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肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157∶H7文献资料
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大肠埃希菌O157∶H7环介导等温扩增可视化检测方法的建立
目的 建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7环介导等温扩增(LAMP)可视化快速检测方法. 方法 针对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157∶H7编码脂多糖rfbE基因保守区设计LAMP引物及环引物,反应体系加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,结合LAMP浊度仪优化扩增条件,根据HNB的颜色变化进行结果判定,评价LAMP方法的特异性和灵敏性. 结果 建立的LAMP法对O157∶H7 rfbE基因的低检出限约为100 copy/反应管,检测肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)、肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)、宋内志贺菌、福氏志贺菌均为阴性.体系的扩增效率较高,可在40 min内出结果. 结论 建立的基于颜色判定的EHEC O157∶H7 LAMP检测方法具有特异、灵敏,设备要求简单等特点,适用于EHEC O157∶H7的快速检测.