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鸦胆子油对血小板聚集的抑制作用及其机制的体外研究
目的 以人洗涤血小板为模型,体外观察鸦胆子油对血小板聚集的抑制作用,并探讨其可能机制.方法 将不同浓度鸦胆子油与人洗涤血小板作用,分为4组:空白组(加丙酮)、阴性对照组(加丙酮,0%),9.0%鸦胆子油组及22.5%鸦胆子油组.以血小板聚集分析仪检测ADP、AA、胶原和凝血酶诱导的血小板大聚集率、以流式细胞仪检测活化血小板膜FIB-R和P-选择素表达水平,以SDS-PAGE分析血小板肌动蛋白聚合体的变化.结果 9.0%鸦胆子油组ADP、AA、胶原和凝血酶诱导的血小板聚集率分别为(57.7±4.0)%、(62.2±3.9)%、(66.9±5.0)%和(71.8±5.1)%,均低于阴性对照(0%)组的(75.3±4.1)%、(79.3±4.8)%、(80.6±5.4)%和(84.1±6.2)%,差异均有统计学意义(t值分别为7.312、8.785、9.123和9.466,P均<0.01);22.5%组分别为(39.2±3.5)%、(45.8±3.4)%、(51.2±3.9)%和(56.7±4.8)%,显著低于9.0%组,差异有统计学意义(t值分别为9.123、10.221、9.533和10.243,P均<0.01).22.5%鸦胆子油组对血小板聚集的抑制率分别为47.9%、42.2%、36.5%和32.6%,显著高于9.0%组的23.4%、21.6%、17.0%和14.6%,差异有统计学意义(χ~2值分别为13.08、9.77、9.70和8.93,P均<0.01).血小板聚集水平与鸦胆子油浓度呈负相关(r=-0.952,-0.961,-0.970和-0.975,P<0.01).9.0%鸦胆子油组ADP诱导的血小板FIB-R表达水平和P-选择素表达水平分别为(64.7±4.0)%、(3.91±0.21)%,均低于阴性对照组的(85.5±4.6)%和(5.05±0.27)%,差异有统计学意义(t值分别为11.35、7.81,P均<0.01);22.5%鸦胆子油组分别为(36.2±3.9)%和(2.34±0.15)%,低于9.0%组,差异有统计学意义(t值分别为14.35、14.80,P均<0.01);22.5%鸦胆子油组对FIB-R的抑制率为57.7%,高于9.0%组的24.3%,差异有统计学意义(χ~2=23.05,P<0.01).9.0%和22.5%鸦胆子油组与空白组在相对分子质量43 000为肌动蛋白区带的吸光度值之比分别为1.77±0.12和1.68±0.10,明显低于阴性对照组与空白组的比值2.22±0.15,差异有统计学意义(t=7.21、8.14,P值均<0.01);22.5%胆鸦子油组为1.68±0.10,与9.0%组间差异无统计学意义(t=2.77,P>0.05).结论 鸦胆子油通过抑制活化血小板膜纤维蛋白原受体的表达,并抑制肌动蛋白聚合以及释放反应,从而剂量依赖性地抑制血小板的聚集反应,可能有抗血栓的功效.
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探讨鸦胆子素D对骨肉瘤细胞增殖、凋亡与自噬的作用
目的 探讨鸦胆子素D对骨肉瘤细胞(143B HOS)增殖,骨肉瘤细胞凋亡与自噬的作用.方法 用CCK8实验观察鸦胆子素D对143B HOS增殖的影响;用平板克隆实验观察鸦胆子素D对143B HOS细胞集落形成的影响;用流式细胞仪检测鸦胆子素D对143B HOS周期阻滞以及诱导凋亡的作用情况;用Western Blot检测143B HOS基础凋亡与自噬以及经鸦胆子素D诱导之后的凋亡与自噬情况;用荧光显微镜检测143B细胞基础LC3荧光鼬合蛋白表达以及经鸦胆子素D诱导之后的LC3荧光鼬合蛋白表达情况.结果(1)CCK8实验显示鸦胆子素D作用后143B HOS细胞的存活率下降,同时,也减少了143B HOS细胞克隆数的形成;(2)流式细胞仪检测细胞周期显示鸦胆子素D使143B HOS的G0/G1期细胞比例增高;(3)流式细胞仪检测细胞凋亡实验显示,鸦胆子素D使143B HOS的细胞凋亡比例增加;Western Blot检测143B HOS细胞Cleaved PARP的表达,结果显示,鸦胆子素D诱导Cleaved PARP表达增加;(4)Western Blot检测143B HOS细胞LC3B的表达,结果显示,鸦胆子素D诱导LC3B-II的表达增加;荧光显微镜检测143B细胞的LC3荧光鼬合蛋白实验,结果显示,鸦胆子素D诱导143B细胞绿色荧光斑点生成增多.结论 ( 1 ) 鸦胆子素 D 抑制骨肉瘤细胞增殖;( 2 ) 鸦胆子素 D 诱导骨肉瘤细胞的凋亡;( 3 ) 鸦胆子素 D 诱导骨肉瘤细胞自噬.
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鸦胆子油乳胸腔内注射治疗恶性胸腔积液32例效果分析
恶性胸腔积液是晚期肺癌或其他肿瘤的常见并发症,直接影响患者的生活质量和生存期.积极有效地控制恶性胸腔积液,可减轻患者痛苦,提高生存质量.胸腔内治疗目前认为是有效的方法[1].我科2005年3月～2008年12月应用鸦胆子油乳胸腔内注射治疗恶性胸腔积液32例,效果较满意,现报告如下.
