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肠道病毒71型激活小胶质细胞的实验研究
目的 研究肠道病毒71型(EV71)对小胶质细胞的活化作用. 方法 采用细胞病变法将EV71接种小胶质细胞(BV2),通过观察接种后不同时间的荧光强度,确定EV71对小胶质细胞的感染性,同时采用实时荧光定量PCR检测病毒基因组;应用Griess法和流式细胞术检测EV71激活小胶质细胞后一氧化氮(NO))和炎性细胞因子的分泌情况.结果 荧光病毒EV71接种小胶质细胞可引起细胞形态改变,但经染细胞未观察到明显的绿色荧光;EV71接种后不同时间小胶质细胞的病毒载量未发生显著变化,但NO的合成和IL6的表达均显著升高(48 h时二者含量分别为40.9μmol/L和8 793.2 pg/ml),表明小胶质细胞已被EV71激活. 结论 EV71不能在小胶质细胞内进行复制,但可以激活小胶质细胞,并高表达炎症介质NO和IL-6.
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鼠髓样白血病细胞株NFS-60不依赖细胞的克隆
目的构建诱导型表达载体pTKS3-CAT,并转染入表达G-CSF受体的NFA-60不依赖细胞,将粒细胞集落刺激因子(G-CSF)依赖的细胞株鼠髓样白血病细胞株NFS-60,筛选为NFS-60不依赖细胞的克隆.方法在培养体系中加入0.5~10 ng/ml浓度的rhG-CSF,培养、传代.结果得到NFS-60不依赖细胞株的克隆,其细胞表面包含G-CSF相应受体,而增殖曲线不依赖于G-CSF因子浓度.结论克隆NFS-60不依赖细胞作为工程细胞用于G-CSF样活性化合物发现的研究.