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串珠素在喉癌细胞Hep-2中的表达
目的:研究串珠素(perlecan)在喉癌细胞Hep-2中的表达,探讨其与喉癌细胞的生长、浸润及转移的关系.方法:培养Hep-2和正常永生化表皮细胞系(Hacat),提取总细胞RNA,应用RT-PCR方法检测串珠素mRNA在Hep-2和Haeat细胞中的表达;应用免疫组织化学染色检测串珠素在Hep-2细胞和Hacat细胞中的表达.结果:串珠素mRNA在Hep 2细胞中高表达,平均相对积分吸收度(A)值为:0.831 0±0.050 4;串珠素mRNA在Hacat细胞中低表达,平均相对积分A值为:0.274 3±0.062 9.差异有统计学意义(t=19.684,P＜0.01).免疫组织化学染色表明串珠素在Hep-2细胞中高表达(A=0.255 7±0.028 7),在Hacat细胞中低表达(A=0.073 0±0.0111),差异有统计学意义(t=26.982,P ＜0.01).结论:串珠素与喉癌细胞的生长、浸润及转移有密切关系.
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干扰串珠素表达对硬膜外瘢痕细胞中Ⅰ型胶原蛋白生成的影响
目的 探讨干扰串珠素表达对椎板切除术后硬膜外瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白生成的影响. 方法 选取30 只2个月龄的SD雄性大鼠,行后路L4-5腰椎全椎板切除术.术后第20天取每只大鼠硬膜后方的瘢痕组织,采用组织块贴壁法进行细胞培养.筛选第3代瘢痕组织培养的成纤维细胞分为3组(n=6):慢病毒介导小发夹RNA(shRNA)干扰组[进行慢病毒介导shRNA干扰串珠素表达实验]、纯慢病毒无shRNA组和空白组.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western-Blot检测各组Ⅰ型胶原蛋白的生成量,并进行比较.结果 佳感染复数为100时,细胞形态正常,轮廓清晰,确定其为佳感染复数值.RT-PCR测定慢病毒介导shRNA干扰组、纯慢病毒无shRNA组、空白组Ⅰ型胶原蛋白RNA目的条带吸光度与内参条带吸光度比值平均分别为0.043±0.003、0.473±0.011、0.475 ±0.013,Western Blot测定Ⅰ型胶原蛋白RNA目的条带吸光度与内参条带吸光度比值平均分别为0.190±0.005、2.116±0.012、2.122±0.009,3组间以上项目比较差异均有统计学意义(P＜0.05),其中慢病毒介导shRNA干扰组Ⅰ型胶原蛋白生成量较纯病毒无shRNA组及空白组明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 干扰串珠素表达能有效减少椎板切除术后硬膜外瘢痕成纤维细胞生成Ⅰ型胶原蛋白,对抑制术后硬膜外瘢痕形成有一定作用.
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串珠素在大鼠牙胚发育过程中的表达和意义
目的:观察牙胚发育不同时期串珠素(Perlecan)的分布与表达情况,探讨其与牙胚发育的关系.方法:出生0天、1天、1周、2周的SD大鼠取下颌第一磨牙,行Perlecan免疫组化染色(SABC法),光镜观察其表达与分布情况.结果:Perlecan在大鼠各时间段牙胚均有阳性表达,但各时期的分布模式不同,出生后各时间段,成釉器中均为强阳性表达,而牙囊中Perlecan表达随着牙胚发育而不断增强,之后又随着牙胚的成熟而下降.结论:Perlecan可能在牙胚的发育过程中发挥着重要的调节作用.
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大鼠骨骼肌失神经支配后串珠素和突触素表达的变化
目的:研究串珠素在骨骼肌失神经支配后的表达和神经肌接头的变化.方法:成年SD大鼠30只,左侧坐骨神经切断,右侧正常对照.术后1、2、4周取材.免疫组化检测腓肠肌中串珠素和突触素表达,图像分析表达水平.结果:所有受试大鼠坐骨神经切断后相关肌肉进行性萎缩.神经切断4周后骨骼肌串珠素的表达显著降低(P＜0.05),突触素表达也下降,但差异无统计学意义.结论:串珠素在骨骼肌失神经后的表达变化比突触素更明显.
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串珠素在牙囊发育过程中的表达和意义
目的:观察牙囊发育不同时期串珠素(perlecan)分布、表达情况,探讨其与牙囊发育的关系.方法: 出生0 d、1 d、1周、2周的SD大鼠取下颌第一磨牙及其牙囊组织,进行Perlecan免疫组化染色(SABC法),光镜观察其表达、分布,用图像分析测定其灰度值,并进行定量分析比较.结果: 串珠素在各时间段牙囊均有阳性表达,而1 d、1周组表现为强阳性.图像分析结果表明1 d组、1周组大鼠阳性结果明显高于0 d组、2周组,出生后串珠素表达随着牙胚发育而不断增强,之后又随着牙胚的成熟而下降.结论: 串珠素与牙囊的发育有关,在牙囊发育初期对牙囊基质的形成发挥作用,晚期随着基质的成熟其表达下降.
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串珠素在大鼠牙髓损伤修复过程中表达变化的实验研究
目的:探讨串珠素在牙髓损伤修复过程中的表达变化及其可能的作用.方法:取雄性SD大鼠48只,随机分为4组(n=12).建立大鼠一侧上颌第一磨牙牙髓损伤模型,另一侧同名牙作为正常对照组;分别于损伤后1、3、5、7 d各取1组目标牙样本,采用免疫组化染色和Real-time PCR观察检测各组牙髓组织中串珠素的表达变化,并采用单因素方差分析比较各组间的差异.结果:免疫组化染色显示,牙髓损伤后,牙髓组织中串珠素染色强度增加,各实验组的平均光密度均明显高于正常对照组(P<0.05),并以1 d组升高为明显;RT-PCR检测显示,与正常对照组相比,串珠素mRNA的相对表达量在牙髓损伤后1d明显下降,此后随时间延长逐渐回升,损伤后7d时回升明显,但仍明显低于对照组(P<0.05).结论:串珠素在牙髓组织损伤后的防御机制中起一定的作用,但其表达的增加并不是由其生物合成增加所致.
