首页 > 文献资料
-
ARMS-PCR结合毛细管电泳可以定量检测淋巴瘤MYD88基因L265P突变
目的:研究ARMS-PCR结合毛细管电泳法对提高淋巴瘤患者MYD88基因L265P突变的检测灵敏度和定量检测突变比例的可行性.方法:采用ARMS-PCR方法对淋巴瘤患者MYD88基因进行扩增,使用ABI3730测序仪对扩增产物进行毛细管电泳检测L265P的突变比例;同时采用基因组DNA直接测序法对MYD88基因5号外显子开放阅读框区域进行双向测序.结果:经过对梯度稀释的质粒标准品的检测,ARMS-PCR结合毛细管电泳和直接测序法检测L265P突变的灵敏度分别为0.2％和5％,对184例既往淋巴瘤患者的检出率分别为13.59％和8.28％ (p ＜0.001).而前者更可以对突变比例进行定量,拟合优度(R2 =0.979)和可重复性(CV=2.86％、1.94％、5.49％)均较为理想.结论:ARMS-PCR结合毛细管电泳可以对淋巴瘤患者MYD88基因L265P突变进行定量检测,检测灵敏度显著高于传统的直接测序法,因而可作为对后者的补充,可以有效地进行早期诊断和监测微小残留.
-
髓样分化因子基因(MYD88)多态性影响中风风痰瘀阻证的血脂代谢
目的 探讨MYD88基因表达水平及其多态性与缺血性中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的发生风险及血脂水平的关联.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定MYD88基因表达水平,Sequenom MassARRAY iPLEX进行基因分型,采用HITACHI日立7600全自动生化分析仪测定血脂水平.结果 中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证患者的MYD88基因表达水平均显著低于对照组(P ＜0.001).MYD88基因的rs7744多态性与中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的易感性均无统计学关联(P ＞0.050).而在风痰瘀阻证中,rs7744多态性与LDL水平显著相关.结论 MYD88基因表达影响缺血性中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的发生,且MYD88基因rs7744多态性影响中风风痰瘀阻证的血脂代谢.
-
巨噬细胞与三株念珠菌作用后MyD88和CARD9基因表达的研究
目的:通过检测三株不同白色念珠菌作用下,巨噬细胞激活的关键下游信号传导分子CARD9 、MyD88基因表达水平以及所产生的活性氧ROS差异,探讨巨噬细胞对三株白色念珠菌杀伤能力产生差异的可能原因.方法:将骨髓来源小鼠巨噬细胞分别与三株念珠菌以1∶10的比例共培养,30 min、1h、2h和4h收集巨噬细胞,荧光定量PCR检测MyD88、CARD9基因的表达差异,采用流式细胞术检测所产生的ROS量.结果:RT-PCR结果显示,巨噬细胞与三株白色念珠菌共培养早期MyD88基因表达水平,3683组高;CARD9基因表达水平,3630组高;随着时间的增长,不同组别的MyD88基因相对表达无明显变化,而CARD9基因共培养2h相对表达量SC5314组高于3630组及3683组(P＜0.01);4 h,3683组相对表达量高于3630组、SC5314组(P＜0.01).流式细胞检测结果显示ROS荧光强度3630组＞3683组＞SC5314组(P＜0.05).结论:CARD9是白色念珠菌PAMPs与PRRs识别及产生抗念珠菌感染关键分子ROS信号通路的关键分子,其表达水平的差异有可能是导致巨噬细胞对不同念珠菌杀伤能力产生差异的机制之一.
-
MYD88基因多态性与缺血性中风风痰瘀阻证患者MRI表现的相关性研究
目的 探讨MYD88(髓样分化因子)基因多态性位点rs7744与缺血性中风风痰瘀阻证MRI表现的相关性.方法 收集缺血性中风风痰瘀阻证患者631例作为研究对象,进行头颅核磁影像检查采集病变部位、病灶大小、数目、对周围组织影响等信息,采用Sequenom MassARRAY技术对MYD88基因单核苷酸多态性位点(SNP)rs7744进行基因分型检测.使用PLINK软件进行相关统计分析.结果 ①MYD88基因多态性位点rs7744不同基因型携带者与发病部位在脑叶、放射冠、丘脑及小脑均无统计学关联(均P ＞0.05);与基底节区有统计学关联(均P＜0.05);与脑干有统计学关联(加性模型、隐性模型、等位基因模型均P ＜0.05).②MYD88基因多态性位点rs7744不同基因型携带者与发生大梗死、小梗死无统计学关联(均P＞0.05);与中梗死有统计学关联(加性模型、显性模型、等位基因模型均P＜0.05).③MYD88基因多态性位点rs7744不同基因型携带者与病灶多发以及病灶对周围组织影响无统计学关联(均P＞0.05).结论 MYD88基因位点rs7744多态性与缺血性中风风痰瘀阻证的发生相关,与MRI成像显示病灶发生在基底节区、脑干有统计学关联,与发生中梗死有统计学关联.
