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小鼠视网膜激光损伤早期组织功能学变化与单核细胞趋化蛋白动态表达关系的研究
目的 观察小鼠视网膜激光损伤后早期组织功能变化及单核细胞趋化蛋白(MCP-1)表达水平,初步探讨两者之间的关系.方法 116只C57BL/6小鼠随机分为正常组、激光损伤组,均为58只.采用激光光凝方式建立视网膜激光损伤模型.分别于激光光凝后1、3、7d行视网膜电图(ERG)检查.激光光凝后1、3、7d分别处死正常组、激光损伤组小鼠并摘除眼球.行苏木精-伊红染色观察视网膜组织形态变化,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测各组小鼠视网膜中MCP-1的基因相对表达情况,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测视网膜中MCP-1的蛋白表达情况.结果 光学显微镜观察结果显示,随激光损伤时间延长,视网膜组织结构损伤进行性加重.ERG检测结果显示,激光损伤后1、3、7d,正常组、激光损伤组小鼠暗适应a(t=6.998、9.594、13.778)、b波(t=12.089、13.310、21.989)振幅比较,差异有统计学意义(P=0.000).激光损伤后1d,正常组、激光损伤组明适应a波振幅比较,差异无统计学意义(t=2.659,P=0.200),b波振幅比较,差异有统计学意义(t=8.844,P=0.000);3、7d,明适应a(t=3.076、7.544)、b波(t=10.418、8.485)振幅比较,差异均有统计学意义(P=0.000).激光损伤后1、3 d(t=3.773)及1、7d(t=5.070)暗适应a波振幅比较,差异有统计学意义(P＜0.01),3、7d比较,差异无统计学意义(t=1.297,P=0.660);b波振幅,1、7d比较,差异有统计学意义(t=4.762,P=0.000);1、3 d(t=2.236)及3、7 d(t=2.526)比较,差异无统计学意义(P=0.120、0.060).明适应a波振幅,1、7d比较,差异有统计学意义(t=2.991,P=0.020);1、3 d(t=0.516)及3、7 d(t=2.475)比较,差异均无统计学意义(P=1.000、0.710);b波振幅,1、3 d(t=3.570)及1、7 d(t=4.989)比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),3、7d比较,差异无统计学意义(t=1.419,P=0.070).实时定量PCR检测结果显示,激光损伤后1、3、7d,激光损伤组MCP-1基因相对表达量与正常组比较,差异均有统计学意义(t=14.329、16.861、5.743,P＜0.05).Western blot检测结果显示,激光损伤后1、3、7d,激光损伤组MCP-1蛋白相对表达量与正常组比较,差异均有统计学意义(t=75.068、54.145、14.653,P＜0.05).结论 小鼠视网膜激光损伤后7d内,视网膜组织结构和功能损害进行性加重,且程度与MCP-1表达相关.
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单核细胞趋化蛋白在视网膜疾病中的表达和作用
单核细胞趋化蛋白(MCP-1)属于趋化因子CC亚家族,眼部主要表达于视网膜色素上皮(RPE)细胞、光感受器细胞和小胶质细胞.生理状态下适量分泌MCP-1有助于维持RPE细胞和胶质细胞的形态,保证视网膜发挥正常功能.病理状态下RPE细胞、光感受器细胞和小胶质细胞中MCP-1表达明显上升,募集单核-巨噬细胞向炎症部位迁移,促进小胶质细胞活化,在损伤部位吞噬细胞碎片.在视网膜脱离、糖尿病视网膜病变、后部葡萄膜炎和老年性黄斑变性患者眼内液及动物模型的视网膜中,均发现有MCP-1过度表达,且其表达程度与视网膜炎症严重程度密切相关.因此,MCP-1被认为是体现视网膜炎症程度为客观的指标之一,可作为判断视网膜疾病活动性指标并有望成为视网膜疾病治疗的新靶点.
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单核细胞趋化蛋白-1在增生型糖尿病视网膜病变患者玻璃体中的表达
研究表明,炎症反应与糖尿病视网膜病变(DR)的发病机制密切相关[1].趋化因子是炎症反应的重要因子,可以诱导炎性细胞发生迁移聚集,在炎症性疾病的发生发展中起重要作用.单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是单核细胞及巨噬细胞的强激活剂,能使大约30％的单核细胞发生迁移[2,3].为了进一步探讨MCP-1与DR发生发展的关系,我们观察了一组增生型DR(PDR)患者玻璃体中MCP-1的表达.现将结果报道如下.
关键词： 糖尿病视网膜病变/病理生理学 趋化因子CCL2 单核细胞 -
视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿患者房水中血管活性分子的表达分析
目的 观察视网膜中央静脉阻塞(CRVO)黄斑水肿患者房水中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-6(IL-6)和巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达水平.方法 未经治疗的CRVO继发黄斑水肿患者连续病例40例40只眼纳入研究.其中,男性25例,女性15例;年龄38～76岁.均为初次就诊,既往无治疗史.选择同期单纯白内障行超声乳化白内障吸除手术患者20例20只眼作为对照组.其中,男性10例10只眼,女性10例10只眼.酶联免疫吸附试验测定两组患者房水中VEGF16.、VEGF165b、IL-6和MCP-1的含量;相关性分析VEGF165与IL-6、MCP-1之间的相关性.结果 CRVO组患者房水中VEGF165、IL-6、MCP-1含量中位数分别为1 089.0、165.6、1 253.0 pg/ml;对照组患者各相应检测指标含量中位数分别为168.2、4.7、216.4 pg/ml.CRVO组患者房水中VEGF165、IL-6、MCP-1含量较对照组明显升高,差异均有统计学意义(Z=-4.549、-6.008、-5.343,P＜0.001).CRVO组、对照组患者房水中VEGF165b含量分别为834.0、915.9 pg/ml,差异无统计学意义(Z=-0.207,P＞0.05).CRVO组患者VEGF165 b/VEGF165比值为2.71,对照组患者相应比值为7.28,二者比较,差异有统计学意义(t=-3.007,P＜0.05).相关性分析结果显示,CRVO组患者IL-6与VEGF165呈高度正相关(r=0.526,P=0.001);对照组患者IL-6与VEGF165亦呈正相关趋势(r=0.425,P=0.070).两组患者中MCP-1与VEGF165均未见相关趋势(CRVO组:r=0.211,P＞0.05;对照组:r=-0.019,P＞0.05).结论 CRVO继发黄斑水肿患者房水中VEGF165、IL-6和MCP-1表达量增高,VEGF165b表达量无明显变化,VEGF165b/VEGF165比值降低.
