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人脐血单个核细胞局部移植治疗坏死溃疡期巨大压疮的护理
目的 探讨人脐血单个核细胞局部移植治疗坏死溃疡期巨大压疮的临床治疗效果和护理要点.方法 坏死溃疡期巨大压疮的患者,常规综合治疗1个月伤口不能愈合,采用脐血单个核细胞局部移植治疗,按压疮一般护理结合干细胞移植术的特点进行护理.结果 局部血液循环改善,肉芽组织生长迅速,5周左右压疮痊愈.结论 对于综合治疗和护理无效的坏死溃疡期巨大压疮患者,人脐血单个核细胞局部移植治疗是简单、安全、有效的方法.恰当的心理护理,术前准备充分、术中密切配合,术后加强基础护理、正确处理创面,可以保证治疗的效果.
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人脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞移植用于大鼠脊髓损伤的实验研究
目的:探讨人脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞(MSCs)移植对脊髓损伤功能恢复的影响,寻找一种更适合治疗脊髓损伤的细胞源.方法:采集新鲜人脐带血和脐带,分离培养单个核细胞和MSCs.将脊髓损伤模型随机分成3组:单个核细胞移植组、MSCs移植组和低糖必需培养基(L-DMEM)培养组.采用免疫组化和免疫荧光检测细胞移植后1-4周细胞在脊髓内的存活情况和迁移情况,使用BBB行为学评分评估大鼠脊髓功能恢复情况.结果:L-DMEM培养液组在术后各时间点观察评分无明显差异,而细胞移植组脊髓功能处于逐渐恢复过程,与LDMEM培养液比较,差异有显著性意义.单个核细胞移植组对损伤脊髓功能的修复作用较MSCs移植组显著,且差异有显著性意义.结论:与MSCs相比较,人脐血单个核细胞更适合作为治疗脊髓损伤的细胞源.
关键词： 人脐血单个核细胞 人脐带间充质干细胞s 移植 脊髓损伤 -
人脐血单个核细胞移植治疗急性一氧化碳中毒后迟发脑病1年随访
背景:研究报道在特定的体内外环境下,脐血间充质干细胞能够诱导分化成为包括神经干细胞在内的多种组织细胞.目的:评价人脐血单个核细胞经腰穿途径移植后治疗急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的疗效及安全性.方法:一氧化碳中毒后迟发性脑病患者60例随机分为2组.对照组给予高压氧及药物治疗;治疗组采用鞘内注射法将经密度梯度离心法分离出的人脐血单个核细胞移植到一氧化碳中毒性脑病患者的蛛网膜下腔,余治疗方法同对照组.分别于人脐血单个核细胞移植前、移植后3,9,12个月对患者进行简易精神状态检查法、改良Asworth肌肉痉挛程度分级及日常生活量表评分检查;比较两组患者MRI变化;同时对随诊患者行胸片、心电图及血生化检查,客观评价人脐血单个核细胞移植的安全性.结果与结论:人脐血单个核细胞移植3,9,12个月,治疗组Asworth肌肉痉挛程度分级评分均显著低于对照组(P=0.032);移植后9,12个月简易智力状况检查法及日常生活量表评分均显著高于对照组(P＜0.05);两组患者神经功能在各时间点的变化趋势相似.人脐血单个核细胞移植后12个月MRI检查结果显示,治疗组患者MRI改善程度较对照组明显.提示鞘内注射移植人脐血单个核细胞治疗一氧化碳中毒后迟发脑病疗效优于高压氧治疗.
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人脐血单个核细胞多次静脉移植家兔急性心肌梗死后的胶原重构
背景:以往干细胞移植治疗心肌梗死的研究,均为单次经静脉或冠脉注射移植.目的:进一步验证人脐血单个核细胞多次静脉移植对家兔急性心肌梗死胶原重构及心功能影响.方法:取家兔45只结扎冠脉左前降支制备急性心肌梗死模型,随机分为3组,①多次移植组:造模后7,9,11,13 d经耳缘静脉注入BrdU标记人脐血单个核细胞生理盐水.②单次移植组:造模后7 d注入BrdU标记人脐血单个核细胞生理盐水,9,11,13 d注入生理盐水.③心梗对照组:仅注入生理盐水.另取家兔5只为假手术组.结果与结论:与对照组相比,两移植组心功能左室短轴缩短率、左室射血分数明显升高(P < 0.05);且多次移植组改善效果优于单次移植组(P < 0.05);免疫组织化学显示两移植组造模后2,4周心梗周边区均存在BrdU阳性细胞,但多次移植组BrdU阳性细胞计数多于单次移植组;改良Masson's染色显示与假手术组比较,对照组梗死区及非梗死区胶原密度显著增加,梗死区域胶原纤维部分融合,排列较紊乱,心肌基本组织结构破坏;与对照组比较,两移植组造模后2,4周梗死周边区域心肌细胞间胶原含量、胶原纤维明显减少,胶原纤维排列较为有序;与单次细胞移植组比较,多次细胞移植组进一步改善.提示多次静脉移植脐血单个核细胞改善急性心肌梗死心功能、阻抑心肌胶原纤维重构疗效优于单次静脉移植.
