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线性扩增介导的PCR文献资料
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实时PCR定量分析体内基因转染效率的可行性
为了探索实时PCR技术评价基因转染效率的可行性,利用克隆PCR检测逆转录病毒载体介导的neo基因导入原代成肌细胞的转染效率,同时行实时PCR检测,对二者结果进行对比分析;利用线性扩增介导的PCR(LAM-PCR)技术和逆转录病毒5′LTR插入细胞基因组位点的分析,确定单细胞内基因转染的拷贝数.结果显示:①在低转染率的情况下(<36%)二者的结果相近,但是在高转染率情况下二者的结果差别明显; ②逆转录病毒载体介导的转染,在原代成肌细胞中为单拷贝基因导入基因组内.结论:实时PCR可以比较精确地估计体内病毒载体介导的基因转染效率;而在体外由于多为高转染率,不适合用此方法进行检测.
