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4种方法检测牛奶等样品中微量隐孢子虫卵囊的比较
目的评价4种方法检测牛奶等样品中隐孢子虫卵囊污染情况的应用价值.方法利用Nested PCR、PCR、饱和蔗糖溶液漂浮及金胺酚-改良抗酸染色4种方法,分别对36份牛奶、73份奶牛粪便及10份污水样品中鼠隐孢子虫卵囊进行检测.结果 Nested PCR方法的检出率分别为11.11%、23.29%和0,均高于其他3种方法.结论 4种检测方法中,Nested PCR敏感性高、特异性强、稳定性好,可用于微量隐孢子虫卵囊检测.
关键词： 隐孢子虫 牛奶-粪便-污水 微量检测 Nested PCR -
急性髓系白血病中的NOTCH基因变异
在12例急性髓系白血病患者与8例急性髓系白血病细胞株中寻找Notch1基因变异.应用nested-PCR法,银染色- SSCP,direct sequencing法分析.在患者9的白血病细胞中PEST部位发现点突变(7316C/T),氨基酸也随之发生变异 (Pro2439Leu).该基因变异是首次在AML细胞中发现的Notch1基因变异.由于在患者9的完全缓解的骨髓细胞中没有发现该突变,因此该突变不是SNP.有关该变异的具体作用机制还有待于进一步探讨.
关键词： Notch蛋白 基因变异 急性髓系白血病 Nested PCR -
一种莱姆病螺旋体real-time PCR方法的建立及其在鼠标本检测中的应用评价
目的 基于莱姆病螺旋体recA基因,建立一种检测鼠中莱姆病螺旋体的real-time PCR方法.方法 通过GenBank分析比较莱姆病螺旋体recA基因,选择其保守序列设计MGB探针及引物并进行方法学评估.并应用建立的real-timePCR方法和nested PCR方法对收集的123份鼠标本进行检测分析.结果 本研究建立的real-time PCR方法仅对莱姆病螺旋体检测阳性,其小检出浓度为101 copies/μL.标准曲线各浓度点Ct值批内、批间平均变异系数(CV)分别为1.56％和2.30％.123份鼠标本中,real-time PCR检测59例阳性,nested PCR检测43例阳性.结论 新建立的real-time PCR方法具有快速、敏感和特异的优点,可用于鼠标本中莱姆病螺旋体的检测.
关键词： 莱姆病螺旋体 Real-time PCR Nested PCR 鼠
