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龟板、黄芪、丹参和党参诱导K562细胞合成γ珠蛋白的实验研究
本研究探讨龟板、黄芪、丹参和党参对K562细胞γ-珠蛋白合成的影响.以K562细胞为体外模型,用联苯胺染色方法确定龟板、黄芪、丹参及党参4种中药诱导K562细胞血红蛋白表达的剂量效应和时间效应,并用Western blot技术检测血红蛋白F(α2γ2)水平.结果表明:龟板、黄芪、丹参和党参作用于K562细胞6天,联苯胺染色阳性率高分别可达23.5%、19.8%、15.8%和14.5%;Western blot检测显示血红蛋白F表达增加.结论:龟板、黄芪、丹参及党参在体外可诱导K562细胞γ珠蛋白的合成水平增高,从而使血红蛋白F增加.4种中药具有与阳性对照丁酸钠相似的诱导γ珠蛋白合成增加的作用.
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黄芪的含药血清诱导K562细胞表达Gγ-mRNA和合成HbF
目的 研究黄芪对K562细胞的Gγ-珠蛋白基因表达的作用.方法 以K562细胞为体外模型,用联苯胺染色方法来确定黄芪的含药血清诱导K562细胞向红系分化的作用;用RT-PCR方法研究黄芪的含药血清诱导K562细胞Gγ-珠蛋白mRNA的表达;用Western Blot方法研究黄芪的含药血清诱导K562细胞HbF的合成.结果 黄芪的含药血清作用于K562细胞5d后联苯胺染色阳性率达19.8%;同时伴有Gγ-珠蛋白mRNA的表达的增加(高可达3.6倍)和HbF的合成的增加,与丁酸钠组比较,黄芪组诱导K562细胞Gγ-珠蛋白基因mRNA的表达可以持续3～5d,而丁酸钠组只有1d.结论 黄芪有望成为一种有效的γ蛋白基因诱导剂.
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2012至2016年广西血红蛋白组分室间质量评价结果的回顾性分析
目的 评价实验室对血红蛋白组分中血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白F(HbF)的检测能力.方法 2012至2016年每年进行2次有关HbA2和HbF的室间质量评价,每次评价5个样本;按室间质量评价流程要求,各实验室在规定时间内检测样本并上传检测结果,依据回报结果统计各检测系统5年的使用分布情况、各实验室的合格率,计算并分析各检测系统、各检测方法的离散程度及不同浓度水平质控品检测结果变异情况.结果 2016年,高效液相色谱法(HPLC)和毛细管电泳法(CE)使用率分别提高至46.1％ (82/178)、18.0％(32/178);2012至2016年,HbA2和HbF合格率由51.5％(34/66)、60.6％(40/66)分别提高至93.3％ (166/178)、92.1％ (164/178);各检测系统的平均变异系数(CV)逐年缩小;Bio-Rad VariantⅡ和Sebia CAPILLARYS 2检测系统高、中、低值HbA2质控品检测结果平均CV较好,可控制在6.0％内;HPLC和CE可定量分析HbA2和HbF指标,总体检测能力优于琼脂糖凝胶电泳法.结论 通过室间质量评价考核实验室检测HbA2和HbF能力,量化HbA2和HbF指标,为地中海贫血筛查和防治工作提供质量保证与数据支持.
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HbA2和HbF检测在儿童 β-地贫筛查中的价值分析
目的 探究HbA2和HbF检测在儿童β-地中海贫血筛查中的诊断效能.方法 选择2015年6月至2017年6月间就诊并明确诊断的68例β-地中海贫血和缺铁性贫血患儿,并选择68例健康体检儿童作为对照组,比较3组患儿血常规相关指标、红细胞脆性实验(EF)、HbA2和HbF水平的差异,应用受试者工作曲线评价有差异指标单独和联合诊断β-地贫的诊断效能,并使用约登指数探究佳截点.结果 β地贫组患儿的MCV明显低于IDA组(P<0.05),两组的RBC、Hb和MCH水平不存在明显差异(P>0.05);β地贫组EF明显低于对照组和IDA组,HbA2和HbF明显高于对照组和IDA组(P<0.05).ROC曲线显示,HbA2(AUC=0.944)和HbF(AUC=0.937)单独诊断的效能明显高于MCV(AUC=0.635)和EF(AUC=0.856);HbA2和HbF联合诊断(AUC=0.986)的效能明显高于单独诊断.约登指数显示,HbA2≥3.59％,HbF≥0.98％为联合诊断的佳截点.结论 在儿童β-地中海贫血筛查中应用HbA2和HbF联合检测具有较高的诊断效能,其佳截点为HbA2≥3.59％,HbF≥0.98％.
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脐血红细胞参数联合Hb电泳在β-地中海贫血中的诊断价值
目的 探讨新生儿脐血红细胞参数及血红蛋白(Hb)电泳联合检测对β地中海贫血的诊断价值.方法 选取新生儿β-地中海贫血患者508例,正常对照508名,对全部脐血样本进行β-地贫基因型、血液常规分析和血红蛋白电泳分析.用ROC曲线评价脐血各项指标或联合检测对β地中海贫血的诊断价值.结果 疾病组红细胞平均容量(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、糖化血红蛋白(HbA)均低于正常对照组,血红蛋白F(HbF)高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血液学单项指标诊断β-地中海贫血的ROC曲线下面积(AUC-ROC)由高到低依次为HbA(0.91)、HbF(0.90)、MCH(0.65)、MCV(0.61)和MCHC(0.53).MCH、HbF、HbA联合诊断β地中海贫血的AUC-ROC为0.93(95%CI:0.91~0.95),优于任一单项指标(P<0.05).结论 应用MCH、HbF联合HbA检测对β-地中海贫血有较高的诊断价值.
