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辛酸-硫酸铵法在纯化血清旋毛虫特异性IgG抗体中的应用
目的 从旋毛虫感染的大鼠和兔血清中纯化抗旋毛虫IgG抗体. 方法 分别用辛酸-硫酸铵法(CA-AS)、硫酸铵沉淀法(AS)纯化旋毛虫感染的大鼠和兔血清中抗旋毛虫IgG抗体. 结果 IgG抗体纯化率CA-AS法为80.05%~83.22%,AS法为67.00%~71.08%;得率CA-AS法为7.85~8.79 mg/ml,AS法为12.04~12.12 mg/ml;回收率CA-AS法为52.55%~55.03%,AS法为61.36%~64.87%.CA-AS法得率和回收率均低于AS法,但纯化率高于AS法.ELISA法测定CA-AS法和AS法纯化的抗体效价不变. 结论 CA-AS法是一种简便﹑快速﹑有效的纯化血清IgG抗体的方法,可用于大鼠和兔血清抗旋毛虫IgG抗体的纯化.
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辛酸-硫酸铵法纯化细胞培养上清中单克隆抗体的条件优化
常用的单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)纯化方法有辛酸-硫酸铵沉淀法、离子交换色谱法、免疫亲和色谱法、蛋白A亲和层析法等,以此纯化小鼠IgG类或IgM类mAb[1-2].其中辛酸-硫酸铵沉淀法简单易行,无需复杂的仪器及设备,实验中所用试剂均为普通试剂,容易获得,比其他纯化方法更值得推广.本文探讨辛酸-硫酸铵法纯化细胞培养上清中IgG类型的mAb优化条件,目的在于更好的回收细胞培养上清中的mAb,减少mAb制备过程中的大量抗体丢失,为mAb的进一步开发利用提供实验条件.