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内皮素-1及其受体拮抗剂对血管平滑肌细胞凋亡的影响
目的探讨内皮素-1(ET-1)及其特异性内皮素A受体(ETA-R)拮抗剂(BQ123)对脐动脉血管平滑肌细胞(HUSMC)凋亡的影响.方法组织块培养HUSMC,传代后分为对照组、ET-1组、BQ123+ET-1组.流式细胞术测定细胞核DNA降解规律、凋亡细胞数、及细胞周期中各时相细胞的变化.结果ET-1组可见明显Ap峰,凋亡细胞百分比(13.86%±4.85%)较对照组(1.58%±0.23%)显著增加(P＜0.05).ET-1组HUSMC的G0/G1期细胞百分数(31.56%±2.73%),较对照组(71.15%±1.34%)明显降低(P＜0.01).S期细胞百分数(37.65%±3.01%)和G2/M期细胞百分数(30.78%±0.30%),分别较对照组(19.10%±1.99%)和(12.21%±1.86%)明显升高(P＜0.01).BQ123+ET-1组各期细胞百分数与相应对照组比较,统计学均无差异(P＞0.05).结论ET-1促HUSMC凋亡和增殖的程度不同,产生增殖与凋亡的失平衡.BQ123可完全抑制ET-1的上述作用,具有临床应用前景.
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子痫前期脐血清对脐动脉平滑肌细胞功能影响的体外研究
目的:探讨子痫前期(PE)患者脐静脉血清对脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)前胶原Ⅰ、ⅢmRNA表达及核因子-κB(NF-κB)活性的影响.方法:采用组织块培养法培养正常妊娠HUASMC,传代后待细胞长满至70%～80%分别加入正常妊娠及子痫前期脐静脉血清,培养2 h,Western Blot测定细胞胞浆核因子-κB抑制因子(Ⅰ-κB)及胞核NF-κB蛋白表达;培养48h,MTT测定细胞活力,流式细胞学测定细胞凋亡,RT-RCR测定细胞前胶原Ⅰ及ⅢmRNA的表达.结果:子痫前期重度患者脐静脉血清培养的HUASMC胞浆Ⅰ-κB表达及细胞凋亡率明显低于正常妊娠组(P＜0.01);胞核NF-κB表达、细胞活力、前胶原ImRNA的表达明显高于正常妊娠组(P＜0.01).结论:子痫前期重度患者脐静脉血清可促进HUASMC增生及Ⅰ型胶原的表达,NF-κB的激活在子痫前期患者脐静脉血清促HUASMC增生及Ⅰ型胶原表达过程中起桥梁作用.
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IGF-1诱导PI3K-Akt通路磷酸化对平滑肌细胞的作用
目的 比较胰岛素生长因子-1(IGF-1)对人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC)和脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)增殖的影响并探讨其机制.方法 采用人源HUVSMC和HUASMC进行研究,噻唑蓝(MTT)法检测IGF-1对两种细胞增殖的影响,并通过Western blotting技术检测IGF-1对两种细胞中PI3K-Akt信号通路的影响.结果 不同浓度的IGF-1对HUVSMC和HUASMC的增殖都有明显的促进作用,但对HUVSMC的促增殖作用明显高于对HUASMC.进一步检测PI3K-Akt信号通路,IGF-1可激活PI3K-Akt信号通路,并且IGF-1对HUVSMC的激活明显强于HUASMC.IGF-1R抗体或wortmannin(渥曼青霉素)明显抑制IGF-1对细胞增殖的促进作用.结论 IGF-1可明显促进SMC增殖,并且在HUVSMC更为明显;IGF-1主要通过激活PI3K-Akt信号通路来促进平滑肌细胞的增殖.冠状动脉搭桥术(CABG)后静脉移植物比动脉移植物更容易发生内膜增生的原因可能就在于此.
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川芎嗪对子痫前期脐血清诱导脐动脉平滑肌细胞胶原表达的体外研究
目的探讨子痫前期患者血清诱导脐动脉平滑肌细胞(HUSMC)前胶原I、III的表达及川芎嗪对其的影响.方法采用组织块培养法培养正常妊娠HUSMC,传代后待细胞长满至70%～80%后,加或不加川芎嗪作用30min后分别加入正常妊娠及子痫前期脐静脉血清,培养48h后,MTT测定细胞活力,流式细胞学测定细胞周期,RT-PCR测定SMC前胶原I、III的表达.结果:子痫前期患者脐静脉血清培养HUSMC的细胞活力、前胶原ImRNA的表达、S及G2/M期细胞百分比明显高于正常妊娠组,G0+G1期细胞百分比明显低于妊娠组.加川芎嗪预处理后:子痫前期组HUSMC活力、前胶原I的表达、G2/M期细胞百分比明显下降,G0+G1期细胞百分比明显增加(P均＜0.01).结论子痫前期患者脐静脉血清可促进HUSMC增生及I型胶原的表达,川芎嗪可抑制HUSMC的增生及胶原形成,发挥其对子痫前期的防治作用.
