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隐匿性乙型肝炎病毒感染的检测及其临床应用价值
统一隐匿性乙型肝炎病毒感染（occult hepatitis B virus infection，OBI）的检测和判定标准已成为临床应用实践中面对的重要课题之一，尤其应进一步对OBI的分子机制及分子模式发生频率的不同进行细致、深入的探究，为更进一步阐明OBI的临床及公共卫生学价值奠定基础，OBI的检测具有积极的现实意义和深远的临床实践意义。
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妊娠合并隐匿性或显性乙型肝炎病毒(HBV)感染对早产发生率的影响
目的 探讨妊娠合并隐匿性或显性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染对早产发生率的影响.方法 采用前瞻性队列研究设计,以2012年6月1日至2013年3月15日间安庆市立医院所有住院分娩的孕妇为研究对象,纳入妊娠结局为单胎活产的孕妇,收集其血清并进行HBV表面抗原和HBV S基因片段的检测,并通过医院电子病历系统收集孕妇人口学信息等资料,采用单因素和多因素统计方法分析妊娠合并隐匿性和显性HBV感染对早产发生率的影响.结果 孕妇早产发生率为21.00％(189/900);其中隐匿性HBV感染组、显性HBV感染组和非HBV感染组孕妇在人口学特征方面相似可比,其早产发生率分别为20.51％(16/78)、20.00％ (14/70)、21.14％(159/752).单因素与多因素分析未发现早产发生率与HBV感染相关,以非HBV感染组为参照,多因素COX回归分析发现显性HBV感染、隐匿性HBV感染与早产间调整后相对危险度(adjusted risk ratio,RRa)分别为1.03(0.81,1.32)和0.99(0.78,1.25);以同样参照,多因素线性回归分析发现孕周与HBV感染状况的回归系数β为0.09(-0.14,0.31).结论 妊娠合并隐匿性或显性HBV感染与早产的发生率无明显相关.
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核酸检测技术在献血者HBsAg筛查中的意义
目的:回顾性分析献血者HBsAg项目的筛查结果,探讨核酸检测技术(NAT)在献血者血液筛查中的应用价值.方法:采用两个厂家的酶联免疫吸附实验(ELISA)检测试剂盒对献血者开展HBsAg筛查;ELISA检测阴性的献血者标本,采用罗氏诊断cobass201系统进行HBV-DNA检测.结果:在14 642份经过两遍ELISA检测HBsAg阴性标本中,检出13份HBV-DNA阳性,阳性检出率约为0.089％.结论:在经过两次ELISA检测HBsAg阴性的献血者中,仍然存在一定比例的HBV-DNA阳性,给临床输血安全带来较大的风险;血站应用ELISA联合NAT的血液筛查策略,能有效降低临床输血传播HBV的风险.
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华东地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染及S区变异分析
目的 了解安徽、福建、江西三地血液中心无偿献血者隐匿性乙型肝炎病毒(OBI)感染情况,探讨HBV基因分型特征及S区氨基酸变异特点.方法 对2013年1月-2014年5月安徽省血液中心、2013年6月-2013年11 月、2014年3月-2014年12月福建省血液中心、2013年6月-2013年9月江西省血液中心乙肝表面抗原酶联免疫法检测阴性(HBsAg-)、核酸HBV鉴别试验阳性(NAT+)的102例无偿献血者标本进行抗-HBc检测,同时应用巢式PCR方法对这些标本进行HBV S区扩增并测序,采用MEGA 6软件进行HBV基因分型及S区氨基酸突变分析.结果 在安徽省血液中心123 046例无偿献血者中筛查出21例HBsAg-NAT+无偿献血者标本,OBI感染率为0.017％(21/123046),其中76.2％(16/21)为抗-HBc阳性,这21例标本中,15例扩增出HBV S区片段,8例B型,7例C型;福建省血液中心HBsAg-NAT+无偿献血者标本共51例,76.5％(39/51)为抗-HBc阳性,其中16例扩增出HBV S区片段,14例B型,2例C型;江西省血液中心HBsAg-NAT+献血者标本共30例,80％ (24/30)为抗-HBc阳性,其中4例扩增出HBV S区片段,1例B型,3例C型.35例扩增产物的OBI标本中,74.3％(26/35)出现HBV S基因MHR区氨基酸置换突变,主要集中在乙型肝炎病毒“α”决定簇区域.结论 安徽地区无偿献血者OBI感染率为0.017％,福建及江西地区也有一定OBI感染;成功扩增HBV S区的OBI标本中,抗-HBc阳性率为安徽73.3％、福建93.8％、江西100％;B型为主要HBV基因型;HBV S基因MHR区变异,尤其是HBsAg“α”决定簇区置换突变,可能是OBI形成原因之一.
