首页 > 文献资料
-
利奈唑胺体外诱导粪肠球菌耐药株23S rRNA Ⅴ区基因突变位点分析
目的 阐明体外诱导利奈唑胺耐药粪肠球菌的核糖体23S rRNA Ⅴ区基因位点变异特征. 方法 收集1株血流感染的粪肠球菌和1株粪肠球菌质控菌ATCC29212(编号分别为F3和F4菌株,均为利奈唑胺敏感株),通过体外浓度倍增法诱导利奈唑胺耐药;挑取单克隆,经E-test条测定MIC值,获得各菌株的耐药浓度梯度;提取耐药菌株基因组DNA,PCR扩增23S rRNA Ⅴ区基因,扩增产物经测序后与野生株比较,获得Ⅴ区的突变位点. 结果 经体外多步法诱导利奈唑胺耐药的不同MIC值粪肠球菌共13株.PCR测序分析2株母株均无变异位点,23S rRNA Ⅴ区的突变位点主要是G2576U,此外还有T2504A、G2505A、C2610A、C2424U. 结论 体外多步法可诱导粪肠球菌利奈唑胺耐药,耐药机制与23S rRNA Ⅴ区位点突变密切相关,突变位点随着MIC值的增高而增多.
关键词： 粪肠球菌 利奈唑胺耐药 23S核糖体RNA基因 -
利奈唑胺耐药金黄色葡萄球菌与克林霉素交叉耐药规律
目的 阐明体外诱导利奈唑胺耐药金黄色葡萄球菌与克林霉素交叉耐药的变化规律.方法 收集2株金黄色葡萄球菌质控菌ATCC29213和ATCC25923,1株乳汁来源的金黄色葡萄球菌和1株血流感染的金黄色葡萄球菌(编号分别为S2、S3、S5和S7菌株,均为利奈唑胺敏感株),通过体外浓度倍增法诱导利奈唑胺耐药;挑取单克隆,37℃培养16h,经E-test条测定MIC值,获得各菌株的耐药浓度梯度,同时测定各菌株对克林霉素的MIC值,提取耐药菌株基因组DNA,PCR扩增23SrRNA V区基因,扩增产物经测序后与野生株比较,获得V区的突变位点.结果 经体外多步法诱导利奈唑胺耐药的不同MIC值金黄色葡萄球菌共20株.除S7系列诱导菌株外,其他系列诱导利奈唑胺耐药的菌株,均出现了克林霉素的交叉耐药,PCR测序分析4株母株均无变异位点,G2505A、U2500A、G2576U、C2610C等V区位点可能与克林霉素交叉耐药相关.结论 体外多步法诱导产生的金黄色葡萄球菌利奈唑胺菌株,其与克林霉素交叉耐药的机制与23S rRNA V区的位点突变相关.
关键词： 金黄色葡萄球菌 利奈唑胺耐药 交叉耐药 23S核糖体RNA基因 -
利奈唑胺诱导粪肠球菌耐药50S核糖体蛋白突变位点分析
目的 阐明体外诱导利奈唑胺耐药粪肠球菌的核糖体蛋白位点变异特征.方法 收集1株血流感染的粪肠球菌利奈唑胺敏感株,通过体外浓度倍增法诱导利奈唑胺耐药;挑取单克隆,经E-test条测定MIC值,获得各菌株的耐药浓度梯度;提取耐药菌株基因组DNA,PCR扩增核糖体蛋白L3和L4(对应rplC和rplD基因),扩增产物经测序后与野生株比较,获得核糖体蛋白及对应氨基酸的突变位点.结果 经体外多步法诱导利奈唑胺耐药的不同MIC值粪肠球菌共13株.PCR测序分析2株母株均无变异位点,rpm基因对应的氨基酸位点不尽相同,rplD基因普遍存在T301C位点变异,对应的氨基酸为Phe101Leu.结论 体外多步法可诱导粪肠球菌利奈唑胺耐药,耐药机制与核糖体蛋白位点突变密切相关,但仍需进一步研究证实突变位点与耐药的关系.
-
利奈唑胺及其耐药机制研究
利奈唑胺通过抑制蛋白起始复合物的形成而抑制细菌蛋白质的合成,在体内外对革兰阳性菌,如葡萄球菌、链球菌、肠球菌等耐药菌有广谱的抗菌效果,以治疗此类细菌引起的感染.但是,近年来,由于利奈唑胺广泛用于临床、以及一定程度的滥用,国内外已发现对其耐药的葡萄球菌、肠球茵等临床耐药株.其耐药机制主要由细菌单个碱基突变和甲基转移酶的产生所介导,当然,另外一些耐药机制尚不明了.目前虽然细菌耐利奈唑胺的情况并不严重,但应该引起我们足够的重视.
-
革兰阳性球菌对利奈唑胺耐药机制的研究
目的：对利奈唑胺耐药革兰阳性球菌主要耐药分子机制进行初步研究。方法采用 KB法及 E-test法对6株利奈唑胺耐药革兰阳性球菌进行药敏试验，并应用脉冲场凝胶电泳（PFGE），PCR及测序技术对菌株主要分子流行病学及耐药分子机制进行研究。结果5株柯氏葡萄球菌PFGE分为2型，对利奈唑胺 MIC介于16～64 mg／L，菌株均呈现 cfr基因阳性、L3存在双位点突变；1株粪肠球菌对利奈唑胺 MIC为8 mg／L，耐药与23SrRNA存在 G2576T点突变相关。结论利奈唑胺耐药革兰阳性球菌在临床的出现应引起广泛关注，为有效进行抗感染治疗应重视对利奈唑胺耐药菌株的临床监测。
