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胰腺癌细胞TM4SF1的表达及其对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响
目的 检测5株人胰腺癌细胞株中TM4SF1 mRNA的表达,探讨TM4SF1基因对癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 采用实时PCR方法检测人胰腺癌细胞株MPanc96、MiaPaCa-2、HPAC、PANC1、AsPC-1的TM4SF1 mRNA表达,并与人正常胰腺导管上皮细胞(HPDE)的TM4SF1mRNA表达进行比较.应用RNA干扰方法将靶向TM4SF1的siRNA及阴性对照siRNA瞬时转染MPanc96、MiaPaCa-2细胞.采用MTS法检测转染细胞的增殖能力,Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力.结果 胰腺癌细胞株MPanc96、MiaPaCa-2、PANC1、AsPC-1、HPAC的TM4SF1 mRNA相对表达量分别为1.205±0.073、1.096±0.260、1.382±0.075、1.374±0.363、0.744±0.096,均显著高于HPDE的0.020±0.003(F =22.26,P＜0.01).与转染阴性对照siRNA的细胞比较,TM4SF1基因表达沉默的MPanc96、MiaPaCa-2细胞的增殖无显著变化,但细胞的迁移力分别降低(62.5±7.6)％、(72.8±4.0)％,侵袭能力分别下降(69.5±5.7)％、(78.6±6.3)％.结论 TM4SF1在人胰腺癌细胞中高表达,并增强胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力.
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TM4SF1在恶性肿瘤研究中的进展
TM4SF1是跨膜四蛋白超家族(TM4SFs)的一个远亲,在多种上皮性来源的恶性肿瘤及供应肿瘤的血管内皮细胞中呈高表达.TM4SF1调控血管内皮细胞的功能及肿瘤病理血管的生成,并参与肿瘤细胞新陈代谢及微环境的形成,调控肿瘤细胞的生长、侵袭、转移,并与不良预后相关.TM4SF1在癌细胞中选择性表达的特性,使其成为肿瘤放射免疫治疗和抗体靶向治疗中的一个有潜力的靶点.本文对TM4SF1的结构、功能及与人类肿瘤侵袭转移的相关研究进展及其临床应用前景进行综述.
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TM4SF1在人乳腺癌细胞 MCF-7和 MDA-MB-231中的表达及其对细胞增殖、迁移能力的影响
目的：探讨TM4SF1在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中的表达情况以及靶向抑制TM4SF1基因后2种细胞的增殖、迁移能力的变化。方法：采用RT-PCR检测MCF-7和MDA-MB-231细胞中TM4SF1 mRNA表达情况，以正常乳腺上皮细胞MCF-10A的TM4SF1 mRNA表达作为参照；应用TM4SF1 siRNA瞬时转染MCF-7、MDA-MB-231细胞，应用Western blot方法分析转染效果和TM4SF1蛋白表达情况；CCK-8法检测沉默TM4SF1前后2种细胞增殖能力的变化；划痕实验检测细胞的迁移能力。结果：MCF-7细胞中TM4SF1 mRNA表达量为（1．159±0．218），MDA-MB-231细胞中表达量为（1．396±0．199），均高于MCF-10A细胞中的表达量（0．016±0．004）（P均＜0．05）；且恶性程度较高的细胞MDA-MB-231高于低度恶性的MCF-7细胞（P＜0．05）。特异性转染TM4SF1 siRNA后，该基因表达被抑制，同时MCF-7和MDA-MB-231细胞的体外迁移能力下降（P均＜0．05），而细胞的增殖能力变化差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论：TM4SF1在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中高表达，并增强乳腺癌细胞的迁移能力。
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TM4SF1在脑胶质瘤组织的表达及其临床意义
目的 探讨TM4SF1在脑胶质瘤组织的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学方法测定98例人脑胶质瘤组织及9例正常脑组织中TM4SF1及CD34的表达,并分析TM4SF1与临床病理级别、生存期的相关性.结果 TM4SF1在正常脑组织中阴性表达,在胶质瘤组织中的阳性表达率为82.65％,差异有统计学意义(P=0.000).低级别和高级别胶质瘤组织阳性表达率分别为69.23％和91.53％,差异有统计学意义(P=0.004).CD34标记的微血管密度(MVD)在胶质瘤组织和正常脑组织中的表达均值分别为36.354±7.984和3.625±0.415,差异有统计学意义(P=0.000).MVD在TM4SF1表达阳性和阴性的胶质瘤组织中表达均值分别为:37.881±7.391和29.078±6.730,差异有统计学意义(P=0.000).单因素及多因素分析显示TM4SF1高表达是脑胶质瘤患者预后不良的独立危险因素(P =0.016).结论 TM4SF1的表达水平与胶质瘤的病理级别、患者的预后明显相关,并参与胶质瘤的血管新生.