关键词： 献血者 隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI) S区 变异 -
无偿献血者隐匿性乙型肝炎病毒Pre-S/S区变异的研究
目的 调查无偿献血人群的隐匿性乙型肝炎病毒感染( OBI)流行率情况与分析Pre-S/S区变异特征.方法 使用EIA/NAT方法筛查深圳地区15 338人份无偿献血者血标本,经跟踪检测,获得1例HBV窗口期感染毒株和5例OBI毒株,采用荧光定量聚合酶链反应(QPCR)测定OBI病毒载量,应用巢式聚合酶链反应(Nested-PCR)技术从5例OBI样品中获得3例Pre-S/S基因片段并测定序列,进行基因分型,与对应基因型HBsAg阳性野毒株序列比对.结果 深圳市无偿献血者隐匿性乙型肝炎病毒感染( OBI)的流行率为1:3 068.5例OBI样品其病毒载量为＜1 IU/ml(不能定量)～121.8 IU/ml(中位数为54.6 IU/ml).3例OBI样本为基因C型,在Pre-S/S蛋白区出现随机变异,OBI样品Pre-S/S区氨基酸置换率显著高于对应基因型野毒株(P＜0.01),其中在Pre-S/S区的免疫表位区氨基酸置换率亦显著高于野毒株(P＜0.01),但在高频变异的主要素水区(MHR)却是高度保守,只有1例OBI出现改变基因亚型的I126S变异.结论 乙肝病毒的Pre-S/S蛋白区变异,特别是Pre-S/S蛋白免疫表位区的变异,可能是OBI发生机制之一.
关键词： 无偿献血者 隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI) 流行率 Pre-S/S区 变异特征 -
广东阳江地区隐匿性乙型肝炎病毒检出率与分子生物学特性分析
目的 调查和分析广东省阳江地区人群的隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的检出率与分子生物学特征.方法 随机收集广东阳江地区非肝脏性疾病住院患者和健康人群HBsAg阴性血清标本138(人)份,采用巢式聚合酶链反应(Nested-PCR)扩增标本中HBV BCP/PC DNA片段(核苷酸序列区间位nt1679-1973)并测定序列;采用荧光定量聚合酶链反应(QPCR)测定OBI病毒载量.结果 在138人(份)HBsAg阴性血清标本中,29份为HBVDNA阳性,确认为OBI,其病毒载量介于不可定量(<1 IU/ml)至1 008.9 IU/ml之间,中位数(M)为8.8 IU/ml;抗-HBc阳性健康人群中OBI的检出率名显高于其他HBV血清学标记阳性的标本(P<0.05).29份OBI标本中有19份的BCP/PC序列出现变异,3份出现缺失,1份出现G1896A/G1899A双位点变异,1份出现G1764A变异;10份标本在CURS和Enh2调控区发生变异.结论 阳江地区健康人群的OBI检出率较高,OBI的产生及其低病毒载量存在可能与病毒核心蛋白(C)调控区序列变异相关.
