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C2基因对人胃癌细胞生长特性的影响
目的探索新克隆的编码人蛋白翻译起始因子的全长基因(C2基因)对人胃癌细胞生长特性的影响. 方法将已构建的C2基因真核表达载体扩增纯化并转染人胃癌细胞系SG C 7901细胞,获得稳定转染细胞系,用流式细胞仪和免疫组化检测其C2蛋白表达状况,应用细胞计数法和四唑蓝比色试验绘制转化细胞的生长曲线.结果 C2基因转化的细胞高水平稳定表达C2蛋白,C2基因转化细胞生长速度减慢,其对数生长期为11d,较对照空载体转染细胞的(7d)明显延长. 结论 C2基因转染可引起胃癌细胞生长速度减慢,可能是一种潜在的蛋白翻译水平的抑癌因素.
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C2基因对人胃癌细胞成瘤性的影响
目的探索新克隆的编码人蛋白翻译起始因子的全长基因(C2基因)对人胃癌细胞体内、体外成瘤性的影响.方法将已构建的C2基因真核表达载体,与阴性对照的空载体扩增纯化并同时转染人胃癌细胞系SGC7901细胞,获得稳定高表达C2蛋白的人胃癌细胞株,应用平板克隆形成实验检测转化细胞的体外成瘤性,并在裸鼠体内进行肿瘤细胞体内成瘤性实验,了解C2基因转染对人胃癌细胞体内、体外成瘤性的影响.结果经Western Blot法和流式细胞术证实,C2基因转化细胞稳定高表达C2蛋白.平板克隆形成实验提示:转染了C2基因和空载体的两种SGC7901细胞的克隆形成率分别为43 8%和76 9%(P＜0.05).裸鼠体内成瘤性实验提示:转染了C2基因的SGC7901细胞在裸鼠皮下形成肉眼可见的肿瘤结节所需时间较转染了空载体的SGC7901细胞长,分别为1周和2周,在相同时间内在裸鼠皮下形成的瘤结节的体积明显小于转染了空载体的细胞在裸鼠皮下形成的瘤结节的体积,分别平均为l 20和5 58 cm3(P＜0.01).结论C2基因在体内和体外均可抑制人胃癌细胞的成瘤性,在肿瘤形成速度和体积方面抑制了SGC7901细胞的恶性行为,提示C2基因可能通过确保蛋白翻译过程的准确性而阻止细胞无限生长,因此可能是一个具有抑制细胞增殖功能的监控分子或抑癌基因.
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蛋白翻译起始因子C2在肝癌、胃癌中的表达与分布
目的研究C2基因在肝细胞癌(HCC)、胃癌中的表达、分布及意义.方法利用免疫组化法检测C2蛋白在60例HCC、58例胃癌组织中的表达,Western blot法检测C2蛋白在10例HCC及其癌旁组织中的表达.结果60例HCC及42例癌旁组织中,C2蛋白阳性率分别为27 3%(17/60例)和83.3%(35/42例),C2蛋白在HCC癌组织中表达明显低于其癌旁组织(P＜0.001);C2的表达与病人年龄、HBsAg及AFP有明显关系(P＜0.05).Western blot结果与免疫组化一致.在HBXAg阳性的49例HCC中,C2蛋白阳性率为20.4%,在HBXAg阴性的11例HCC中,C2蛋白阳性率为63.6%.C2在HBXAg阳性的HCC中的表达明显低于HBXAg阴性者(P＜0.05).58例原发性胃癌及44例癌旁组织中,C2蛋白阳性率分别占41 4%(24/58例)和77.3%(34/44例).C2蛋白在胃癌组织中表达明显低于其癌旁组织(P＜0.05),且与胃癌组织的分化程度、浆膜浸润、肿瘤大小有明显的关系(P＜0.05).结论C2基因表达下调可能与HCC、胃癌的发生、发展有关.HBXAg对C2的抑制作用可能与HCC的发生,发展有关.C2可能是一潜在的抑癌基因.
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肝细胞肝癌中C2基因表达与HBxAg的关系
目的研究蛋白翻译起始因子C2在肝硬化(LC)、原发性肝细胞癌(HCC)中表达的意义,并探讨其与HBxAg表达的关系.方法用免疫组化方法检测C2,HBxAg在肝硬化(n=27),HCC(n=60)中蛋白水平的表达.Western blot法检测C2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达.结果在27例LC中,C2蛋白阳性率为77.8% (21/27),HBxAg阳性率为74.1% (20/27).60例HCC及42例癌旁组织中,C2蛋白阳性率分别占27.3% (17/60)和83.3% (35/42).在HBxAg阳性的49例HCC中,10例C2蛋白阳性,阳性率为20.4%,在HBxAg阴性11例HCC中,7例C2蛋白阳性,阳性率63.6%.C2蛋白在LC中的表达明显高于HCC (P<0.01),C2蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织(P<0.01);C2在HBxAg阳性HCC中表达明显低于HBxAg阴性HCC(P<0.05).Western blot与免疫组化结果一致.结论 C2蛋白表达下调及HBxAg对C2的抑制作用可能与HCC发生发展有关.
