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磷酸酶与张力蛋白同源物基因过度表达抑制乳鼠心脏成纤维细胞增殖
目的 将携带有张力蛋白同源物基因(PTEN)的重组腺病毒载体转染乳鼠心脏成纤维细胞,观察心脏成纤维细胞过度表达野生型PTEN对其增殖的影响.方法 分离培养心脏成纤维细胞,以携带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-PTEN转染上述细胞,荧光倒置显微镜下观察GFP表达情况,确定佳感染倍数(MOI).原代心脏成纤维细胞接种至96孔板,转染Ad-PTEN[Ad-PTEN转染组(MOI根据生长曲线确定)],并设正常对照组(加入等体积培养基),以MTT的方法检测其吸光度(A),以反映细胞增殖情况,将转染效率达到90%以上成纤维细胞及正常对数生长期成纤维细胞消化,制成单细胞悬液,流式细胞仪分别检测细胞周期,以吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)法分别检测Ad-PTEN转染组和正常对照组细胞凋亡情况;结果 MTT测定的结果:48 h后Ad-PTEN转染组的A显著低于该时间点正常对照组(P＜0.05).流式细胞仪检测结果发现Ad-PTEN转染的成纤维细胞出现G1期阻滞;AO/EB法检测发现Ad-PTEN转染的成纤维细胞其细胞凋亡率与正常对照组细胞无显著差异;结论 PTEN基因过度表达将引起乳鼠心脏成纤维细胞增殖受抑制,该现象与细胞周期G1期阻滞有关.
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MMP-2和PTEN蛋白在膀胱癌组织中的表达及临床意义
目的:探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metaloproteinase-2,MMp-2)和PTEN蛋白在膀胱癌组织中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学PV-6000通用型二步法检测65例膀胱癌及10例正常膀胱组织中MMP-2和PTEN蛋白的表达.结果:MMP-2在正常膀胱组织中不表达,在65例膀胱癌组织中的阳性表达率为56.9%;随着肿瘤细胞病理分级、临床分期的增加,MMP-2阳性表达率逐渐增高,各组间比较差异有统计学意义,P＜0.05.PTEN蛋白在正常膀胱组织中均呈阳性表达,在65例膀胱癌组织中的阳性表达率为46.2%;随着癌细胞病理分级、临床分期的增加,PTEN蛋白阳性表达率逐渐减低,各组间比较差异有统计学意义,P＜0.05.结论:MMP-2和PTEN蛋白异常表达与膀胱癌的发生发展关系密切,检测两者在膀胱癌组织中的表达,可作为判断膀胱癌发生发展的有用指标.
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FHIT、PTEN蛋白在胃癌中的表达及意义
目的:探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因和张力蛋白同源、第10染色体丢失的磷酸酶基因蛋白(PTEN)在胃癌中的表达及其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和图像分析技术检测了80例胃癌组织及癌旁组织中FHIT和PTEN基因蛋白的表达.结果:80例胃癌组织中FHIT和PTEN蛋白阳性表达率分别为45%和51.3%,在癌旁组织中分别均为100%,其差异均有统计学意义(P＜0.05).FHIT蛋白的表达与胃癌的分化程度、浆膜浸润、淋巴转移无关(P＞0.05),而与肿瘤分期有关(P＜0.05).PTEN蛋白的表达与胃癌的分化程度、浆膜浸润、淋巴转移、肿瘤分期均有关(P＜0.05).结论:FHIT和PTEN基因蛋白缺失在胃癌发生发展起重要作用,二者可作为判断胃癌生物学行为和临床预后的参考指标.
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正常和OVX大鼠体外骨髓破骨细胞样细胞培养方法的建立
目的：建立正常和OVX大鼠体外骨髓破骨细胞样细胞(OLC)培养方法。方法：取不同时间大鼠骨髓，用αMEM和1,25(OH)2D3在24孔培养板上培养7天后观察OLC形成。结果：体外OLC细胞TRACP阳性，电镜下骨片有骨吸收现象。不同时间OVX大鼠OLC数明显高于正常大鼠(P＜0.05)。结论：OVX大鼠因雌激素明显降低，破骨细胞形成增多，骨吸收增加，导致骨质疏松发生。
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肺癌组织中PTEN P63和P27蛋白的表达及意义
目的 检测10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)、P63和P27蛋白在肺癌组织中的表达,分析其与肺癌临床病理因素的关系.方法 采用免疫组织化学S-P法检测PTEN、P63和P27蛋白在肺癌组织和正常肺组织中的表达情况.结果 PTEN、P63和P27在肺癌组织中的阳性表达率分别为27.3%(18/66)、33.3%(22/66)和21.2%(14/66),与三者在正常肺组织中的阳性表达率90.0%、70.0%和70.0%比较差异有统计学意义(P＜0.01).PTEN和P63在高、中分化鳞癌及低分化鳞癌的阳性表达率分别为55.6%和0.0%(P＜0.01).PTEN和P63、PTEN和P27、P63和P27的共同阳性表达率分别为13.6%、6.1%和9.1%,PTEN与P63表达呈正相关性(P＜0.01).Cox多因素分析显示PTEN和P27在模型中呈负相关,患者的预后危险度相对较小,具有统计学意义.结论 PTEN、P63和P27蛋白在肺癌组织中较肺止常支气管黏膜上皮表达率低,显示其失表达可能在肺癌的发生中起一定作用.PTEN和P63表达率在高、中分化鳞癌显著高于低分化鳞癌,显示PTEN和P63的表达与肺鳞癌的分化程度有关.PTEN和P63的表达呈正相关性,二者可能有协同作用.PTEN、P63和P27蛋白检测有可能作为诊断肺癌和评价肺癌恶性程度及预后的重要指标.
