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树形分子修饰的碳纳米管颗粒转染胰腺癌细胞BxPC3安全性的研究
目的 观察单壁碳纳米管-聚酰胺树形分子复合物(CNT-PAMAM-D)进入胰腺癌细胞的过程，评价其作为载体的安全性。方法 通过超声、搅拌及洗涤等方法制备CNT-PAMAM-D，用原子力显微镜和透射电镜观察其形态。将CNT-PAMAM-D与人胰腺癌细胞BxPC3共同培养12、48、72 h，收集细胞，在透射电镜下观察细胞内CNT-PAMAM-D的分布及细胞超微结构的改变。结果 PAMAM-D与CNT结合之后，树形分子包裹在CNT的表面，形成了20 nm左右大小的纳米复合物颗粒。CNT-PAMAM-D通过细胞吞饮方式被吞入BxPC3细胞，12 h后即大量进入细胞质内，随着时间延长，CNT-PAMAM-D还可进入溶酶体及细胞核中，但胰腺癌细胞的形态及超微结构无显著变化。结论 CNT-PAMAM-D是一种高效、安全的纳米载体。
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急性坏死性胰腺炎大鼠甲状腺滤泡旁细胞功能和超微结构的变化
目的 观察急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠甲状腺滤泡旁细胞超微结构和功能的变化,探讨ANP并发低钙血症的可能机制.方法 雄性Wistar大鼠32只,按数字表法随机分为假手术组(SO组)及ANP 3、6、12 h组.采用胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠溶液制备ANP模型.检测血淀粉酶、脂肪酶、降钙素及Ca2+水平.取胰腺组织常规病理检查,取甲状腺腺叶组织电镜下观察滤泡旁细胞超微结构改变.结果 ANP组6h的血淀粉酶、脂肪酶、降钙素水平分别为(4025±579) U/L、( 8272±794)U/L、(383.6±64.5) pg/ml,均显著高于SO组的(1063±129) U/L、(55±18) U/L、( 143.1±42.2) pg/ml；血清Ca2+水平为(2.41±0.12) mmoL/L,显著低于SO组的(2.97±0.12) mmol/L(P值＜0.05或＜0.01).ANP组12 h的血清降钙素水平为(317.1±78.2)pg/ml,较6h时显著降低(P＜0.01).ANP组大鼠甲状腺滤泡旁细胞核膜内陷,线粒体、游离核糖体增生,粗面内质网、高尔基体融合,分泌颗粒增多；6 h后细胞器开始减少并消失,仅余少量分泌颗粒.结论 ANP大鼠的甲状腺滤泡旁细胞结构和功能发生改变,从而导致低钙血症的发生.
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咬合支持丧失后大鼠海马区神经组织形态学变化的透射电镜观察
目的:研究咬合支持丧失对高龄大鼠神经组织形态学方面的影响,从而探讨咬合支持对维持生理功能的重要性.方法:24只10月龄Wistar大鼠随机分为对照组、单侧磨牙拔除组和双侧磨牙拔除组,6周后,大鼠快速断头处死,透射电镜观察大鼠海马区神经组织形态.结果:与对照组相比,拔牙组大鼠海马区神经细胞核溶解、细胞膜完整性破坏和一些重要的蛋白合成细胞器消亡,以及突触数量减少,其中以双侧磨牙拔除组变化更为明显.结论:咬合支持丧失后6周,大鼠海马区神经组织形态学发生退行性变.
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镉暴露小鼠生精细胞DNA损伤与Bcl-2和Bax表达率及超微结构改变
目的研究镉暴露对小鼠睾丸生精细胞DNA的损伤作用、bcl-2和Bax蛋白表达率及超微结构的变化.方法取24只雄性ICR小鼠随机分为4组,每组6只,分别以1、5、10μmol/kg氯化镉腹腔注射,每天1次,连续5 d,设阴性对照生理盐水组.于第6天用单细胞凝胶电泳(single-cell gel electrophoresis,SCGE)技术检测生精细胞DNA损伤情况,免疫组化法测定生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达阳性率,透射电镜观察生精细胞超微结构变化.结果腹腔注射1、5、10μmol/kg氯化镉组小鼠睾丸生精细胞DNA损伤率(分别为35.00%、61.25%、82.50%)明显高于对照组(14.75%),差异有统计学意义(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达阳性细胞率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),5μmol/kg组Bax蛋白表达细胞阳性率明显高于对照组和1、10μmol/kg组.透射电镜观察显示,3种剂量处理组生精细胞核染色质、核膜、线粒体和内质网超微结构发生不同程度的病理改变,并随着处理浓度的升高,超微结构改变程度加重.结论小鼠镉暴露可导致生精细胞DNA断裂,Bcl-2和Bax蛋白表达率发生变化,细胞超微结构发生病理性改变.
