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金荞麦提取物对IBS大鼠脊髓镇痛的干预机制
目的:观察金荞麦(Fagopyrum cymosum,Fag)提取物对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)样结肠刺激(colon irritation,CI)模型内脏高敏感性的改善作用以及对动物脊髓背角内5-HT及其受体的影响.方法:采用结肠刺激新生期乳大鼠来制作IBS样CI模型.CI大鼠成年后给予口服Fag 2 wk,并用腹壁撤退反射(AWR)评分来评价给药后CI大鼠内脏高敏感性的变化,取大鼠脊髓用免疫组织化学法观察5-HT免疫染色,用蛋白印迹法检测5-HTIA受体(5-HT1AR)、5-HT3A受体(5-HT3AR)表达.结果:和对照组比,CI组大鼠AWR评分明显增高(20 mmHg:0.625±0.518 vs 1.333±0.778;30 mmHg:0.750±0.463 vs 1.667±0.888;40 mmHg:1.125±0.641 vs 2.000±0.739;50 mmHg:1.500±0.926 vs 2.583±0.793;60 mmHg:2.125±0.991 vs 3.083±0.669;均P＜0.05)；且脊髓内5-HT染色度增加(11.250±4.833 vs 21.125±7.827,P＜0.01),5-HT3A受体表达升高(179.038±29.786,P＜0.01),5-HT1A受体则表达降低(64.523±16.873,P＜0.01)；高剂量Fag可降低CI大鼠AWR评分(20 mmHg:0.250±0.002; 30 mmHg:0.875±0.044;40 mmHg:1.250±0.036; 50 mmHg:1.875±0.050; 60 mmHg:2.625±0.037;均P＜0.05),并下调脊髓内5-HT(13.375±5.579,P＜0.05)和5-HT3AR的表达(114.200±20.983,P＜0.05),上调5-HT1AR的表达(93.008±13.523,P＜0.05)；低剂量Fag则对CI大鼠的影响不明显.结论:Fag对IBS样CI大鼠有镇痛作用,并通过调节其脊髓内5-HT及其受体来改善痛觉过敏.
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胆石六号汤剂对豚鼠胆色素结石模型胆囊收缩素A受体及5-羟色胺3a受体表达的影响
目的:探究胆石六号汤剂对胆色素结石豚鼠胆囊收缩素A受体(CCKAR)、5-羟色胺3a受体(5-HT3aR)表达的影响,从而为胆石六号汤剂的临床使用提供实验依据.方法:将40只雌性豚鼠随机分为空白组(n=10)、模型组(n=15)和胆石六号汤剂组(n=15),除空白组外,其余2组采用饮食诱发法建立胆色素结石模型.胆石六号汤剂组给予胆石六号汤剂7.7 g·kg-1灌胃治疗.30 d后观察各组的成石率、胆囊CCKAR、5-HT3aR基因和蛋白的表达情况.结果:模型组成石率为91.67％,显著高于空白组10.00％和胆石六号汤剂组26.67％.RT-PCR检测模型组中CCKAR、5-HT3aR基因的表达明显低于空白组和胆石六号汤剂组,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组化结果显示模型组5-HT3aR蛋白相对于空白组显著下降,而胆石六号汤剂组阳性表达相对于模型组显著上升,差异有统计学意义(P＜0.05).模型组CCKAR蛋白的表达相对于空白组有所下降,胆石六号汤剂组阳性表达相对于模型组有上升趋势,但是差异没有统计学意义(P＞0.05).结论:胆石六号汤剂显著影响了胆色素结石豚鼠胆组织CCKAR、5-HT3aR基因及蛋白的表达,其治疗胆色素结石的作用一定程度上是通过增加它们的表达来实现的.
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5-羟色胺3A型受体在成年小鼠杏仁体基底外侧核中间神经元内的表达
目的:研究5-羟色胺3A型受体(5-HT3A receptor; 5-HT3AR)在杏仁体基底外侧核中间神经元内的表达.方法:以成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠作为材料,利用免疫组织化学技术在激光共聚焦显微镜下观察成年小鼠杏仁体基底外侧核中5-HT3AR在不同类型中间神经元内的表达.结果:杏仁体基底外侧核中分布着大量的5-HT3AR免疫阳性神经元.5-HT3AR在小鼠杏仁体基底外侧核中Calretinin(CR)、血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)和Reelin免疫阳性的中间神经元中大量表达,而在Calbindin (CB)、Parvalbumin( PV)或Neuropeptide Y(NPY)免疫阳性的中间神经元中很少表达.结论:杏仁体基底外侧核中存在5-HT3AR免疫阳性中间神经元,不同类型的中间神经元中5-HT3AR的表达比例不同.
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5-羟色胺 3A 受体在成年小鼠海马中间神经元中的分布
目的:利用成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠,研究5-羟色胺3A受体(5-HT3AR)在海马中间神经元中的分布情况.方法:成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠经心脏灌注固定后,利用免疫荧光双标记方法,并结合激光共焦显微镜扫描技术,观察5-HT3AR在成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠海马中不同中间神经元内的表达和分布情况.结果:5-HT3AR在成年小鼠整个海马中都有分布,且主要在CA1区、CA2/CA3区和齿状回有大量5-HT3AR免疫阳性细胞；激光共聚焦显微镜下观察到5-HT3AR阳性产物在细胞核、细胞浆和树突上均有表达；免疫荧光双标实验结果表明5-HT3AR阳性产物在CB(calbindin),CR(calretinin),Reelin,Som(somatostatin),NPY(neuropeptide Y)和VIP(vasoactive intestinal peptide)免疫阳性神经元中表达,但在PV(parvalbumin)免疫阳性神经元中不表达.定量结果显示:几乎所有的VIP阳性神经元均表达5-HT3AR阳性,约3/4的CR阳性神经元表达5-HT3AR,约1/2的CB、Reelin、NPY和Som阳性神经元表达5-HT3AR阳性；约1/4的5-HT3AR阳性神经元中表达Reelin,1/5的表达Som,5-HT3AR/CB和5-HT3AR/CR双标神经元各占5-HT3AR阳性神经元的1/10左右.结论:5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠能够作为研究海马中5-HT3AR功能及其在中间神经元中的作用机制研究的工具鼠.