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STEMI患者残余血小板聚集率与趋化因子CCL2的相关性
目的 观察和分析急性ST抬高型心肌梗死(STEMI)患者服用氯吡格雷后4～6h的残余血小板聚集率(RPA)和血浆中趋化因子CCL2表达之间的关系.方法 入选STEMI患者107例.入院时均给予氯吡格雷600 mg,阿司匹林300 mg,在服用药物后4～6h抽取静脉血,用光比浊法(TPA)检测ADP诱导的RPA,ELISA检测血浆中CCL2浓度.依据RPA检测结果分为2组:RPA≥59％为残余血小板高反应组(高反应组,n=51),RPA＜ 59％为残余血小板正常反应组(正常反应组,n =56).详细收集两组患者临床数据和血液生化检测资料.结果 两组间在年龄、性别、吸烟史、高血压病、糖尿病、空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和脑钠尿肽(BNP)等方面均无明显的统计学差异.STEMI患者RPA与血浆CCL2浓度之间存在线性关系(r =0.427,P＜0.01).高反应组患者血浆CCL2浓度为(243±80)ng/L,正常反应组患者血浆CCL2浓度为(171±44) ng/L,两组间存在显著的统计学差异(P＜0.01).高反应组中肌钙蛋白T(TnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)显著高于正常组[(3.1±2.3) U/Lvs.(2.3±1.4) U/L;(198±16) μg/L vs.(151±13) μg/L,均P＜0.05].结论 STEMI患者残余血小板聚集率与趋化因子CCL2有相关性.
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小鼠黑质内注射趋化因子CCL2损伤黑质多巴胺能神经元的研究
目的:探讨趋化因子CCL2(Chemokine C-C motif Ligand 2)对小鼠黑质多巴胺能神经元的损伤.方法:将CCL2单次注射入C57 BL/6J小鼠黑质部位,在注射前和注射后的各个时间点分别记录小鼠的行为轨迹,并将注射后不同时间点的小鼠灌注固定取脑,通过免疫组织化学方法检测黑质多巴胺能神经元的数量变化.结果:免疫组化检测显示在CCL2注射后21 d开始黑质多巴胺能神经元的数量明显减少,并显著低于对照组,一直持续到注射后28 d;并且在注射后28 d时小鼠的运动速度显著低于对照组.结论:脑内注射CCL2可以损伤小鼠黑质多巴胺能神经元.
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IL-6及MCP-1水平与妊娠期糖尿病的相关性
目的 测定妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清及胎盘组织中白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,探讨IL-6、MCP 1与GDM的关系.方法 选择孕早期在我院确诊妊娠并定期产检孕妇,孕24～28周根据糖耐量结果分为GDM组与正常妊娠组(NGT组).分别检测两组孕妇妊娠中期(孕24～28周)及妊娠晚期(孕38～40周)血清中IL-6、MCP-1水平及分娩后胎盘组织中IL-6、MCP-1水平.结果 妊娠中期GDM组血清中IL-6和MCP-1的水平明显高于NGT组(t=80.09、34.34,P＜0.05).妊娠晚期GDM组血清中IL-6和MCP-1的水平明显高于NGT组(t=44.00、28.76,P＜0.05).GDM组胎盘组织中IL 6和MCP-1的表达水平明显高于NGT组(t=65.34、174.82,P＜0.05).结论 与正常妊娠孕妇相比,GDM孕妇血清及胎盘组织中IL-6、MCP-1水平均明显升高,IL6和MCP-1在GDM的发病中可能起重要作用.
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牙周炎伴糖尿病病人龈沟液中炎症因子MCP-1、 TNF-α、IL-6的水平及其临床意义
目的 探讨牙周炎伴2型糖尿病病人龈沟液中炎症因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平及其临床意义.方法 选取研究对象159例,其中牙周炎伴2型糖尿病组(B组)46例,2型糖尿病组(C组)40例,单纯牙周炎组(D组)34例和健康对照组(A组)39例,收集研究对象的龈沟液,应用ELISA法检测所有龈沟液中MCP-1、TNF-α 和IL-6的水平.并采用析因设计方差分析分析牙周炎与2型糖尿病的相互影响.结果 B、C和D组龈沟液中MCP-1、TNF-α 和IL-6浓度均明显高于A组,差异均有统计学意义(F=480.860～2303.362、P<0.05).进一步分析糖尿病和牙周炎的单独效应,结果显示,牙周炎可单独引起MCP-1、TNF-α 、IL-6的升高,糖尿病可协同牙周炎引起3种炎症因子的升高.结论 2型糖尿病与牙周炎间相互促进,两者并发易使牙周炎病人症状加重.