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旋转超滤:一种提取细胞外泌体的新方法
目的 建立一种利用旋转超滤技术从骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)培养上清液中分离外泌体(exosome)的方法.方法 收集BMSCs细胞培养上清,低速离心去除残余细胞,0.22 μm滤器过滤除去细胞碎片,采用旋转超滤技术提取外泌体.应用透射电子显微镜观察所获外泌体的形态,用蛋白质印迹法检测外泌体标记物CD63、CD9蛋白的表达,用CCK-8试剂盒检测外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖活性的影响.结果 使用旋转超滤技术成功分离出BMSCs分泌的外泌体,透射电镜下外泌体为圆形或椭圆形,直径约100 nm,蛋白质免疫印迹法检测结果显示外泌体中有其特异标记物CD63、CD9蛋白的表达.外泌体能够促进HUVECs增殖,并且其促细胞增殖作用随浓度增高而增强.结论 旋转超滤技术是一种简单有效的提取外泌体的方法.
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生物样品电镜超薄切片染色技术的改进
目的 提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量.方法 在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式.结果 在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色.结论 与传统方法相比省时省药,减少污染概率,电镜观察结构清晰,反差较好.
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反流性食管炎及非糜烂性胃食管反流病超微结构比较
目的 研究反流性食管炎与非糜烂性胃食管反流病(NERD)超微结构的特点.方法 随机选取反流性疾病诊断问卷调查评分(Sc)在12分以上的13例患者,经胃镜检查7例诊断反流性食管炎(A组),6例诊断NERD(B组),两组患者均取食管病理组织行透射电镜检查,其中7例患者行食管测压和24 h食管Ph监测检查.结果 反流性疾病诊断问卷提示A、B两组患者症状评分差别无统计学意义;24 h食管Ph监测A组患者较B组患者存在较多的病理性酸反流;而A、B两组患者食管鳞状上皮细胞间隙增宽程度接近.结论 胃食管反流患者均存在不同程度细胞间隙增宽,细胞间隙增宽可能导致NERD患者对生理性酸反流的高敏感性.
关键词： 食管炎 反流性 非糜烂性胃食管反流病 透射电子显微镜检查 -
大肠腺管开口分型的超微结构研究
目的 通过对大肠息肉的超微结构观察,分析其表面腺管开口形态(pit pattern)的演化过程与息肉性质发生改变的关系.方法 对50例大肠息肉患者行结肠放大内镜检查,结合内镜下黏膜染色对病灶行pit pattern分型,内镜或手术切除病灶,所有样本分别行组织病理学分析、扫描及透射电镜观察.结果 本组50例样本,pit pattern记录Ⅰ型10个、Ⅱ型8个、Ⅲ型15个、Ⅳ型9个、Ⅴ型5个、混合型3个.组织学诊断验证其阳性预测准确率达86%(43/50),鉴别腺瘤性息肉的准确率达94%(30/32).扫描电镜下Ⅰ、Ⅱ型隐窝规则洞状,隐窝周围细胞大小一致,吸收细胞微绒毛多,杯状细胞丰富;Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型隐窝逐渐变形,表面细胞及组织异型程度不断加重.透射电镜下Ⅰ、Ⅱ型腺上皮细胞排列整齐,连接紧密,腔面微绒毛规则,胞浆线粒体、内质网丰富,核卵圆形位于基底部,基底膜平滑连续;Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型腺上皮细胞绒毛逐渐稀疏紊乱,胞浆线粒体肿胀,内质网扩张,溶酶体数量增加,核异型、核分裂明显加重,基板逐渐出现中断或消失.结论 pit pattern的变化受大肠隐窝表面细胞的形态、比例以及构成等因素的影响,腺上皮细胞的超微结构变化是pit pattern形态和息肉性质发生改变的物质基础.
