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雄黄诱导MCF-7/ADM细胞凋亡及逆转其耐药性的研究
目的 探讨雄黄诱导人乳腺癌MCF-7/ADM细胞凋亡及逆转其耐药性的调节机制.方法 经MTT法探讨雄黄对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞药物敏感性的影响;用透射电镜观察凋亡细胞形态改变;应用流式细胞术,探讨凋亡抑制基因bcl-2的编码蛋白Bcl-2的改变及凋亡百分率的改变;通过荧光分光光度法观察雄黄对细胞内化疗药物阿霉素积累的影响.结果 雄黄对MCF-7/ADM的耐药性有明显的逆转作用,无毒剂量(15 mg/L)及低毒剂量(25 mg/L)雄黄作用后,逆转倍数分别为2.3倍及2.8倍;出现凋亡细胞,凋亡百分率由0.6%分别增至2.0%(P＜0.05)及3.4%(P＜0.01);Bcl-2表达由90.2%分别降至63.6%(P＜0.01)及52.7%(P＜0.01);MCF-7/ADM的细胞内阿霉素浓度明显增加(P＜0.01).结论 雄黄通过降低Bcl-2表达,促进细胞凋亡,增加耐药细胞内阿霉素积累量等耐药机制的调节,部分逆转了MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性.
关键词： 雄黄 MCF-7/ADM细胞株 耐药性 流式细胞术 电镜 -
β-榄香烯逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素耐药性的研究
目的探讨β-榄香烯(β-ELE)逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素(ADM)的耐药性.方法采用MTT法测定β- ELE对人乳腺癌MCF-7/ADM 细胞药物敏感性的影响.经荧光分光光度法检测β- ELE对细胞内化疗药物ADM积累的影响,应用流式细胞术观察耐药细胞的凋亡抑制蛋白bcl-2改变.结果β- ELE对MCF-7/ADM的耐药性有明显逆转作用,非细胞毒性剂量(6 μg/ml)及低毒剂量(13 μg/ml)的β-ELE逆转倍数分别为1.4倍及2.2倍.β-榄香烯作用后,MCF-7/ADM的细胞内ADM浓度明显增加(P<0.01),bcl-2由90.2%降至70.0% (P<0.05).结论β- ELE可部分逆转MCF-7/ADM细胞的耐药性,逆转机制与增加细胞内药物积累及降低bcl-2的表达有关.
关键词： 乳腺肿瘤 β-榄香烯 MCF-7/ADM细胞株 对ADM耐药 -
蝎毒联合ADM对人乳腺癌MCF-7/细胞的凋亡诱导作用及其耐药逆转的研究
目的 探讨蝎毒(BMK)联合阿霉素(ADM)对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的凋亡诱导及其耐药逆转作用.方法 MTT法、荧光分光光度法、流式细胞术、紫外分光光度术和免疫细胞化学法.结果 ①非细胞毒性剂量(3.0μg/ml)蝎毒能显著降低MCF-7/ADM的IC50(P＜0.01),增加MCF-7/ADM细胞内ADM的药物积累(P＜0.01).②蝎毒(3.0μg/ml)联合ADM后增强了对耐药细胞的凋亡诱导作用,凋亡率由8.9±0.01﹪上升为12.6±0.21﹪(P＜0.01).③蝎毒(3.0 μg/ml)能够显著降低耐药细胞内谷胱甘肽S转移酶(GSTs)酶的活性(P＜0.01).结论 蝎毒能够部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性,其逆转机制与抑制耐药细胞GSTs活性有关.
关键词： 蝎毒 耐药逆转 谷胱甘肽S转移酶 MCF-7/ADM细胞株 -
蝎毒对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药的影响及机制研究
[目的]探讨蝎毒(BMK)对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药的逆转及谷胱甘肽S转移酶(GST)活性的影响.[方法]实验分两组:MCF-7/ADM耐药细胞组;MCF-7/ADM+蝎毒组.采用MTT法测定蝎毒的细胞毒性和抗药性逆转,流式细胞术测定蝎毒对耐药细胞凋亡百分率的影响,紫外分光光度术测定蝎毒对谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的影响.[结果]与MCF-7/ADM耐药细胞组相比:①非细胞毒性剂量(3.0 μg/mL)蝎毒能显著降低MCF-7/ADM的IC50(P＜0.01),逆转倍数为1.52倍.②蝎毒(3.0 μg/mL)显著增强对耐药细胞的凋亡诱导作用,凋亡率由(8.9±0.01)%上升为(12.6±0.21)%(P＜0.01).③蝎毒(3.0 μg/mL)显著降低耐药细胞内谷胱甘肽S转移酶的活性(P＜0.01).[结论]蝎毒能够部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性,增加ADM对肿瘤细胞的凋亡诱导作用,其逆转机制与降低耐药细胞内GST酶活性有关.
