首页 > 文献资料
-
TNF-α和TLR-4在呼吸机相关肺损伤大鼠肠道细菌移位中的作用
目的：研究TNF-α和TLR-4在呼吸机相关肺损伤大鼠肠道细菌移位中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为3组，健康对照组（C组）、呼吸机相关肺损伤组（VILI组）、肠道抗生素组（AMP＋VILI组），VILI组、AMP＋VILI组以大潮气量机械通气制造大鼠呼吸机相关肺损伤模型，通气1 h后，改为小潮气量机械通气，AMP＋VILI组在胃内灌入氨苄西林，3～4 h一次，共3次，造模后12 h，测大鼠回肠组织湿/干重比值，取肺脏、肝脏、胰腺、脾脏、肾脏、肠系膜淋巴结组织及回肠内容物行细菌培养及菌种鉴定，用real-time PCR检测回肠组织中TNF-α mRNA表达，ELISA测定回肠组织及0 min，30 min，1 h，2 h，4 h，6 h，8 h，12 h血清中TNF-α浓度，Western blot检测回肠黏膜组织中TLR-4的表达。结果VILI组回肠组织TNF-α mRNA的表达较健康对照组上调（P＜0.05），TNF-α、TLR-4浓度较C组升高（P均＜0.05），细菌移位至肺及肠系膜淋巴结，其他器官未检测到移位的细菌；AMP＋VILI组回肠组织中TNF-α mRNA的表达较VILI组下调（P＜0.05）， TNF-α、TLR-4浓度较VILI组降低，细菌移位减少（P均≥0.05）。结论呼吸机相关肺损伤中肠道细菌主要移位到损伤的肺，TNF-α、TLR-4浓度在呼吸机相关肺损伤大鼠肠道细菌移位中可能具有重要作用。抑制肠道细菌移位可能缓解呼吸机相关肺损伤。
-
耐力训练模型大鼠心肌Toll样受体4/核因子κBp65的表达
背景:急性心肌缺血缺氧可以引起血管紧张素Ⅱ的表达升高,上调心肌细胞Tol样受体4和核因子κB的蛋白表达.Tol样受体4缺乏的小鼠在压力超负荷的情况下心肌肥大程度下降,提示Tol样受体4/核因子κBp65参与了应激和心肌肥大发生、发展过程.目的:通过建立一次急性运动、4周和10周递增负荷运动模型,探讨Tol样受体4/核因子κBp65信号通路在心肌适应性运动过程中的作用.方法:大鼠随机分为3个大组,分别进行一次急性运动、4周耐力训练和10周耐力训练.采用跑台运动方式训练.每个大组划分为4个小组:安静对照组、末次运动后0 h(0 h)、3 h(3 h)、24 h(24 h)取材组.结果与结论:①大鼠心肌Tol样受体4蛋白表达在一次急性运动后呈持续高水平表达;4周、10周耐力训练后均出现一过性表达增高,高水平状态的持续时间缩短;②核因子κBp65表达在大鼠4周耐力训练后持续性升高,10周耐力训练只能引起末次运动后一过性升高,而运动后24 h组与安静组相比表达降低;③肌球蛋白重链1/2/4/6表达在大鼠一次急性运动后呈持续高水平表达,4周耐力训练后也呈持续性升高,10周耐力训练后则只出现一过性升高.结论:运动诱发Tol样受体4/核因子κBp65信号通路激活参与了运动心肌适应过程.
-
膝骨性关节炎模型大鼠接受推拿治疗后软骨Toll样受体4/髓样分化因子88信号转导通路的变化
背景:研究表明,Tol样受体4/髓样分化因子88信号转导通路可诱导各类炎症反应,且膝骨关节炎的发生与Tol样受体4/髓样分化因子88信号转导通路密切相关,而推拿可以降低白细胞介素6及肿瘤坏死因子α等炎症因子的表达水平,起到消炎止痛的作用,且对膝骨关节炎防治有一定的疗效.目的:对建立的大鼠膝骨关节炎模型行推拿治疗,观察其软骨Tol样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6、核转录因子κB p65 mRNA及蛋白表达,来探讨推拿治疗膝骨关节炎的效果及其机制.方法:采用随机化的原则,抽取10只大鼠为空白组,余下40只大鼠采用木瓜蛋白酶关节注射建立大鼠膝骨关节炎模型,待造模成功后,再将造模大鼠随机分为模型组、推拿组、塞来昔布组、推拿加塞来昔布组,每组10只.空白组、模型组常规饲养,推拿组一指禅手法治疗,塞来昔布组塞来昔布灌胃,推拿加塞来昔布组予以上2种治疗,各组均治疗4周.结果与结论:①与模型组相比,推拿和/或塞来昔布治疗均能显著降低大鼠软骨Mankin评分;②与模型组相比,推拿和/或塞来昔布治疗均能明显下调大鼠软骨组织中Tol样受体4、髓样分化因子88、核转录因子κBp65以及肿瘤坏死因子受体相关因子6 mRNA与蛋白的表达水平,且推拿加塞来昔布组软骨组织中Tol样受体4、髓样分化因子88以及核转录因子κBp65 mRNA与空白组接近;③提示推拿防治膝骨关节炎的机制可能是通过下调Tol样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6、核转录因子κBp65 mRNA和蛋白的表达,从而延缓膝骨关节炎的发展进程.