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人脐血单个核细胞促进脊髓损伤后的轴突再生
[目的] 讨论人脐血单个核细胞(human cord blood mononuclear cells,HCMNCs)移植治疗大鼠脊髓损伤后损伤区域轴突再生情况和功能恢复.[方法] 利用 Impactor Model Ⅱ打击器制成30例T10脊髓损伤模型,分组为:实验对照组(DMEM细胞培养基),损伤后3 d HCMNCs移植组,损伤后14 d HCMNCs移植组,每组10例.以HE染色和免疫组化染色以及BDA顺行示踪染色观察脊髓损伤处轴突再生情况,结合对各组实验动物脊髓损伤后肢体功能的恢复情况进行行为学评分(BBB 评分),综合评估脊髓功能恢复程度.[结果] 与对照组比较,HCMNCs移植治疗能够明显促进神经轴突再生,改善功能恢复,损伤后14 d HCMNCs移植组优于损伤后3 d移植组,各组间疗效差异具有统计学意义(P<0.01).[结论] HCMNCs在体内向神经元及神经胶质细胞分化,促进神经轴突再生和功能恢复.损伤后14 d是移植的较为理想的时间.
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人脐血单个核细胞对大鼠腓肠肌失神经损伤的治疗作用
目的 制备大鼠坐骨神经离断后的腓肠肌萎缩模型,研究人脐血单个核细胞(CB-MNCs)肌肉多点注射对损伤的治疗效果.方法 采集并制备新鲜人CB-MNCs;将30只4～6周龄Wistar大鼠随机分为正常对照组(Normal组,n=10)、CB-MNCs治疗组(Therapy组,n=10)和生理盐水治疗组(NS组,n=10),Therapy组和NS组大鼠离断坐骨神经,建立腓肠肌萎缩模型;在造模后第7天、第14天和第21天,分3次将CB-MNCs或等体积生理盐水多点注射到腓肠肌损伤局部,观察大鼠行动能力改变和足弓坏疽发展情况,并于第28天取样测定腓肠肌湿重比、肌肉横截面积,以及血液和腓肠肌中氧化应激相关指标、炎性因子水平和凋亡相关基因的表达,观察肌肉组织中血管内皮生长因子-α(VEGF-α)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌营养不良蛋白(Dystrophin)的表达变化.结果 Therapy组大鼠足部坏疽面积和水肿程度明显比NS组减轻(P=0.002),而且Therapy组中腓肠肌湿重比较NS组升高(P<0.001);病理切片显示,Normal组、NS组和Therapy组肌肉横截面积分别为(12452.0±202.8)、(6287.0±142.2)和(8193.0±115.5)μm2,差异有统计学意义(P<0.001).与NS组相比,Therapy组血清和肌肉肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量明显降低,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量明显增高(P<0.001).Therapy组较NS组半胱天冬酶-3(Caspase-3)、促凋亡基因Bax、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达量降低,抑凋亡基因Bcl-2、白细胞介素-10(IL-10)、α-actin、Dystrophin和VEGF-α 的mRNA表达量增高(P<0.05).与NS组相比,Therapy组α-actin、Dystrophin和VEGF-α蛋白表达均增高(P<0.05).免疫组化发现,NS组和Therapy组Dystro-phin表达均增加,但Therapy组明显高于NS组(P<0.05).结论 肌肉注射CB-MNCs可有效促进腓肠肌失神经损伤的伤口愈合,缓解萎缩、促进肌肉修复,并降低凋亡细胞比例.
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人脐血单个核细胞移植治疗血管性痴呆的临床研究
目的 观察人脐血单个核细胞经移植治疗血管性痴呆的疗效及安全性.方法 采用自身对照研究,将脐静脉血单个核细胞输注入28例血管性痴呆患者体内,每例平均输注6份(细胞数1×108/份),每份间隔3～6 d,监测细胞移植治疗前及治疗后6个月临床神经功能缺损程度(NFD)、简易智能精神状态检查量表(MMSE)和日常生活活动能力量表(ADL),评定其疗效,并进行安全性评价.结果 人脐血单个核细胞移植后6个月,患者神经功能缺损程度评分较移植前明显降低(t=-12.3l,P＜0.01):简易智能表评分和评价日常生活能力的Barthel指数均较移植前明显升高(t=17.82,t=21.02,P＜0.01).在细胞移植过程中及移植后均未发生并发症及不良反应.结论 人脐血单个核细胞经颈内动脉或手背浅静脉移植治疗血管性痴呆有较好的疗效,安全性好.
