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加味温胆汤对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马cAMP-PKA途径的影响
目的:探讨加味温胆汤对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马信号转导cAMP-PKA途径的影响.方法:32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸氟西汀组及加味温胆汤组.每组8只,应用孤养加慢性轻度不可预见性应激方法造模,采用Morris水迷宫实验测试大鼠空间学习记忆能力、放射免疫法测定海马cAMP含量.以及免疫组化SABC法测定海马区PKA蛋白表达水平.结果:模型组大鼠学习记忆能力显著下降(P<0.01),海马cAMP含量增加(P<0.05)、PKA表达显著减少(P<0.01).中、西药组与模型组比较,学习记忆能力增强(P<0.05),cAMP含量下降(P<0.05).PKA蛋白表达显著上升(P<0.05).结论:加味温胆汤可增强抑郁症大鼠学习与记忆能力.其影响机制可能与海马信号传导cAMP-PKA途径有关.
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莪术抑制晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制
目的 探讨天然药物莪术(rhizoma curcumae,RC)对体外培养的晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)增殖的抑制作用,并从信号转导方面研究其抑制LEC增殖的作用机制,为寻求防治后发性白内障(after cataract)的确切有效药物提供实验依据.方法 用牛LEC进行原代和传代培养,取第三代细胞.用10 ng/ml重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF)诱导LEC增殖.同时分别将5 mg/ml、10 mg/ml、20 mg/ml的莪术作用于增殖状态下的LEC 72小时.(1)通过四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色测定法检测莪术对LEC增殖的抑制程度;(2)用钙荧光指示剂Fura-2/AM测定莪术抑制LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化;(3)用放射免疫分析法测定莪术抑制LEC增殖时细胞内环化腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)和环化鸟苷酸(cyclicguanosine monophosphate,cGMP)浓度变化.结果 莪术可明显抑制LEC增殖.抑制LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)升高,细胞内cAMP浓度显著升高,细胞内cGMP浓度显著降低,cAMP/cGMP比值升高,并具有剂量依赖关系.结论 诱导[Ca2+]i升高,激活细胞内Ca2+信号转导途径;上调细胞内cAMP水平,下调细胞内cGMP水平,使cAMP/cGMP比值升高,激活细胞内cAMP-PKA、cGMP-PKG信号转导途径可能是莪术抑制LEC增殖的作用机制之一.莪术能够明显抑制LEC增殖的作用,有望成为防治后发性白内障的有效药物.
关键词: 莪术 晶状体上皮细胞 细胞内游离钙离子浓度 环化腺苷酸 环化鸟苷酸 -
三氧化二砷和莪术抑制晶状体上皮细胞增殖及其信号转导机制
目的:旨在探讨三氧化二砷(As2O3)和莪术(RC)对体外培养的晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用并研究其信号转导机制. 方法:用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导体外培养的晶状体上皮细胞(LEC)增殖.分别将三种不同浓度的As2O3和RC作用于增殖状态的LEC,进行以下研究:1、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测As2O3、RC对LEC增殖的抑制程度.2、流式细胞术(FCM)检测As2O3、RC对LEC核内增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响.3、荧光分光光度法检测[Ca2+]i.4、放射免疫法检测细胞内环化腺苷酸(cAMP)和环化鸟苷酸(cGMP)浓度.
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天然药物抑制晶状体上皮细胞增殖及其信号转导机制
目的:探讨天然药物榄香烯(Ele)、姜黄素(Cur)、雷公藤内酯醇(Tri)对重组人表皮生长因子(rhEGF)诱导的晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用及其信号转导机制.方法:用rhEGF诱导体外培养的牛LEC增殖,将高、中、低不同浓度的Ele、Cur、Tri与增殖状态的LEC共同孵育后,进行以下研究:1、四甲基偶氮唑蓝法(MTT)法检测LEC增殖情况.2、流式细胞仪(FCM)检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达.3、荧光分光光度法检测LEC内游离Ca2+浓度.4、放射免疫法检测LEC内环化腺苷酸(cAMP)和环化鸟苷酸(cGMP)含量.
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复方SZ滴眼液抑制晶状体上皮细胞凋亡及其信号转导机制的实验研究
目的:探讨复方SZ滴眼液(Co-SZ)抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的作用及信号转导机制.为将Co-SZ作为防治白内障的有效药物提供科学的实验依据.方法:1、将H2O2与Co-SZ和SD大鼠晶状体共同孵育后:(1)TUNEL法检测LEC凋亡率.(2)透射电镜观察LEC凋亡形成.2、H2O2与Co-SZ和体外培养的牛LEC共同孵育后:(1)四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测不同浓度的Co-SZ抑制LEC活性的作用.(2)流式细胞仪(FCM)检测LEC细胞核内DNA含量.(3)荧光分光光度法检测LEC内游离Ca2+浓度.(4)放射免疫分析法检测LEC内环化腺苷酸(cAMP)和环化鸟苷酸(cGMP)浓度.