-
TOLL样受体4拮抗剂干预周围神经损伤后的瓦勒变性
背景：外周神经损伤后发生瓦勒变性，其机制复杂，从免疫学角度对其进行调控可以影响神经早期修复效果。
目的：分析特异性拮抗Toll样受体4(TLR4)对于大鼠坐骨神经损伤早期瓦勒变性及轴突再生的影响。
方法：将50只Wistar大鼠随机分成3组：处理组及模型组横断大鼠右侧坐骨神经后，行神经外膜端端吻合；假手术组仅游离出坐骨神经，然后关闭切口。术前1h及术后7d处理组大鼠每天尾静脉注射0.15 mg/kg Toll样受体4拮抗剂TAK-242，模型组及假手术组大鼠尾静脉注射同等体积生理盐水。于术后24 h、3 d、4 d和7d取术侧坐骨神经。
结果与结论：①实时定量PCR显示，与假手术组相比，术后24 h模型组白细胞介素1βmRNA和单核细胞趋化蛋白1 mRNA的表达均明显升高(P<0.001，P<0.001)，与模型组相比，术后24 h处理组白细胞介素1βmRNA和单核细胞趋化蛋白1 mRNA的表达明显降低(P<0.001，P<0.001)；②免疫荧光可见，与模型组相比，术后3 d处理组中CD68+细胞和iba1+细胞表达均显著下调(P<0.01，P<0.05)；③固兰染色可见，在术后7 d，模型组和处理组坐骨神经断端均出现脱髓鞘反应，但与模型组相比，处理组神经断端髓鞘碎片清除率明显降低(P<0.05)；④苏木精-伊红染色可见，在术后7 d，模型组坐骨神经断端较多炎性细胞浸润，许旺细胞增殖活跃，神经纤维大量再生通过吻合口，断端修复正常，处理组神经断端炎性细胞较少，纤维组织增生较少，吻合口有缝隙，断端修复能力减弱；⑤免疫组织化学可见，与模型组相比，术后4 d处理组中生长相关蛋白43蛋白表达均显著下调(P<0.05)；⑥坐骨神经功能指数显示，与模型组相比，处理组大鼠在术后20，30和40 d同期比较明显降低，差异有显著性意义(P<0.05)。⑦结果证实，Toll样受体4拮抗剂导致大鼠坐骨周围神经损伤早期再生延迟，其机制可能是抑制了瓦勒变性过程中的的Toll样受体4信号通路。 -
惊厥持续状态后大鼠海马TLR4、IL-1β的表达及意义
目的：观察大鼠惊厥持续状态（status convulsion，SC）后海马的病理改变及TLR4、IL-1β的动态表达,阐明免疫反应在惊厥性脑损伤发病机制中的作用。方法88只SD大鼠分为生理盐水组（A组）、SC组（B组），B组用氯化锂-匹罗卡品法成功制作SC模型后，再分为B1- B4组（分别于惊厥后4、24、48和72h处死）。光镜观察大脑皮层及海马各区形态学改变，电镜确认海马CA1区神经元超微结构变化，RT- PCR检测海马TLR4、IL-1βmRNA的动态表达。结果长程惊厥发作后，大鼠海马神经元的损伤存在动态变化，随着观察时间的延长，72h内病变逐渐加重。TLR4 mRNA于惊厥后4h开始升高（P＜0.05），并随时间延长逐步增高，于72h时达到高峰点（P＜0.01），而IL-1βmRNA在惊厥后4h即达高峰（P＜0.01），此后随时间延长而下降，至72h时已降至正常水平（P＜0.05）。结论 TLR4和IL-1β参与了惊厥性脑损伤的发生、发展过程，且IL-1β的早期升高可能对TLR4的生成有间接促进作用。