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人脐血单核细胞颈内动脉输注对血管性痴呆大鼠学习记忆的作用及在脑内的迁移分化
目的 观察颈内动脉输注人脐血单个核细胞(HCMNCs)透过血脑屏障在血管性痴呆(VD)大鼠脑内仔活、迁移分化及对学习记忆的影响. 方法 改良Pulsinellis四血管阻断法建立VD大鼠模型;体外分离HCMNCs,术后24h治疗组颈内动脉输注数量为3×106/0.5 ml的BrdU标记细胞;采用免疫组化法和穿梭箱系统检测HCMNCs在VD大鼠脑内的存活、迁移和分化情况以及对认知功能的影响. 结果 HCMNCs广泛分布于VD大鼠脑组织,可存活较长时间(8周以上),随着时间的延长,迁移方向集中,主要聚集迁移至海马、大脑皮质等区域;HCMNCs在VD大鼠脑内微环境作用下2周已开始向神经细胞转化,表达人神经丝蛋白(NF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)以及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP).模型组大鼠AAR比率[(55.4±4.5),(42.1±4.5),(44.2±3.6)]低于对照组[(91.7±3.9),(90.0±4.3),(92.5±5.0)],差异非常显著(P＜0.01);治疗组[(67.1±3.3),(69.2±4.7),(70.8±4.7)]较模型组明显提高(P＜0.01). 结论 颈内动脉输注HCMNCs可透过VD大鼠血脑屏障向脑缺血易损伤部位迁移聚集、存活,定向分化为神经样细胞,并可显著改善VD大鼠学习记忆能力.
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人脐血单个核细胞静脉移植联合复方丹参滴丸对急性心肌梗死心肌组织内环境及心肌细胞凋亡的影响
目的：观察复方丹参滴丸(compound Danshen dripping pills，CDDP)和人脐血单个核细胞(human umbilical cord blood mononuclear cells，HUCBMCs)静脉移植联合复方丹参滴丸对家兔急性心肌梗死(acute myocardial infarction， AMI)的心肌组织炎症反应、心肌细胞凋亡、氧化应激指标及心功能的影响，并探讨其联合治疗对急性心肌梗死可能的保护机制。方法：对健康家兔结扎冠状动脉左前降支，制备AMI模型。建模成功者40只随机分为4组，每组10只。对照组：术后24 h生理盐水0.5 mL耳缘静脉注射，生理盐水5 mL/d灌胃；CDDP组：术后24 h经耳缘静脉注入生理盐水0.5 mL，CDDP 270 mg/d溶入生理盐水5 mL灌胃；单纯移植组：术后24 h经耳缘静脉注入含3×107绿色荧光蛋白(green lfuorescent protein，GFP)标记人脐血单个核细胞生理盐水0.5 mL，生理盐水5 mL/d灌胃；联合治疗组：术后24 h经耳缘静脉注入含3×107 GFP标记人脐血单个核细胞的生理盐水0.5 mL，CDDP 270 mg/d溶入生理盐水5 mL灌胃。每组随机5只家兔分别于移植术后1周、4周超声心动图检测家兔心功能指标左室射血分数(letf ventricular ejection fraction，LVEF)及左室短轴缩短率(letf ventricular fractional shorting，LVFS)；苏木精-伊红(HE)染色光镜观察心肌病理变化并在光镜下进行白细胞计数。氮蓝四唑(nitrotetrazolium blue chloride， NBT)法测定心肌组织浆液超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性；硫代巴比妥酸比色法测心肌组织浆液丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量。根据荧光显微镜检测到的GFP阳性细胞进行移植细胞计数。结果：1)与对照组比较，CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后1周、4周心功能指标LVFS及LVEF改善(均P<0.05)，其中联合治疗组心功能改善优于单纯移植组、CDDP组(均P<0.05)，而后两组组间比较差异无统计学意义；2)与对照组比较，CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后1周、4周心肌组织白细胞计数及心肌细胞凋亡指数均显著减低(均P<0.05)，且联合治疗组均显著低于单纯移植组、CDDP组(均P<0.05)，而后两组比较差异无统计学意义；3)与对照组比较，CDDP组、单纯移植组、联合治疗组术后4周心肌组织MDA水平均显著降低(均P<0.05)，SOD活性显著增高(均P<0.05)，且联合治疗组均优于单纯移植组、CDDP组(均P<0.05)，而后两组比较差异无统计学意义；4)联合治疗组、单纯移植组术后4周均可见GFP阳性细胞散在分布于梗死周边区域，且联合治疗组细胞计数多于单纯移植组(P<0.05)。结论：HUCBMCs静脉移植联合CDDP治疗AMI，可提高移植细胞在心肌组织内存活率，拮抗心肌细胞凋亡，并进一步改善心功能。其机制可能与联合治疗减低心肌组织局部炎症反应及拮抗氧化应激作用增强有关。
