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黄芪总皂甙对Wnt/β-catenin信号通路及神经干细胞分化的影响
目的 观察黄芪总皂甙(TSA)调控体外培养大鼠神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的作用及其有效浓度,并研究其Wnt/β-catenin信号通路相关机制.方法 新生24 h大鼠大脑皮层来源NSCs进行原代、传代培养并鉴定,通过CCK-8试剂盒初筛TSA诱导分化的可能有效浓度.取第三代NSCs,设不加TSA的正常组和不同浓度TSA实验组,分化培养7 d后,间接免疫荧光法和Western blotting检测微管相关蛋白2(MAP-2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达.另设正常组、佳浓度TSA组、TSA+Wnt/β-catenin信号通路抑制剂ICG-001组和ICG-001组,分化培养7 d后,West-ern blotting检测各组Wnt3/3a、β-catenin和抗神经原素1(Ngn1)蛋白表达.结果 TSA在浓度1×10-4 mol/L、1×10-5 mol/L、1×10-6 mol/L时,NSCs数量显著增加(P<0.001).TSA能增加NSCs分化为神经元的比例,1×10-5 mol/L佳(P<0.05).TSA能上调Wnt3/3a、β-catenin与Ngn1蛋白的表达(P<0.05).结论 TSA能促进体外培养NSCs向神经元方向分化,与激活Wnt/β-catenin信号通路,从而调控该通路下游促分化靶向蛋白Ngn1的表达有关.TSA佳促神经元方向分化浓度约为1×10-5 mol/L.
关键词： 黄芪总皂甙 神经干细胞 分化 Wnt/β-catenin信号通路 大鼠 -
黄芪总皂甙对心肌细胞氧化损伤的保护作用研究
氧自由基是带有未成对电子的高活性分子或离子,一旦产生即迅速与周围分子发生破坏性反应.黄芪总皂甙能够干预氧自由基的产生并增强清除氧自由基的能力[1].本实验观察了FeSO4/H2O2对心肌细胞形态学变化,乳酸脱氢酶(LDH)释放量,一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响及黄芪总皂甙对心肌细胞氧化损伤的保护作用.
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黄芪总皂甙对病毒性心肌炎小鼠慢性期SERCA活性的影响
目的探讨黄芪提取物-黄芪总皂甙对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染的病毒性心肌炎(VMC)小鼠慢性期心肌肌浆网钙泵(SERCA)活性变化的影响.方法将BALB/C小鼠分为正常组(31只)、模型组(36只)及黄芪组(26只),模型组及黄芪组每只小鼠以2×104TCID50CVB3(TCID50为10-5.83)腹腔注射感染.黄芪组每鼠每天腹腔注射0.15ml黄芪总皂甙注射液,正常及模型组予同体积的生理盐水.3个月后,观察各组小鼠死亡率及心肌病理改变,检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量及心肌组织中SERCA活性.结果 (1)和正常组、黄芪组相比,模型组小鼠死亡率显著增高(P＜0.05～0.001).(2)感染3个月后模型组、黄芪组心肌肌钙蛋白I(cTnI)及心肌病理改变与正常组无显著性差异(P＞0.05).(3)模型组心肌SERCA活性显著低于正常组及黄芪组(P＜0.01).结论黄芪总皂甙可以降低VMC小鼠的死亡率,对慢性期病毒感染所致心肌组织SERCA功能下调有逆转作用.
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白藜芦醇与黄芪总皂甙合用抗Ⅱ型人疱疹病毒药效分析
目的:为了探讨虎杖与黄芪组方抗HSV时,其有效成分白藜芦醇与总皂苷之间的相互作用对药效的影响.方法:以阿昔洛韦(ACv)为阳性对照,采用空斑减数实验,用中和作用原理对虎杖白藜芦醇与黄芪总皂甙合用抗HSV-2 333株的药效进行了分析.结果:在Hep-2细胞系统中,ACV对HSV-2 333株增殖抑制的ED50为10.85ug/ml.当白藜芦醇与总皂甙以1(Dm白藜芦醇/1(Dm)总皂甙的比例合用时,对HSV-2 333株直接杀灭、感染阻断、增殖抑制的ED50依次为0.41ug/ml,0.66ug/ml,0.86 ug/ml;合用指数(Combination Index,CI)均＜1.0,P＜0.0005,说明这一合用比药效强,协同作用明显.结论:ACV对HSV-2 333株增殖抑制的治疗指数(Treatment Index,TI)为100.1(Dm)白藜芦醇/1(Dm)总皂甙对HSV-2 333株直接杀灭、感染阻断、增殖抑制的TIs为248.3,154.2,118.4,为佳合用比.
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黄芪总皂甙抗HSV2的实验研究
目的:研究黄芪的抗病毒作用.方法:以阿昔洛韦(ACV)为阳性对照,采用病毒所致细胞病变的抑制及空斑减数实验.观察黄芪总皂甙抗HSV-2333株药效.结果:在HEp-2细胞系统中,ACV对HSV-2333株直接杀灭、感染阻断、增殖抑制的ED50为16.45μg/ml、18.62μg/ml、10.85μg/ml;黄芪总皂甙的相应数值为L 73μg/ml、2.71μg/ml、2.74μg/ml.结论:黄芪总皂甙对HSV-2333株的治疗指数为ACV的2.31、0.96、1.64倍,值得开发利用.
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黄芪总皂甙对CVB3感染心肌细胞cTnI、SERCA活性及mRNA表达的影响
目的:探讨黄芪提取物-黄芪总皂甙对柯萨奇B3(CVB3)感染的培养SD乳鼠心肌细胞损伤模型的保护作用,对病毒引起的肌浆网钙泵(Sarco/Endoplasmic reticulum Ca2+ ATPase,SERCA)活力及其mRNA表达变化的影响.方法:将培养SD乳鼠心肌细胞分为正常组、模型组及黄芪组,模型组及黄芪组以柯萨奇B3亲心肌病毒株(CVB3m,TCID50为10-5.83)感染心肌细胞.72～96 h后,观察各组细胞病变作用(cytopathic effect, CPE),检测其培养上清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量及NO浓度,测定心肌细胞中SERCA活力以及SERCA2型基因的mRNA表达水平.结果:(1)和正常组相比,模型组CPE分级数明显增高(P＜0.001),而黄芪组CPE分级数比模型组降低,与正常组无显著差异(P＞0.1).(2)模型组、黄芪组心肌肌钙蛋白I均高于正常组,但黄芪组与模型组相比,心肌肌钙蛋白I降低,与正常组无显著差异(P＞0.05).黄芪组NO浓度增高.(3)模型组心肌SERCA活力以及SERCA2型基因的mRNA水平均显著低于正常组及黄芪组(P＜0.05,P＜0.001).结论:表明黄芪总皂甙可以减轻病毒引起的心肌细胞损伤,对病毒感染引起心肌细胞SERCA2型基因mRNA水平降低以及SERCA功能下调有逆转作用.