关键词： 蝎毒 逆转 谷胱甘肽S转移酶 MCF-7/ADM细胞株 -
人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的耐药谱及brca1基因表达的实验研究
[目的]研究人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的耐药谱并探讨brca1基因产物表达与该细胞耐药性的相关性.[方法]经MTT法检测MCF-7/ADM细胞的耐药谱;通过免疫荧光法检测brca1基因产物表达情况.[结果]测得MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药倍数为3.7倍;对长春新碱的耐药倍数为70.3倍;对氟尿嘧啶的耐药倍数为7.8倍.brca1基因产物在MCF-7/ADM细胞中的表达强度(98.23±7.63)高于MCF-7/S细胞(8.69±1.25), 差异具有显著性意义(P<0.01).[结论]MCF-7/ADM细胞是多药耐药细胞株,brca1与肿瘤多药耐药产生可能有一定的相关性.
关键词： MCF-7/ADM细胞株 多药耐药性 BRCA1基因 -
聚束微波加热逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素耐药性的实验研究
目的 耐药性是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂.目前尚无一理想的、可应用于临床的阿霉素(ADM)耐药逆转剂.本研究探讨聚束微波加热对ADM耐药性的逆转作用及其机制.方法 体外利用人乳腺癌细胞株MCF-7的ADM耐药模型MCF-7/ADM,采用MTT法检测聚束微波加热对MCF-7/ADM细胞耐药性的逆转作用.用Real-Time PCR测定细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(Multidrug resistance related protein,MAP)的表达水平.高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内ADM浓度.结果 MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药指数为45.5.经聚束微波加热后,ADM对MCF-7/ADM的半数抑制浓度(IC50)由(60.56±2.38)ug/ml下降至(22.86±2.76)ug/ml,逆转倍数为2.64倍.Real-Time PCR检测结果显示,MCF-7/ADM细胞的MAP与P-gp mRNA表达水平均明显高于MCF-7细胞,经聚束微波加热后,MCF-7/ADM细胞胞内的MAP与P-gp mRNA表达水平均明显下降.HPLC法测定细胞内ADM含量的结果显示,经聚束微波加热处理后,MCF-7/ADM细胞内ADM的含量明显增加.结论 聚束微波加热能逆转MCF-7/ADM对ADM的耐药性,聚束微波加热逆转ADM耐药性的机制可能是减少MCF-7/ADM细胞内MRP与P-gp mRNA的表达水平,从而增加了MCF-7/ADM细胞内ADM的蓄积.
关键词： 聚束微波加热 乳腺肿瘤 MCF-7/ADM细胞株 ADM 耐药 -
微波热疗对人乳腺癌阿霉素细胞MCF-7多药耐药蛋白及耐药性的影响
目的 探讨微波热疗对人乳腺癌阿霉素细胞MCF-7和阿霉素耐药细胞MCF-7/ADM的多药耐药蛋白表达和耐药性的影响.方法 应用Real-Time PCR法检测微波热疗对P-糖蛋白(P-gP)、多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响和高效液相色谱法(HPLC)检测微波热疗对细胞内阿霉素浓度的影响.结果 MCF-7/ADM细胞在微波热疗后4 h和24 h,P-gP、MRP表达量明显下降(P<0.01).微波热疗以后肿瘤细胞内阿霉素(ADM)浓度有明显上升(P<0.01).结论微波热疗抑制了耐药蛋白的表达,增加了细胞内的药物浓度,热疗可能是逆转化疗耐药从而提高化疗效果的一种有效手段.
关键词： 微波热疗 乳腺肿瘤 MCF-7/ADM细胞株 多药耐药蛋白 耐药 -
降低细胞内GSH浓度对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响
目的 探讨肿瘤细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)浓度对肿瘤细胞药物敏感性及在肿瘤细胞耐药机制中的作用. 方法以马来酸二乙酯(DEM)处理人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM和敏感细胞株MCF-7/S,以消耗细胞内GSH,MTT法检测DEM处理前后两种细胞存活率的变化,并采用荧光分光光度法同步检测其细胞内GSH的消耗程度,分析细胞内GSH浓度的变化与MCF-7细胞对ADM敏感性变化间的相关关系. 结果 0.1 μmol/L DEM使MCF-7/ADM细胞内GSH浓度减少37.4%(P＜0.01),使MCF-7/S细胞内GSH浓度减少29.7%(P＜0.01);ADM亦使细胞内GSH含量呈ADM浓度依赖性的下降;DEM与ADM合用时,GSH浓度显著下降,其下降程度大于DEM和ADM单独应用之和.随着细胞内GSH数量的减少,无论是MCF-7/ADM细胞,还是MCF-7/S细胞,细胞存活率均下降,即对ADM的敏感性均增强(P＜0.01).结论 DEM耗竭细胞内GSH的作用与ADM有协同效应,耗竭细胞内GSH可增强人乳腺癌MCF-7/S细胞对ADM的敏感性,部分逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性.
