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切割活性文献资料
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乙肝病毒特异性核酶的构建及体外切割活性的初步研究
设计针对HBV复制中间体mRNA的核酶,用于抗病毒治疗是国内外的一个研究方向.利用重组PCR技术合成了核酸基因(简称RZ),并克隆于T7启动子下游,进行了体外转录及切割活性的研究.
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丙型肝炎病毒特异性核酶细胞内切割活性的研究
设计合成针对丙型肝炎病毒(HCV)核心区基因(第384-386nt)的锤头状核酶(Ribozyme,Rz),从丙型肝炎病人的血清中提取HCV RNA,经RT-PCR扩增HCV基因片段(412bp),作为核酶的靶序列,将核酶基因和HCV靶基因片段分别克隆人反转录病毒载体pLXN中构建重组载体,并用电击法分别转入包装细胞PA317中,将上述两种转细胞释放到培养液中的含Rz的假病毒颗粒和含HCV靶基因的假病毒颗粒混合后,共同感染空白的PA317细胞,被感染细胞维持液的RT-PCR结果表明,无HCV靶基因产物即无靶基因的假病毒颗粒释放至维持液中,证明Rz在细胞内有切割HCV靶RNA的活性.
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靶向低氧诱导因子-1α mRNA核酶基因表达载体的构建及在真核细胞中的表达
我们通过本实验构建转录因子低氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体,研究其在真核细胞内的表达及切割活性.
