首页 > 文献资料
-
RNA解旋酶Ddx5(p68)和Ddx17(p72)的特点和功能
DEAD box蛋白家族是一类在进化中高度保守的ATP依赖的RNA解旋酶,广泛存在于从细菌到哺乳动物的许多物种中,根据其氨基酸序列(Asp-Glu-Ala-Asp)命名的DEAD box RNA解旋酶不仅参与需要RNA结构调节的所有细胞过程,而且DEAD box家族的一些蛋白成员在转录调节中也发挥重要作用,如DEAD蛋白家族中高度相关的成员Ddx5(p68)和Ddx17(p72)对雌激素受体α、抑癌基因p53、肌原性调节蛋白MyoD和Runx2等的共激活作用.本文着重阐述DEAD box RNA解旋酶家族中Ddx5(p68)和Ddx17(p72)特点和它们在转录中的调节功能.
关键词： RNA解旋酶 Ddx5(p68) Ddx17(p72) -
宿主因子Mov10蛋白的研究进展
Mov10蛋白是RNA解旋酶超家族-1成员,也是RNA诱导沉默复合体(RISC)的组份.近来研究证实,Mov10蛋白在RNA干扰路径中有积极的作用并且能在多阶段抑制HIV-1复制,包括病毒产生、Gag蛋白水解程序、逆转录过程.Mov10蛋白也可降低其它逆转录病毒如猿类免疫缺陷病毒、鼠白血病病毒和马传染性贫血病毒的感染性.因此,Mov10蛋白具有广泛和有效的抗逆转录病毒活性.
-
DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化
目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据.方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应用免疫荧光组织化学显色法检测神经上皮细胞中DDX3和DDX5的表达变化.结果:与对照组相比,模型组大鼠神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5阳性表达在环磷酸胺处理后4h无改变,8、12、24h均升高,48h则降低,差异均有统计学意义.结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5表达异常,提示DDX3和DDX5可能参与了神经管畸形的发生.
-
RNA解旋酶DDX39对肾透明细胞癌增殖的影响
目的 通过小干扰RNA沉默检测DDX39基因对肾透明细胞癌增殖的影响及其相关机制.方法 应用脂质体转染法将DDX39-siRNA转染人肾透明细胞癌786-O细胞,试验设空白对照组、阴性对照组、小干扰RNA转染组(DDX39-siRNA).应用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测DDX39-siRNA的干扰效率;MTT法和平板克隆形成实验检测DDX39对786-O细胞增殖的影响;Western印迹法检测细胞增殖指标PCNA;流式细胞术检测DDX39-siRNA干扰后786-O细胞周期的变化.结果 与阴性对照组相比,转染DDX39-siRNA后,786-O细胞中DDX39 mRNA及其蛋白的表达水平明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);DDX39-siRNA干扰后786-O细胞增殖能力受到抑制,克隆形成能力明显下降;S期细胞减少,G2/M期细胞百分比明显增加(P＜0.05).结论 DDX39敲减后可显著抑制肾癌细胞786-O细胞增殖,并阻滞细胞于G2/M期.
-
DEAD-box家族蛋白在癌症中的研究进展
DEAD-box家族蛋白是一类ATP依赖的RNA解旋酶,在RNA代谢的过程中发挥重要的作用.DEAD-box家族蛋白可通过调节癌基因和抑癌基因的表达及肿瘤相关信号通路等影响细胞的增殖、分化、凋亡,进而发挥促癌或抑癌的作用.
关键词： DEAD-box家族蛋白 RNA解旋酶 癌症 靶向治疗 -
解旋酶DDX46 基因对食管鳞癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨RNA解旋酶DDX46基因对食管鳞癌细胞株Eca-109增殖和凋亡的影响及可能的作用机制.方法:以人永生化食管鳞状上皮细胞Het-1A为对照,实时荧光定量PCR(qPCR)检测DDX46 mRNA在Eca-109细胞中的相对表达水平.应用shRNA干扰技术沉默Eca-109细胞DDX46基因后,分别采用MTT实验、克隆形成实验及流式细胞术检测细胞增殖情况、克隆形成能力以及细胞周期和细胞凋亡情况.并用Western blot检测DDX46基因沉默后Eca-109细胞DDX46蛋白和凋亡信号转导通路关键分子Caspase-3和PARP-1蛋白表达的变化.结果:与Het-1A细胞相比,Eca-109细胞DDX46 mRNA的表达水平显著升高(P<0.01).与对照组相比,靶向沉默DDX46基因后MTT实验显示Eca-109细胞活力明显减弱,增殖能力被显著抑制(P<0.01);克隆形成实验显示Eca-109细胞克隆形成能力被显著抑制(P<0.01);流式细胞术检测显示处于G1期的细胞增加,而处于S期的细胞减少(P<0.05),细胞周期停滞于G0/G1期;凋亡实验显示细胞凋亡率显著增加(P<0.01).Western blot检测显示,与对照组比较,DDX46-shRNA干扰使Eca-109细胞DDX46蛋白表达水平显著下降(P<0.01),而cleaved Caspase-3和cleaved PARP-1蛋白表达水平显著上升(P<0.01).结论:DDX46 mRNA在食管鳞癌Eca-109细胞中高表达,DDX46基因沉默可能通过激活细胞凋亡信号转导通路而发挥抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用.