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大连地区无偿献血者隐匿性乙型肝炎病毒感染pre-S/S区基因分析
目的 了解大连地区无偿献血者隐匿性肝炎乙型病毒感染(OBI)的情况和pre-S/S区基因的变异情况.方法 对大连市血液中心2010年12月2日-2013年5月31日的无偿献血者血液标本进行常规ELISA(HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP)和HIV/HBV/HCV联合NAT筛查,对于单独核酸检测反应性的献血者加以跟踪或回溯,结合 乙型肝炎血清学标志物的试验、鉴别试验、病毒定量试验和半巢式PCR来确定OBI,同时对OBI的pre-S/S区基因序列与对照组(HBsAg+序列,Genbank)做比对分析.结果 共筛查158 232份血液标本,确定了其中的69份OBI,流行率为1∶2 293(69/158 232).41例OBI获得pre-S/S区基因序列:B型6例、C型34例、D型1例;与对照组相比,OBI在S区的氨基酸序列的变异明显(PB =0.013; PC =0.003),主要变异位点为B型的V14G/A、Y161F/S、V168A、P217L和C型的E2G/A/V、T118R/K/A/M、P127T/L/H/S、E164D/G、L175S、S174N.结论 大连地区献血者OBI在HBV基因组S区的氨基酸序列存在多个位点的变异,这些变异与OBI的产生存在某种关系,且这种关系受基因型的影响.
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深圳地区无偿献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染血清学和分子生物学特征分析
目的 了解深圳地区无偿献血人群中隐匿性乙型肝炎病毒(OBI)感染情况,分析无偿献血者中OBI的BCP/PC区和S区变异特征.方法 应用ELISA和NAT方法筛查深圳地区84 865(人)份无偿献血者血液标本,对HBsAg-/HBV DNA+标本做BCP/PC、S区及全基因序列巢式-PCR扩增以及病毒载量的测定,对检测的病毒序列做基因分型和与HBV野毒株序列比对分析.结果 深圳地区无偿献血者HBsAg-/HBV DNA+检测率为1∶2 652(32/84865),这类标本的ALT均正常(＜40);其中OBI检出率为1∶3 031(28/84 865),28例OBI中22例为B基因型、4例为C基因型、2例未能确定基因型.OBI血清型分类中21例为adw、4例为adr、1例为ayr、2例未确定.所有OBI标本的病毒载量为＜10 ～1 701(中位数116)IU/mL.BCP/PC区有35.7％(10/28)的标本出G1896A突变,B型标本在MHR第1个袢状结构区(aa124-aa137)氨基酸的置换频繁.结论 深圳地区无偿献血者中存在着相对较高的OBI;其OBI标本中BCP/PC区的碱基突变以及B型的主要亲水区(MHR)氨基酸的置换可能是其发生发展的机制之一.
关键词： 隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI) 血清型、基因型 乙型肝炎病毒 无偿献血者 深圳 -
献血者HBV DNA存在的确认与S蛋白变异特征分析
目的 对HBsAg阴性和阳性献血者血样HBV DNA存在的确认并分析隐匿性乙型肝炎病毒S区变异特征.方法 使用EIA/NAT方法筛查深圳地区19 397份无偿献血者血样,把109例乙肝不合格样品分成3类(HBsAg+/NAT+、HBsAg +/NAT-、HBsAg-/NAT+),通过跟踪检测,确认为OBI毒株10例、HBV窗口期感染期3例和5例缺失追踪的HBsAg-/HBV DNA+样品,采用荧光定量聚合酶链反应(QPCR)测定HBV病毒载量,应用Nested-PCR技术扩增S基因片段并测定序列,与B/C基因型HBsAg+/HBV DNA+阳性野毒株序列比对.结果 深圳市无偿献血者经乙肝表面抗原胶体金快速试纸筛查后的HBsAg阳性检出率为0.34％ (66/19 397);隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的流行率范围为1∶1 939-1∶1 293,HBV窗口期感染流行率范围为1∶6 465-1∶2 424;10例OBI样品其病毒载量介于不能定量至112.0 IU/mL(中位数98.5 IU/mL).10例OBI样本在S蛋白区(nt215-710)出现随机变异,OBI样品S区氨基酸置换率显著高于野毒株(P ＜0.000 1),有4、2、3个OBI样品分别在CTL表位21-29、86-96、172-180出现L21S(2)、K/R24E(1)、I25M(1)、L88P(2)、S172F/L(2)、V178T(1)变异;OBI非CTL表位免疫区的氨基酸置换率亦显著高于野毒株(P＜0.05);其中1个OBI样品在nt636发生缺失变异.结论 深圳献血者OBI流行率有增高趋势,OBI发生机制与乙型肝炎病毒的S蛋白区变异,特别是免疫活性区的变异密切相关.
关键词： 无偿献血者 隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI) 流行率 S区 变异特征
