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重组人B型利钠肽抑制氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞氧化应激及炎症反应
目的 探讨重组人B型利钠肽(rhBNP)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞氧化应激和炎症反应的抑制作用. 方法 建立ox-LDL干预THP-1源巨噬细胞的模型,分为3组:对照组、100 μg/ml ox-LDL组和100 μg/ml ox-LDL+ 10-9mol/L rhBNP组.收集各组细胞,应用共聚焦显微镜测定细胞内活性氧(ROS)水平,采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)及生物化学法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)基因的表达及活性,采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素37(IL-37)的水平. 结果 与对照组相比,100 μg/ml ox-LDL组的ROS水平升高(527.30％±36.20％比100.00％±0.00％),SOD mRNA的表达和活性降低[0.53 ±0.18比1.00±0.00;(256.60±8.20) U/ml比(355.80±9.58) U/ml],MDA mRNA的表达和含量升高[1.59±0.23比1.00±0.00;(29.40±1.68) nmol/ml比(5.94±0.51) nmol/ml],IL-37水平降低[(48.05±3.01) ng/L比(57.82±2.26) ng/L](均为P＜0.05);与100 μg/ml ox-LDL组相比,100 μg/ml ox-LDL+ 10-9mol/LrhBNP组的上述指标均有所改善[237.30％±30.62％,0.90±0.07,(310.40±2.97) U/ml,1.14±0.10,(20.54±1.55)nmoWml,(53.06±1.87) ng/L,均为P＜0.05]. 结论 NBNP可能通过提高SOD表达及活性,上调IL-37水平,而抑制ox-LDL诱导的THP-1源巨噬细胞的氧化应激及炎症反应.
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重组人脑利钠肽抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡及其相关机制
目的:观察重组人脑利钠肽(rhBNP)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1源巨噬细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制.方法:建立ox-LDL诱导巨噬细胞凋亡的模型.收集干预好的细胞,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化;应用共聚焦显微镜测定细胞内活性氧(ROS)水平.结果:ox-LDL以浓度依赖方式诱导巨噬细胞凋亡,与control组相比,100 μg/ml ox-LDL呈现出大的凋亡率[(45.62±2.76)％:(6.81±1.94)％,P＜0.05].rhBNP可以抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡,在10-9mol/L抑制作用大(18.56±1.79)％,P＜0.05.与control组相比,100 μg/ml ox-LDL组ROS水平升高,而线粒体膜电位降低[(527.30±36.20)％∶ (100.00±0.00)％,(3.01±0.52)％∶(9.67±0.51)％,P＜0.05];109mol/L rhBNP逆转这些变化[(237.30±30.62)％,(6.55±1.57)％,P＜0.05].结论:rhBNP抑制ox-LDL诱导的THP-1源巨噬细胞凋亡,其机制可能与调节氧化应激及抑制线粒体电位降低相关.
关键词： THP-1源巨噬细胞 氧化型低密度脂蛋白 重组人脑利钠肽 动脉粥样硬化 -
LncRNA-PVT1在巨噬细胞炎症反应中的表达及与炎症基因相关性研究
目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)PVT1在LPS诱导THP-1源巨噬细胞炎症反应中的表达及其与炎症基因表达相关性,推测lncRNA-PVT1在脓毒症急性肺损伤炎症反应中的可能作用.方法:通过LPS刺激THP-1源巨噬细胞产生炎症反应造模,利用RT-qPCR检测,比较不同刺激浓度(0、0.5、5.0μg/ml,8 h)下各组细胞中lncRNA-PVT1及TNF-α、IL-1βmRNA表达情况.结果:与对照组相比,IL-1β 及TNF-αmRNA在LPS不同刺激浓度下,均表达上调,且具有统计学差异(均P<0.05).随着刺激浓度增加,IL-1β及TNF-αmRNA表达量上升,呈浓度依赖,在LPS 5.0μg/ml作用8 h下,IL-1β 及TNF-αmRNA表达量达峰值.与对照组相比,在5.0μg/ml LPS组中lncRNA-PVT1表达明显上调,具有统计学差异(P<0.0001).相关性分析发现5μg/ml LPS刺激8 h后,THP-1源巨噬细胞中lncRNA-PVT1相对表达量分别与IL-1β 及TNF-αmRNA相对表达水平呈正相关(分别为R2<0.6134,P=0.0125;R2<0.7825,P=0.0015).结论:LncRNA-PVT1在LPS致THP-1源巨噬细胞炎症反应中高表达,且与TNF-α及IL-1βmRNA表达呈正相关,提示该lncRNA-PVT1在脓毒症急性肺损伤炎症反应中可能起重要作用.
关键词： 急性肺损伤 脓毒症 长链非编码RNA PVT1 THP-1源巨噬细胞
