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屎肠球菌对氨苄西林耐药pbp5基因突变的研究
目的 研究屎肠球菌对氨苄西林耐药与β内酰胺酶、pbp5基因突变的关系.方法 用硝基噻吩(nitrocefin)法检测β内酰胺酶的产生,聚合酶链反应扩增pbp5基因片段,单链构像多态性分析检测pbp5扩增片段的基因突变,测序确定突变的具体位点.结果 57株对氨苄西林耐药的屎肠球菌β内酰胺酶阴性;pbp5基因片段均有3至6个位点发生突变,485和499位点突变、466'位插入突变为常见.结论 pbp5基因突变在屎肠球菌对氨苄西林耐药中起着重要作用.
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屎肠球菌所致肺脓肿一例并文献复习
目的 提高对屎肠球菌所致肺脓肿的认识,提高其诊断及治疗水平.方法 回顾性分析解放军总医院呼吸科1例经病理及肺组织细菌学培养确诊的屎肠球菌性肺脓肿病例并进行相关文献复习.结果 患者男,60岁,因"反复咳嗽、咳痰6个月余,加重伴痰中带血3个月余"于2008年1月30日入院,入院前曾怀疑"肺栓寒"、"肺癌"等,在外院2次CT引导下经皮肺穿刺组织活检考虑为"肺炎",但经多种抗菌药物治疗效果差,肺部病变进展伴空洞形成.入院后在CT引导下经皮肺穿刺组织活检及细菌学培养,确诊为屎肠球菌肺脓肿,根据药敏试验结果给予万古霉素、替考拉宁及利奈唑胺治疗后好转.到目前为止,国内外能检索到确诊为肠球菌性肺炎或肺脓肿的个案报道共13例,其中屎肠球菌性肺脓肿3例.结论 屎肠球菌性肺脓肿极少见,确诊需要病理及肺组织细菌学培养;根据药敏试验结果应用抗菌药物可取得较好疗效.
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重症监护病房耐万古霉素肠球菌耐药性与耐万古霉素基因及毒力因子研究
目的 分析重症监护病房(ICU)耐万古霉素肠球菌(VRE)的耐药性及万古霉素耐药基因和毒力因子携带情况.方法 连续收集2012年9月至2013年5月天津医科大学总医院ICU住院患者180份肛周拭子样本,采用ChromID VRE产色培养基筛选出VRE,Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定分析仪检测菌株对常用抗菌药物的敏感性,同时采用Kirby-Bauer纸片扩散法对其进行万古霉素及替考拉宁的药敏试验;运用PCR方法检测万古霉素耐药基因vanA、vanB、vanC1和其携带的毒力基因esp和hyl.结果 180份肛周拭子样本中共筛选出VRE 19株,均为耐万古霉素屎肠球菌.19株耐万古霉素屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁均为耐药,但对利奈唑烷和替加环素均为敏感.所有VRE菌株均携带vanA基因和毒力因子esp基因,其中10株同时携带hyl毒力因子基因.结论 ICU中VRE耐药现状较严重,耐药基因和毒力因子基因携带率高,利奈唑烷和替加环素可作为治疗VRE感染的推荐药物.
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术后难治性屎肠球菌感染的综合治疗
目的探讨术后抗生素治疗无效的屎肠球菌感染的治疗方法. 方法对5例术后经细菌培养证实屎肠球菌感染并经相应敏感的抗生素正规治疗无效的患者进行综合治疗.包括停用一切抗生素,应用微生物调节剂和免疫增强剂,进行肠内营养,加强支持治疗和中药治疗等. 结果4例治愈后出院;1例自动出院,在当地医院治疗1个月后痊愈. 结论对术后难治性屎肠球菌感染患者进行综合治疗是一种有效的治疗方法.
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302株肠球菌临床分布及药物敏感性分析
目的 了解住院患者肠球菌属的临床分布及其对常用抗菌药物的耐药情况,为临床诊疗提供可靠依据.方法 回顾性分析我院2005年1月～2008年12月分离出肠球菌属的住院患者的临床资料.结果 临床分离肠球菌302株,其中粪肠球菌242株(80.13%),屎肠球菌60株(19.87%).分离出的肠球菌来自尿液标本多(55.63%),生殖道分泌物标本次之(25.50%).粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的敏感性高,分别为99.17%和100.00%,对氨苄西林和青霉素的敏感性次之.结论 肠球菌属已成为医院感染的重要致病菌,且细菌耐药情况日趋严重,临床治疗肠球菌属引起的感染时应根据药敏结果合理用药.