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贵阳地区育龄人群HbA2和HbF参考范围的研究
目的:探讨贵阳地区育龄人群血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白F(HbF)的参考范围.方法:采用毛细管电泳技术,对497例孕妇(正常孕妇组)、180例育龄期男性(正常男性组)和155例育龄期未孕女性(正常女性组)的血红蛋白进行测定,比较各组HbA2和HbF的检测结果和参考范围.结果:整体HbA2均值为(2.70±0.21)％,HbF中位数与四分位间距为0(0.3％),参考范围分别为2.3％ ～3.1％和＜0.9％;正常男性组和正常孕妇组的HbA2的平均值分别为(2.70±0.23)％和(2.70±0.19)％,显著高于正常女性组的(2.63±0.21)％(P＜0.01),参考范围分别为2.3％ ～ 3.2％、2.3％ ～3.1％和2.2％～3.0％;正常男性组、正常女性组和正常孕妇组间的HbF分布差异有统计学意义(P＜0.01),参考范围分别为＜0.5％、＜1.1％和＜1.0％.结论:贵阳地区育龄人群的HbA2和HbF数值受到性别及妊娠状态的影响.
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HbF变异体对三种不同HbA1c检测系统的干扰评价
目的 评价血红蛋白变异体F(HbF)对三种糖化血红蛋白(HbA1c)检测系统测定结果的干扰.三种方法分别为离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、硼酸盐亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)和免疫抑制比浊法.方法 分别用三种检测系统检测血红蛋白结构正常标本及含有胎儿血红蛋白(HbF)的标本,依据美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NG-SP)的判定标准,对检测结果进行比对分析和偏倚评估.结果 以Primus Ultra2(AC-HPLC)为比较系统,IE-HPLC和免疫比浊法为检测系统,两种检测系统与比较系统检测正常样品HbA1c值的相关性良好.当HbF≤8.75％时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差＜6％;HbF为17.50％时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差＞6％;当HbF浓度达35.00％～70.00％时IE-HPLC无法检测出结果.免疫比浊法测定不同HbF浓度HbA1c值与比较系统偏差均＜6％,测试几乎不受HbF的干扰.结论 HbF对不同HbAlc检测系统的干扰程度不同,临床实验室在进行HbA1c检测时,应注意血红蛋白变异体的存在,必要时选用替代指标或者合适的方法进行HbA1c测定以防止干扰的发生.
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2014～2017年我国临床实验室HbA2和HbF检测室内质控变异系数分析
目的 了解2014～2017年我国临床实验室血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白F(HbF)检测室内质控情况.方法 收集2014～2017年参加卫生部临床检验中心室间质评参评单位回报的室内质控信息,将变异系数与1/3TEa(6.67％)和1/4TEa(5％)标准进行比较,得到满足各标准实验室的比例,进而分析我国HbA2和HbF检测的室内质控情况.按照实验室使用的仪器不同进行分组,分别计算2017年H bA2和HbF不同仪器组在两种标准下的变异系数通过率.结果 HbA2项目84％以上的实验室精密度都能达到1/3TEa的标准,达到1/4TEa标准的实验室比例略有降低(70.83％～84.47％).HbF项目的结果除2015年外,当月和累积在控变异系数80％以上的实验室能达到1/3TEa标准,达到1/4TEa标准的实验室比例分布在68.42％～85.07％.2017年数据按仪器分组统计中,两个项目sebia capillarys 2仪器组和全自动血红蛋白分析仪伯乐Variant Ⅱ仪器组在两种标准下的变异系数通过率均达85％以上,精密度较好.结论 目前我国实验室HbA2和HbF检测的不精密度水平需进一步提高,尤其是HbF,实验室应继续加强室内质量控制,建立严格的室内质控制度,提高检测水平.
关键词： 血红蛋白A2 血红蛋白F 室内质控 变异系数 珠蛋白生成障碍性贫血 -
血红蛋白A2和F的室间质量评价结果分析
目的：评价中国部分珠蛋白生成障碍性贫血筛查实验室检测血红蛋白 A2和 F 的水平和现状。方法向50家珠蛋白生成障碍性贫血实验室发放两个批号的质控品，收集实验室回报的 HbA2和 HbF 检测值，对回报的结果按照方法分组进行统计分析，并评价其检测水平。结果49家实验室回报了检测结果，回报率为98％。HbA2的及格率为42.9％～92.3％，HbF 的及格率为27.3％～84.6％。通过稳健 Z 比分数统计，血红蛋白 HbA2项目201311批号样本有3家实验室检测结果为不满意，201312批号样本有4家实验室检测结果为不满意，血红蛋白 HbF 项目201311批号样本有5家实验室检测结果为不满意，201312批号样本有3家实验室检测结果为不满意。结论我国珠蛋白生成障碍性贫血筛查实验室检测 HbA2和 HbF 质量有待进一步提高。
