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贝氏隐孢子虫对不同免疫状态雏鸡的致病性比较研究
目的 了解贝氏隐孢子虫对不同免疫状态雏鸡的致病特点.方法 采用中药黄芪溶液自由饮用(免疫增强组)和醋酸地塞米松片经口灌服(免疫抑制组)2 d龄雏鸡,连用5 d,于3d龄分别接种1×10~6个卵囊/只,观察其排卵囊情况、症状、组织病理学变化和脾脏及法氏囊指数.实验设感染对照组(不用药)和空白对照组.结果 感染对照组、免疫增强组和免疫抑制组雏鸡感染隐孢子虫后的潜隐期均为4 d,开放期分别为24、24和26 d,发病雏鸡分别为10、3和15只,排卵囊(OPG)大峰值分别为39.4×10~4、19.4×10~4和46.0×10~4;观察期3组雏鸡平均增重274、272和210 g/只,差异无统计学意义(P>0.05),脾脏和法氏囊指数免疫抑制组低于其他试验组,免疫增强组与空白对照组基本一致,感染对照组雏鸡脾脏指数与其他试验组比较差异较大.结论 贝氏隐孢子虫对不同免疫状态雏鸡的致病性存在差异,中药黄芪对雏鸡感染隐孢子虫具有一定保护作用,免疫抑制剂可导致雏鸡感染隐孢子虫后症状加重.
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鸡源和鸭源贝氏隐孢子虫分离株对雏鸡的致病性比较研究
目的 研究不同宿主来源贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)对雏鸡的致病性差异. 方法 分别应用鸡源、鸭源贝氏隐孢子虫分离株感染3 d龄雏鸡,感染量为1×105个/只,对实验组雏鸡的排卵囊规律、临床症状、法氏囊指数、组织学病理变化进行了研究. 结果 鸡源贝氏隐孢子虫感染组雏鸡未出现死亡,发病率为25%,鸭源贝氏隐孢子虫感染组雏鸡发病率和病死率分别为35%和5%. 结论 不同源贝氏隐孢子虫均能引起雏鸡隐孢子虫病,但临床症状、排卵囊规律、法氏囊病变等存在差异.
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隐孢子虫的体外培养和感染动物模型的研究进展
隐孢子虫(Cryptosporidium)于1907年由Tyzzer[1]在实验小鼠胃内首次发现并描述,而此后的70年中并未得到医学及兽医学界的关注.1976年Nime等[2]和Meisel[3]相继报道了一名免疫功能正常的儿童和一名免疫抑制的成人的隐孢子虫病病例.1982年以来,随着艾滋病(AIDS)的出现和流行,对本虫的流行病学、诊断和治疗的研究明显增多.隐孢子虫属属于隐孢子虫科(Cryptosporidiids),艾美球虫亚目(Einerioiine),真球虫目(Eucoccidiorida),球虫亚纲(Asin Coccidia),孢子虫纲(Sporozoasida),端复亚门(Apicanplex).公认有6个种:小鼠隐孢子虫(C.muris)、微小隐孢子虫(C.parvum)、火鸡隐孢子虫(C.meleagridis)、贝氏隐孢子虫(C.baileyi)、鱼隐孢子虫(C.nasorum)、蛇隐孢子虫(C.serpentis).人的隐孢子虫病(cryptosporidiosis)是由C.parvum引起.隐孢子虫为一种重要的引起人和动物腹泻的机会性致病原虫.隐孢子虫能够感染多种脊椎动物并导致相应疾病,通常会引起哺乳动物稀水样腹泻便、鸟类的腹泻或呼吸道症状和鱼类及两栖类的胃炎[4],为人兽共患寄生虫病.
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贝氏隐孢子虫PCR检测试剂盒的研制
目的 研制禽类贝氏隐孢子虫的PCR检测试剂盒.方法 根据贝氏隐孢子虫18S rRNA和ITS-1序列,选取遗传标记位点多的一段核苷酸序列作为特异PCR引物的靶序列,设计、合成了一对针对贝氏隐孢子虫的特异性引物 (YJWF:5'-ACTGATATACAATACCACGG-3'和YR:5'-GCGGATAAAGTTCAGGTTC-3'),对PCR反应条件进行了一系列优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、稳定性、重复性和保存期等进行了系列研究.结果 该试剂盒能特异性地扩增出贝氏隐孢子虫基因组中相应片段,与安氏隐孢子虫,微小隐孢子虫,柔嫩艾美尔球虫等相关原虫基因组DNA无交叉反应;低能检测到3.48个卵囊;反复冻融50次对试剂盒没有影响;室温条件下至少可保存4个月.结论 该试剂盒的各项指标达到了贝氏隐孢子虫的检测要求.
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贝氏隐孢子虫鸡胚培养方法研究
目的 建立能稳定获得大量贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)卵囊的鸡胚培养方法,应用于抗隐孢子虫药物筛选和C.baileyi体外传代培养研究.方法 研究鸡胚培养温度、卵囊接种量、卵囊脱囊处理和卵囊回收时间对C.baileyi卵囊在鸡胚中增殖量的影响.结果 C.baileyi卵囊经尿囊腔接种9日龄鸡胚后在37 ℃、38 ℃、40 ℃条件下培养168 h,各组鸡胚尿囊液中卵囊量差异不显著(P＞0.05),但随着培养温度升高卵囊增殖量呈增加趋势.卵囊接种量分别为3.0×105个/枚和1.0×106个/枚,鸡胚40 ℃培养168 h,尿囊液中卵囊增殖倍数差异不显著(P＞0.05).接种3.0×105个卵囊和等量卵囊脱囊后产物,鸡胚40 ℃培养168 h,尿囊液中卵囊量差异不显著(P＞0.05).接种3.0×105个卵囊,鸡胚40 ℃培养168 h,尿囊液中卵囊量显著高于接种后144 h和接种后192 h(P＜0.05).结论 尿囊液收集时间是影响C.baileyi鸡胚培养卵囊获得量的重要因素,培养温度和接种量以40 ℃和3.0×105个/枚为宜,而卵囊脱囊处理是不必要的.
