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NK细胞影响T细胞向腺病毒感染的小鼠肝脏聚集的研究
目的使用腺病毒感染的小鼠模型研究NK细胞向肝脏聚集过程中的作用机制. 方法应用抗NK1.1+单克隆抗体来剔除小鼠体内的NK细胞,使用FACS分析腺病毒感染的小鼠模型中肝脏的浸润淋巴细胞,应用RT-PCR检测小鼠肝组织、肝浸润淋巴细胞和脾组织中的趋化因子及其受体的基因表达,同时测定血清ALT来估价肝损伤. 结果抗NK1.1+单克隆抗体明显干扰了腺病毒感染小鼠模型中的T细胞向肝脏的聚集,抑制了趋化因子IP-10 mRNA的表达.同时,与未给予抗NK1.1+单克隆抗体的小鼠腺病毒感染模型相比较,其肝脏受损也明显减轻.IP-10的特异性受体 CXCR3 mRNA的表达先后分别出现在腺病毒感染后的脾脏和肝脏浸润淋巴细胞中. 结论 NK细胞在T细胞向腺病毒感染的肝脏聚集过程中起着关键的作用,这种作用可能与依赖NK细胞的趋化因子IP-10密切相关.
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磷酸二酯酶5抑制剂促进大鼠脑缺血再灌注后神经及血管再生的研究
目的 探讨磷酸二酯酶5抑制剂西地那非对大鼠脑缺血再灌注后海马神经前体细胞标记物微管相关蛋白增殖及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法 雄性SD大鼠75只,随机分为假手术组5只,局灶性脑缺血再灌注组(单纯缺血组)35只及局灶性脑缺血+西地那非组(西地那非组)35只.西地那非组在大脑中动脉局灶缺血模型再灌注后2h喂服西地那非3d.单纯缺血组和西地那非组在术后2h、1d、3d、5d、7d、10d和14d检测神经功能缺损评分.免疫组织化学方法检测各时间点海马神经前体细胞标记物微管相关蛋白阳性细胞及梗死灶周围VEGF的吸光度值.结果 假手术组几乎无微管相关蛋白表达.与单纯缺血组比较,西地那非组7d、10 d、14 d神经功能缺损评分明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);西地那非组5d、7d、10d、14 d微管相关蛋白明显高于单纯缺血组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);西地那非组3d、5d、7d、10d VEGF明显高于单纯缺血组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 西地那非能够促进大鼠脑缺血再灌注后急性期神经及血管再生,改善神经功能.
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淫羊藿苷药理作用的分子机制研究进展
淫羊藿苷是补肾要药淫羊藿的主要药效成分之一,具有抗神经元损伤、促神经突触生长、促成骨、抗炎症、抗肿瘤、提高性功能和抗抑郁等作用.为了解淫羊藿苷发挥药理效应的分子机制,本文检索了1995年1月1日至2011年5月1日PubMed数据库中收录的题目中含“icariin”的文献共122篇,发现淫羊藿苷可通过影响丝裂原活化蛋白激酶/p38信号通路和磷脂酰肌醇3激酶/Akt信号通路,作为磷酸二酯酶5抑制剂和核受体调节剂发挥作用.本文还进一步分析了研究淫羊藿苷分子机制的主要方向.
关键词： 淫羊藿苷 MAP激酶2信号系统 信号转导 环核苷酸磷酸二酯酶类 5型 磷酸二酯酶抑制剂 受体 类固醇 综述 -
磷酸二酯酶5抑制剂治疗下尿路症状的机制
磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂是治疗男性勃起功能障碍(ED)的主要药物,其作用机制是通过抑制PDE5对环磷酸鸟苷(cGMP)的降解,延长阴茎海绵体平滑肌细胞的舒张时间,维持阴茎勃起.随着研究的深入,人们发现ED与下尿路症状(LUTS)具有许多共同的通路或机制,且极为普遍地存在于老年男性中.因此应用PDE5抑制剂治疗LUTS的作用已受到关注.本文将对PDE5抑制剂(西地那非、伐地那非、他达那非)治疗LUTS的作用机制及临床应用作一综述.
关键词： 环核苷酸磷酸二酯酶类 5型 下尿路症状 -
大鼠脂肪源性干细胞PDE5基因沉默对肾小管上皮细胞缺血-复氧损伤的保护作用
目的 探讨慢病毒介导抑制脂肪源性干细胞(adipose?derived stem cells,ADSCs)磷酸二酯酶5(phosphodiesterase 5,PDE5)基因表达对缺血?复氧(ischemia/reoxygenation,I/R)损伤的大鼠肾小管上皮细胞(NRK?52E)增殖和凋亡的影响,以及ADSCs自身分泌功能和上皮转化功能的改变. 方法 分离纯化大鼠ADSCs ,传代培养及鉴定;构建PDE5?shRNA慢病毒表达载体及阴性对照(NCshRNA),采用慢病毒包装系统介导建立稳定PDE5低表达的ADSCs , Western印迹法检测PDE5蛋白表达;建立肾小管上皮细胞体外I/R模型,并建立ADSCs和NRK?52E细胞的Transwell非接触共培养体系;Edu法检测各组NRK?52E细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡;ELISA法检测各组上清中肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)水平;实时荧光定量PCR法检测E钙黏蛋白(E?cadherin)mRNA表达,流式细胞仪检测细胞角蛋白18(Cytokeratin 18 ,CK18)的表达. 结果 成功构建PDE5?shRNA慢病毒表达载体,筛选并成功建立PDE5稳定低表达的ADSCs细胞系;与正常对照组相比较,I/R组NRK?52E细胞增殖率受到显著抑制,总凋亡率明显增加(P<0.05),ADSCs共培养上清液中HGF及FGF水平升高(均P<0.05);而与阴性对照组相比,与PDE5?shRNA转染组ADSCs共培养的NRK?52E细胞增殖显著增加,凋亡率明显下降,且HGF、FGF水平进一步升高,ADSCs上皮细胞标志物E?cadherin及CK18均表达显著增加,以上差异均有统计学意义(均P<0.05). 结论 本研究应用慢病毒载体介导ADSCs稳定低表达PDE5 ,可能通过促进干细胞分泌多种生长因子,有效改善肾小管细胞I/R状态下增殖及凋亡,同时促进自身向上皮细胞分化,为干细胞体内移植治疗肾脏缺血再灌注损伤中增加肾小管上皮细胞的生存活力、提升干细胞治疗效能提供了初步的实验基础.
关键词： 环核苷酸磷酸二酯酶类 5型 再灌注损伤 干细胞