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屎肠球菌磷霉素耐药基因的高通量测序筛选
目的 从对磷霉素耐药的屎肠球菌临床分离株中筛选介导屎肠球菌对磷霉素耐药的基因，并验证其作用。方法通过药物敏感测定及接合转移实验，了解磷霉素耐药屎肠球菌的耐药性及其可转移性。通过Solexa高通量测序筛选磷霉素耐药基因，并对该耐药基因进行克隆确认其基因功能。结果屎肠球菌临床株Efm-HS0661对糖肽类抗生素及磷霉素耐药，且可通过接合转移试验发生磷霉素耐药性的转移。Solexa高通量测序及比对筛选获得一2414 bp核苷酸序列，含有全长420 bp的fosB基因，与已知fosB基因氨基酸序列同源性达99.8％。含该基因的DH5α克隆转化子的磷霉素低抑菌浓度较不含者明显升高。结论 Solexa高通量测序技术可用于临床菌株未知耐药基因的快速筛选，质粒介导的磷霉素耐药基因fosB可导致屎肠球菌对磷霉素耐药。
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屎肠球菌透明质酸酶全长基因的克隆表达和免疫原性
目的 构建屎肠球菌透明质酸酶(hyaluronidase,hy1)基因重组表达质粒,在大肠埃希菌中表达获得重组蛋白,探讨Hy1蛋白经口服免疫小鼠后,机体产生的免疫应答.方法 PCR扩增hy1基因片段,克隆至pQE-30质粒上,构建重组质粒pQE-hy1,转化E.coli DH5α,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白Hy1;Western印迹分析其免疫反应性.融合蛋白经镍离子柱纯化后,Hy1和屎肠球菌全菌蛋白TX0016分别给小鼠灌胃进行免疫,ELISA法检测小鼠血清IgG、IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA.用TX0016进行腹腔攻击已免疫的小鼠,观察其免疫保护性.结果 经测序hy1基因全长1 662 bp,为编码553个氨基酸残基的多肽.经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析相对分子质量约为60 000.可溶性表达占全菌的38%以上,经亲和层析后可获得纯度为92%以上的重组蛋白.Western印迹证实了其免疫反应性.灌胃免疫小鼠后,ELISA法检测结果Hy1组血清IgA、IgG、粪sIgA、肠黏液sIgA分别为0.365±0.048、0.431±0.064、0.743±0.056和1.112±0.113,对照组则分别为0.051±0.013、0.098±0.019、0.102±0.032和0.187±0.051,差异有统计学意义(P＜0.01).用半数致死量(LD50)的细菌量攻击后,Hy1免疫组小鼠的存活率为70%,而对照组为50%.结论 融合蛋白Hy1经口服免疫可有效诱导黏膜免疫应答,产生高水平的sIgA,发挥局部黏膜免疫作用.
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临床分离肠球菌分布及其耐药性监测
目的了解某院临床分离肠球菌的菌群分布及其耐药情况.方法采用全自动微生物分析仪VITEK AMS 32对分离自各类临床标本的206株肠球菌进行鉴定及药敏试验,并对耐万古霉素的菌株用K-B法作进一步验证.结果 206株肠球菌中,以粪肠球菌(80.10%)和屎肠球菌(11.65%)为主.菌株来源以痰液(21.84%)、前列腺液(20.87%)、脓液(20.39%)、尿液(10.68%)为主.耐万古霉素肠球菌(VRE)中,粪肠球菌为1.82%,屎肠球菌为4.17%,鸟肠球菌为14.29%,鸡肠球菌为100%.粪肠球菌中高浓度庆大霉素耐药株(HLGR)占56.36%,高浓度链霉素耐药株(HLSR)占54.55%;屎肠球菌中HLGR为79.17%,HLSR为45.83%.结论肠球菌所致感染以下呼吸道医院感染占首位.各菌种对抗菌药物的敏感率相差较大,微生物室必须做好菌种鉴定及药敏试验,以指导临床合理用药.
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耐万古霉素屎肠球菌并近平滑念珠菌重症胸腔感染1例报告
1 临床资料男性,32岁,因咳嗽、咳痰伴发热1月余于2003年3月11日入院.入院当天体温39.3℃,每日痰量约50 mL/d,黄色脓样痰.
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2007～2010年粪肠球菌、屎肠球菌耐药性变迁分析
目的 调查2007～2010年间航天中心医院粪、屎肠球菌临床分离株的耐药变迁情况.方法 使用Vitek 2全自动细菌检测分析系统对2007年1月至2010年5月从各类临床标本中分离的512株粪肠球菌和797株屎肠球菌进行菌株鉴定,并测定其对14种抗菌剂的敏感性.结果 4年间粪肠球菌的检出率变化不显著,屎肠球菌则显著增高.粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、呋喃妥因、万古霉素以及替考拉宁的耐药率变化均呈显著升高趋势.屎肠球菌对呋喃妥因、万古霉素、替考拉宁以及喹奴普汀/达福普汀的耐药率也呈上升趋势,而对其他抗菌剂的耐药率有不同程度的降低,其中以四环素下降为明显.结论 粪、屎肠球菌的检出率和耐药率均呈上升趋势,尤其万古霉素耐药株明显增多,应加强对其耐药性监测和防控,减少耐药菌株在院内感染及传播.
