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C2基因对人胃癌细胞生长特性的影响
目的探索新克隆的编码人蛋白翻译起始因子的全长基因(C2基因)对人胃癌细胞生长特性的影响. 方法将已构建的C2基因真核表达载体扩增纯化并转染人胃癌细胞系SG C 7901细胞,获得稳定转染细胞系,用流式细胞仪和免疫组化检测其C2蛋白表达状况,应用细胞计数法和四唑蓝比色试验绘制转化细胞的生长曲线.结果 C2基因转化的细胞高水平稳定表达C2蛋白,C2基因转化细胞生长速度减慢,其对数生长期为11d,较对照空载体转染细胞的(7d)明显延长. 结论 C2基因转染可引起胃癌细胞生长速度减慢,可能是一种潜在的蛋白翻译水平的抑癌因素.
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C2基因对人胃癌细胞成瘤性的影响
目的探索新克隆的编码人蛋白翻译起始因子的全长基因(C2基因)对人胃癌细胞体内、体外成瘤性的影响.方法将已构建的C2基因真核表达载体,与阴性对照的空载体扩增纯化并同时转染人胃癌细胞系SGC7901细胞,获得稳定高表达C2蛋白的人胃癌细胞株,应用平板克隆形成实验检测转化细胞的体外成瘤性,并在裸鼠体内进行肿瘤细胞体内成瘤性实验,了解C2基因转染对人胃癌细胞体内、体外成瘤性的影响.结果经Western Blot法和流式细胞术证实,C2基因转化细胞稳定高表达C2蛋白.平板克隆形成实验提示:转染了C2基因和空载体的两种SGC7901细胞的克隆形成率分别为43 8%和76 9%(P＜0.05).裸鼠体内成瘤性实验提示:转染了C2基因的SGC7901细胞在裸鼠皮下形成肉眼可见的肿瘤结节所需时间较转染了空载体的SGC7901细胞长,分别为1周和2周,在相同时间内在裸鼠皮下形成的瘤结节的体积明显小于转染了空载体的细胞在裸鼠皮下形成的瘤结节的体积,分别平均为l 20和5 58 cm3(P＜0.01).结论C2基因在体内和体外均可抑制人胃癌细胞的成瘤性,在肿瘤形成速度和体积方面抑制了SGC7901细胞的恶性行为,提示C2基因可能通过确保蛋白翻译过程的准确性而阻止细胞无限生长,因此可能是一个具有抑制细胞增殖功能的监控分子或抑癌基因.
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蛋白翻译起始因子C2在原发性肝细胞肝癌中表达的意义
［张庆，刘杰，张力，李青，王新，樊代明. 世界华人消化杂志，2001;9(5):533-537］ 目的研究C2 mRNA及其蛋白在原发性肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义. 方法用原位杂交检测C2 mRNA在21例HCC及其癌旁组织中的表达，ABC免疫组化法检测C2蛋白在60例HCC及其42例癌旁组织中的表达，Western blot检测C2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达. 结果 21例HCC及其癌旁组织中，C2 mRNA阳性率分别占23.8%(5/21)和85.7%(18/21). 60例HCC及42例癌旁组织中，C2蛋白阳性分别占27.3%(17/60)和83.3%(35/42). 27例肝硬变中，C2蛋白阳性率为77.8%(21/27). χ2检验：C2 mRNA及其蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织(P<0.001)；C2蛋白在肝硬变中的表达明显高于HCC癌组织(P<0.001)；C2的表达与患者年龄、HBsAg及AFP有明显关系(P<0.001)；碉与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无关；Western bolt与免疫组化结果一致. 结论 C2基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断. (何扬举)
