，用鲎试验试管法观察HRP-5对这两株细菌的内毒素的中和作用。结果:在本实验条件下, HRP-5（10μg／ml）能轻度抑制大肠杆菌、牙龈卟啉菌及具核梭杆菌的内毒素（1 ng／ml）的鲎活性。结论:相同浓度的HRP-5对需氧的大肠杆菌和专性厌氧的牙龈卟啉菌及具核梭杆菌的内毒素，具有相同的中和作用，提示富组蛋白可能在维护牙周健康中发挥一定作用。
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H3 N 2流感病毒血凝素球状头部的保守中和表位
一些针对流感病毒血凝素的中和抗体主要通过抑制血凝素和宿主细胞表面受体的结合而发挥作用，还有一些中和抗体可以阻止低pH介导的血凝素的构象改变，这种构象改变对膜融合是必须的。总的来说，前一种抗体主要结合在球状HA1的顶端，其针对的毒株特异性不强，而后一种抗体主要结合在HA2的中间，有较强的毒株特异性。在本研究中，我们分析了一种具有广泛中和作用的抗H3 N2流感病毒的人源抗体F005－126的表位及功能。对F005－126的Fab和血凝素所形成复合物的晶体结构研究表明，在血凝素的三聚体中，抗体跨越了其中两个血凝素单体所形成的交叉口，链接其球状顶端，并且将三个血凝素单体都链接起来。通过抗体重链骨架区3和三个互补决定区来识别两个多肽片段（部位L和R）和残基285位天冬氨酸链接的多糖。抗体结合到位点L （残基171～173、239、240）和R （残基91、92、270～273、284、285）主要是由多肽主链这些位点处的范德瓦尔斯力介导的，其次还可以通过HA1保守序列的一些侧链氢键来介导结合。此外，由F005－126识别的多糖在H3 N2病毒中均保守。 F005－126还可以阻止低pH 环境下介导的血凝素构象改变。一些新鉴定的保守型抗原表位，包括多糖，应该可以在人体中产生免疫原性，而且可以诱导产生抗H3病毒的广谱中和抗体。