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TM4SF1真核表达载体的构建及其对结直肠癌细胞株生物学功能的影响
目的：构建TM4SF1的真核表达载体并研究其对结直肠癌细胞株HCT116、DLD1迁移及侵袭功能的生物学特性影响。方法根据GenBank：BC034145.1中的TM4SF1的序列设计两条引物，用逆转录的方法获得开放阅读框（ORF区），并将其连接到质粒上，经鉴定后瞬时转染结直肠癌细胞株HCT116及DLD1，应用Western blot及细胞免疫化学方法检测其转染效果及表达情况，采用划痕及transwell实验观察其对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建PEZ-M29/TM4SF1真核表达载体， Western blot及细胞免疫化学实验结果显示TM4SF1表达上调可以促进结直肠癌细胞株的迁移及侵袭能力。结论成功构建TM4SF1真核表达载体，TM4SF1的上调表达可提高结直肠癌细胞株HCT116、DLD1的迁移及侵袭能力，提示TM4SF1与结直肠癌侵袭转移密切相关，为进一步阐明TM4SF1在结直肠癌转移中的作用及相关机制奠定基础。
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TM4SF1蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义
目的：探讨跨膜四超家族成员1（transmembrane 4 super family 1，TM4SF1）蛋白在人卵巢组织中的表达及其与上皮性卵巢癌临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SP法检测16例正常卵巢上皮组织、23例上皮性卵巢良性肿瘤组织及55例上皮性卵巢癌癌组织中TM4SF1蛋白的表达情况，分析其与上皮性卵巢癌临床病理因素及预后的关系。结果①TM4SF1蛋白在上皮性卵巢癌癌组织中的阳性表达率（90.90%）高于上皮性卵巢良性肿瘤组织（65.22%）及正常卵巢上皮组织（25.00%）的阳性表达率，差异有统计学意义（P<0.05）。于TM4SF1蛋白在正常卵巢上皮细胞中的表达主要位于上皮细胞的细胞膜和细胞膜近基底膜处及细胞质中，在卵巢良性肿瘤组织中的表达主要集中在肿瘤细胞的细胞膜近基底膜处及细胞膜其他部位，而在卵巢癌细胞中则主要分布于癌细胞的细胞质中。③Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌患者TM4SF1蛋白的阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期患者，中低分化癌患者TM4SF1蛋白的阳性表达率高于高分化癌患者（P<0.05）。④TM4SF1蛋白的阳性表达率与组织学类型、腹水量的多少无明显相关（P>0.05），而与FIGO分期及组织学分级明显相关（P<0.05）。⑤Cox比例风险回归模型多因素分析显示TM4SF1蛋白在卵巢癌癌组织中的阳性表达不是影响患者生存的独立预后因素。结论 TM4SF1蛋白在上皮性卵巢癌癌组织中呈高表达，可能与卵巢癌的发生、发展相关。
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TM4SF1mRNA在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床价值
目的:探讨有4个跨膜区的L6超家族成员1(transmembrane 4 L six family member 1,TM4SF1)基因在上皮性卵巢癌(卵巢癌)组织中的表达及其临床价值.方法:用RT-PCR法检测TM4SF1基因在36例卵巢癌、15例卵巢良性肿瘤、13例正常卵巢组织中的表达.结果:TM4SF1基因在卵巢癌中表达为(0.173±0.054)、良性肿瘤为(0.134±0.015)、正常卵巢组织为(0.118±0.008).癌组织中的表达水平高于卵巢良性肿瘤(P=0.031);癌组织中的表达水平高于正常卵巢组织(P=0.004);良性卵巢肿瘤组织中的表达水平高于正常卵巢组织(P=0.012);手术-病理分期为Ⅰ-Ⅱ期癌组织中的表达水平(0.124±0.02)低于Ⅲ期(0.164±0.024)(P<0.05);高分化癌组织中的表达水平为(0.091±0.052),中-低分化癌组织表达为(0.113±0.024)(P>0.05).结论:TM4SF1基因的表达与卵巢癌相关,可能在卵巢癌的发生、发展过程中起一定作用.
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TM4SF1对人脐静脉内皮细胞管腔形成的影响
目的：研究TM4SF1对内皮细胞体外管腔形成的影响。方法应用qRT-PCR方法检测人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中TM4SF1的mRNA表达量；应用siRNA方法瞬时转染HUVECs，采用qRT-PCR方法检测转染48 h与72 h后TM4SF1的沉默效果，选择佳的转染时间，应用In Vitro Angiogenesis Assay Kit观察siControl与siTM4SF1转染后HUVECs体外管腔形成情况。结果 qRT-PCR实验结果显示，HUVECs中表达TM4SF1的RQ值为(0.71±0.11)，已知高表达TM4SF1胰腺癌细胞株MPanc96表达TM4SF1的RQ值为(0.56±0.13)，两种细胞中TM4SF1表达量差异无统计学意义(P>0.05)；siRNA瞬时转染HUVECs 48 h与72 h后，TM4SF1表达分别下降了47.06%与93.14%，HUVECs瞬时转染72 h后进行体外管腔形成实验，通过对管腔形成情况进行评级，siControl转染后HUVECs管腔形成情况为5级(多个闭合管状结构相连形成筛状)，siTM4SF1转染后为2级(细胞排列形成夹角)。结论 TM4SF1在HUVECs中高表达，沉默TM4SF1后可以明显抑制HUVECs的体外管腔形成，提示TM4SF1与肿瘤血管形成相关。