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粪肠球菌和屎肠球菌致病岛的研究现状
2002年,Shankar等在临床致病粪肠球菌中鉴定出第一个肠球菌致病岛,该岛大约150 kb大小,有129个开放阅读框(ORFs),携带致病所需基因和潜在毒力基因.粪肠球菌PAI的可塑性非常强,其基因丢失的频率和可能机制目前尚不清楚.2004年Leavis等在屎肠球菌中也发现了PAI类似结构.
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258株肠球菌耐药性分析及耐万古霉素基因检测
目的 研究肠球菌的耐药率及耐万古霉素肠球菌(VRE)的耐药表型和基因型.方法 按照美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)2009年推荐的微量稀释法进行临床分离肠球菌对各类药物的小抑菌浓度(MIC)检测,VRE进一步用E-test药敏试验确认;PCR法检测VRE的耐药基因.结果 2010年7月至2011年11月沈阳军区总医院共检出粪肠球菌95株,屎肠球菌163株.粪肠球菌对万古霉素、替考拉宁保持较高敏感度,对氨苄西林、青霉素、呋喃妥因三种抗菌药物敏感度也在65%以上,对其他抗菌药物敏感度低,统计期内未检出耐万古霉素粪肠球菌菌株.屎肠球菌对多数抗菌药物表现为耐药,对氯霉素敏感率为70%,对万古霉素、替考拉宁敏感度下降,为90.7%.期间检出15株VRE,其耐药表型为多重耐药,PCR扩增结果显示,15株万古霉素耐药屎肠球菌VanA基因扩增均为阳性,产物长度在700～1 000 bp之间,约783 bp,符合预期;VanB、VanC引物扩增均阴性.15株万古霉素耐药屎肠球菌对多数抗菌药物耐药,仅对氯霉素、四环素相对敏感,对万古霉素MIC>256 mg/L,对替考拉宁也表现为耐药.结论屎肠球菌耐药性高于粪肠球菌,VRE多为多重耐药,给临床治疗带来困难,医院应加强对其预防监测.
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肠球菌186株临床分布及耐药性分析
目的 了解肠球菌属的检出率和临床分布特点及耐药状况,为临床诊疗提供依据.方法 收集该院2011年6月至2013年6月常规培养检出的肠球菌属细菌共186株,分析其在各种临床标本中的分布特征及耐药状况.使用VITEK-2细菌分析系统进行鉴定并检测抗菌药物的低抑菌浓度,根据美国临床和实验室标准协会的指导原则判定细菌的耐药性.结果 186株肠球菌中屎肠球菌91株(48.9%)、粪肠球菌56株(30.1%)、鹑鸡肠球菌28株(15.1%)和其他肠球菌11株(5.9%).药敏试验中,除喹努普汀/达福普汀和四环素外,屎肠球菌对大多数抗生素的耐药率高于粪肠球菌;肠球菌属对克林霉素、红霉素、庆大霉素、四环素的耐药率较高,而除鹑鸡肠球菌对万古霉素天然耐药外,其余则对万古霉素、利奈唑胺、替加环素保持高度敏感性.结论 肠球菌感染以屎肠球菌和粪肠球菌为主,是该院细菌感染的重要致病菌,检测其分布和耐药性具有重要临床意义.
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石墨炉原子吸收光谱法测定尿中锰
[目的]建立一种石墨炉原子吸收光谱法测定尿中锰的方法.[方法]尿样用硝酸溶液稀释后,直接用石墨炉原子吸收法测定.[结果]石墨炉原子吸收法测定尿中锰,灰化温度可达1200℃,原子化温度为2400℃.标准曲线的线性范围为0.00～20.00μg/L,方法的检出限为0.2μg/L.测定样品的相对标准偏差在2.1%～4.6%L间,回收率在90.9%～106.8%之间.分别用标准加入法和标准曲线法测定不同尿样中的锰,经统计学处理,两者测定结果无显著性差异.[结论]该方法操作简便、迅速,具有良好的精密度和准确度,可用于尿中锰的测定.
关键词： 石墨炉原子吸收光谱法 锰 屎 -
屎肠球菌58株耐药性分析
目的:分析所分离58株屎肠球菌的临床分布及耐药性,为其感染治疗提供病原学调查及实验室依据,以指导临床合理用药,降低细菌的耐药性.方法:总结分离培养的屎肠球菌及药物敏感性实验结果,仪器采用美国BD公司的phoenix100全自动微生物鉴定/药敏系统.结果:从各类临床送检标本2257例中共分离屎肠球菌58株,其对万古霉素、替考拉宁、吗啉酮敏感率较高,对红霉素、利福平、环丙沙星、氧氟沙星、左氧沙星、青霉素、氨苄西林耐药率均为100%.高水平庆大霉素和链霉素耐药率分别为95.5%和60%.屎肠球菌对多种抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌.结论屎肠球菌是本院临床分离率较高的病原菌,其多重耐药现象较严重.
